10－脱乙酰基巴卡丁III,10-Deacetylbacca

红豆杉提取液的过滤

红豆杉（Taxus）又名紫杉，也称赤柏松，生于海拔1000～1200m处的山地，是世界上公认的濒临灭绝天然珍稀植物，从其根、皮、茎、叶中提取的紫杉醇（taxol）是目前世界上最有效的抗癌药物之一。全球每年大约需要1500～2500kg紫杉醇，而1kg树皮仅能提取50～100mg。10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ（又称10-脱乙酰基浆果赤霉素Ⅲ，10-deacetylbaccatinⅢ，10-DABⅢ）为有抑制肿瘤作用的紫杉烷二萜类化合物。Bissery等报道，可利用10-DABⅢ合成具有比紫杉醇更高

抗癌药物紫杉醇

了，总共经过 28 个步骤，化学家可在试管内完全合成紫杉醇，当时可是一件大事！虽然最后合成的紫杉醇产率仅有 0.5％，不过化学家并不气馁，他们知道如果将合成的步骤缩短，就有商业化生产的价值。 经过多方寻觅，最后发现红豆杉的萃取物中含有浓度甚高的紫杉醇主结构 10－去乙醯巴卡亭III（简称 10-DAB），这种成分在少数红豆杉品种的枝叶中浓度高达 1,000 ppm（ppm，每公斤干重的毫克数），是紫杉醇的三倍以上。利用 10-DAB 作为合成的起始物，只要约 10 个步骤就可合成紫杉

目的基因片段的PCR扩增与克隆

预冷的溶液I中，剧烈振荡； ②加新配制的溶液II200µl，盖紧管盖，迅速颠倒混匀，将离心管放置于冰上； ③加150µl用冰预冷的溶液III，盖紧管口，将管倒置后温和地振荡10秒，使溶液III在粘稠的细菌裂解物中分散均匀，之后将管置于冰上3-5分钟； ④用微量离心机于4℃、12,000rpm离心5分钟，将上清液移到另一离心管中； ⑤加等量酚：氯仿（V/V），振荡均匀，用微量离心机于4℃、12,000rpm离心2分钟，将上清液转移到另一离心管中； ⑥用2倍体积的乙醇沉淀双链