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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 检测范围:
详询
- 检测方法:
酶联免疫法
- 应用:
科研
- 适应物种:
人
- 标记物:
hrp辣根过氧化物酶
- 样本:
血清、血浆、组织液等液体样本
- 规格:
96T/48T
本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)含量。
人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)水平。用纯化的人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1),再与HRP标记的人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)浓度。
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人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒组成:



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标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作程序总结:
1:准备试剂、样品和标准品
2:加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟
3:洗板5次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟
4:洗板5次,加入显色液A、B,37℃显色30分钟
5:加入终止液
6:15分钟之内读OD值
7:进行计算。以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
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人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒注意事项
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温 20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响 OD 值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9. 不能使用过期产品。
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文献和实验受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 二、ELISA的类型 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂:(1)固相的抗原或抗体,即"免疫吸附剂"(immunosorbent);(2)酶标记的抗原或抗体,称为"结合物"(conjugate);(3)酶反应的底物。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。用于临床检验的ELISA
即与标本中的IgM成正相关。此法常用于病毒性感染的早期诊断。甲型肝炎病毒(HAV)抗体的检测模式见图2-7. 类风湿因子(RF)同样能干扰捕获包被法测定IgM抗体,导致假阳性反应。因此中和IgG的间接法近来颇受青睐,用这类试剂检测抗CMV IgGM和抗弓形虫IgM抗体已获成功。 (七)ABS-ELISA法 ABS为亲和素(avidin)生物素(biotin)系统(system)的略语。亲和素是一种糖蛋白,分子量60000,每个分子由4个能和生物素结合的亚基组成。生物素为小分子化合物,分子量244
性核素标记,应用范围受到一定限制,为了进一步提高检测的灵敏度和操作的安全性,进入90年代又陆续发明了各种酶标记法和化学发光法的竞争性ELISA检测试剂盒,这一类检测方法的根本原理都是基于抗体抗原的免疫反应,所有这些试剂盒中采用的抗体全部是兔抗血清或者是经过特异亲和提纯之后的抗cAMP或cGMP的兔多抗,毫无疑问,兔多抗在约四十年的cAMP,cGMP定量检测中做出了巨大贡献,但同时它也有着明显的缺陷: 1,兔多抗对cAMP,cGMP的特异性不高,会与其他核苷类似分子发生交叉











