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6-Methyl-1H-benzo[d][1,3]oxazine-2,4-dione
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无锡云萃生物
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云萃
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文献和实验8．加入400μL不完全培养基至6个试管中悬浮沉淀。 9．加入2μL 10mg/ml蛋白酶0至C试管，加入40μL 10mg/ml蛋白酶至D、E试管，40μL 10mg/ml的糜蛋白酶至管F。 10．将6个试管放置在震荡仪上，旋转开关，以最大的速度在37°C培育1h。 11．将6个试管用台式微量离心机离心30s。 12．吸出并丢弃上清液。 13．加入400μL不完全培养基至6个试管中用台式微量离心机离心30
细胞的转染率。转染率=RFP 阳性细胞数/ 细胞总数×100％。 （4）生长曲线绘制 将球状SU2 和RFP-SU2 经0.02 ％胰酶消化并离心后加人DMEM/F12 培养液制成单细胞悬液并行细胞计数。将两组细胞分别分成9孔，每孔设置3 个副孔，细胞以5×103 ／孔接种于96 孔板，置于37℃、5％ CO2 条件下培养。分别于培养的24h、2d、3d、4d、5d、6d、7d 进行检测，每孔加入5mg/ml MTT 溶液20μl，37℃、5％CO2 的条件下孵育4h 后终止培养。小心吸净
步骤 （1）用包被Buffer稀释的重组人TFAR19（1mg/ml）包被ELISA板, 100ml/well, 37℃孵育2h或4℃过夜（一般24h以上）。 （2）洗涤Buffer洗板三次，加入封闭液，200 ml/well ， 37℃孵育2h或4℃过夜。 （3）洗涤Buffer洗板三次，加入不同稀释度的病人血清（3个重复孔）100ml/well ，37°C孵育1h。设包被Buffer、洗涤Buffer 、封闭液为阴性对照。 （4）洗涤Buffer洗板三次，加入1：2500稀释的HRP标记的抗
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