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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
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- 英文名:
4,6-Diaminopyrimidine-5-carbaldehyde
- 库存:
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- 供应商:
无锡云萃生物
- CAS号:
109831-68-7
- 规格:
5mg/50mg/100mg/500mg
| 规格: | 5mg | 产品价格: | ¥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 100mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 500mg | 产品价格: | ¥100.0 |
云萃
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文献和实验基:完全RPMI-1640或DMEM培养基99mlHT贮存液1ml•HAT培养基:完全RPMI-1640或DMEM培养基98mlHT贮存液1mlA贮存液1ml②氨基喋呤(A)贮存液(100×,4×10-5mol/L)称取1.76mg氨基喋呤(Aminopterin MW 440.4),溶于90ml超纯水或四蒸水中,滴加1mol/L NaOH 0.5ml中和,再补加超纯水或四蒸水至100ml。过滤除菌,分装小瓶(2ml/瓶),-20℃保存。③次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷(HT)贮存液(100×,H:10
核悬液1/2量的0.1n HCl , 0.5% Triton X-100。室温停留10min。加入IBM-0.25%Triton X-100(IBM配方:50mmol/l KCl, 10mmol/L MgSO4 , 5mmol/L HEPES pH8.0)。再离心,重复IBM漂洗(这时细胞核可在不染色情况下,以荧光显微镜观察)后,以2×SSC-0.1%Tween漂洗1×3min,继之加入等量2%的多聚甲醛在1×PBS-5mmol/l MgSO4 。在室温静置站立10min。倾去上清液,加IBm
temperature)比扩增引物的融解温度TTm(melting temperature)低5℃,可按公式进行计算: Ta = Tm - 5℃= 4(G+C)+ 2(A+T) -5℃ 其中A,T,G,C分别表示相应碱基的个数。例如,20个碱基的引物,如果(G+C)%含量为50%时,则Ta的起点可设在55℃。在典型的引物浓度时(如0.2μmol/L),退火反应数秒即可完成,长时间退火没有必要。 3.引物延伸温度温度的选择取决于Taq DNA聚合酶的最适温度。一般取70~75℃,在72℃时酶催化
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