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- KHEC962C
- 2025年07月12日
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- 英文名：
tert-Butyl 4-bromo-1H-indazole-5-carboxylate
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无锡云萃生物
- CAS号：
1203662-37-6
- 规格：
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| 规格： | 5mg | 产品价格： | ￥100.0 |
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云萃
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文献和实验8.37 7.80 7.52 5.32 1.97 44.74 8.48 7.90 7.62 4.88 2.30 44.85 8.58 8.00 7.71 4.44 2.65 44.94 8.68 8.10 7.80 4.02 2.97 45.04 8.78 8.20 7.91 3.54 3.34 45.15 8.88 8.30
为初涉PCR的新手们准备了一道好菜，希望能使你们快速入门:)
；温度高特异性强，但过高则引物不能与模板牢固结合，DNA扩增效率下降；温度低产量高，但过低可造成引物与模板错配，非特异性产物增加。一般先由37℃反应条件开始，设置一系列对照反应，以确定某一特定反应的最适退火温度。也可根据引物的（G+C）%含量进行推测，把握试验的起始点，一般试验中退火温度Ta(annealing temperature)比扩增引物的融解温度TTm(melting temperature)低5℃，可按公式进行计算：Ta = Tm - 5℃= 4(G+C)+ 2(A+T) -5℃
；55℃可达24nt/s；37℃时为1.5nt/s，而22℃时低至0.25nt/s。高于90℃时DNA合成活性甚差，这种高温条件下，引物与模板已不能牢固结合。 在PCR反应混合液中，Taq酶于92.5℃,95℃及97.5℃保持其50%活力的时间分别为130、40及5～6min，在50次循环的PCR中当管内最高温度为95℃。每循环为20s时尚可保持65%活力。Taq 酶在95℃的半寿期为40min，故在PCR循环中选用的变性温度，不宜高于95℃。 Taq酶现已可用基因重组的方法生产，商品
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