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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
SV40转染人成骨细胞;hFOB1.19
- 细胞类型:
SV40转染人成骨细胞;hFOB1.19
- 肿瘤类型:
/
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
100
- 英文名:
hFOB1.19
- 生长状态:
贴壁
- 年限:
永久
- 运输方式:
快递形式
- 器官来源:
SV40转染人成骨细胞;hFOB1.19
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
正常
- 免疫类型:
/
- 物种来源:
SV40转染人成骨细胞;hFOB1.19
- 相关疾病:
/
- 组织来源:
SV40转染人成骨细胞;hFOB1.19
- 规格:
T25培养瓶
在0.6mg/ml新霉素G418存在下,用温度敏感的表达载体pUCSVisA58转染自然流产的胎儿四肢组织,建立了此细胞系。在许可温度33.5oC下细胞分裂很快,而在限制温度39.5oC下细胞极少分裂或不分裂。这些细胞具有分化为表达造骨细胞表型的成熟造骨细胞的能力。这些细胞提供了一个同质化的快速增殖模型系统,用于研究正常人造骨细胞的分化,造骨细胞生理和激素,生长因子,和对造骨细胞的功能及分化有影响的细胞因子。
| 细胞英文名称 | hFOB1.19 | 细胞中文名称 | SV40转染人成骨细胞 |
| 形态特性 | 生长特性 | 贴壁生长 | |
| 培养体系 | DMEM/F12+0.3mg/mlG418+10%FBS | ||
| 传代方法 | 1:2传代 | 传代情况 | |
| 冻存条件 | 无血清细胞冻存液 | ||
| 备注 | 悬浮细胞离心收集 | ||
STR:Amelogenin:X;CSF1PO:10,13;D12S391:20,23;D13S317:11,12;D16S539:9,13;D18S51:10,17;D19S433:13,15;D21S11:29,32.2;D2S1338:23,24;D3S1358:17,18;D5S818:11,12;D6S1043:13,16;D7S820:8,10;D8S1179:10,14;FGA:19,22;Penta E:8,11;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,18;



1、 细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃, 5%CO2 细胞
培养箱中培养;
2、 细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS: DMSO=9 : 1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃, 5%CO2 细胞培养箱中培养


SV40转染人成骨细胞;hFOB1.19收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,悬浮细胞需离心处理,加入6ml新鲜完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤说明书。
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文献和实验光素酶活力。在完成萤火虫荧光素酶活力(“实验”报告基因)的测定后,萤火虫发光被快速湮灭,并同时激活海洋腔肠荧光素酶的发光反应(“对照” 报告基因)。因此,DLR测试系统整合了两个测试化学,对共表达的两个报告基因作快速地定量,酶来自转染细胞裂解液,或无细胞转录翻译反应。萤火虫荧光素酶测试的线性范围延伸达酶浓度的8个数量级,可测定≤1fg (大约10 -20 摩尔)的实验报告基因酶(图3A)。用双荧光素酶报告基因测试系统,海洋腔肠荧光素酶的线性范围达酶浓度的7个数量级,较低的底限是≤10fg (大约3×10 -19
细胞名称 293 和 293T种属人组织来源 293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用磷酸钙转染效率可高达50%。蛋白表达水平高,转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外(分泌的或膜的)蛋白的便捷方式。形态特点 上皮细胞致瘤性 +产物或抗原 大T抗原染色体核型 亚三倍体人细胞系。染色体众数为64,30%的细胞
关于293/293T细胞1、种属都为人,不是鼠。2、来源:293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3(PO4)2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高,转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。3、形态为上皮细胞,能致瘤。4、染色体核型:亚三倍体人细胞系。染色体众数为64,30










