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1-Bromo-3-fluoro-2-nitrobenzene
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无锡云萃生物
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886762-70-5
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5mg/50mg/100mg/500mg
| 规格： | 5mg | 产品价格： | ￥100.0 |
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文献和实验进行第二链同位素掺入放射性活性测定,可取出10μl 至另一eppendorf 管,加入2-5μCi[α-32 P] dCTP。 3、14℃温浴2 小时(如需合成长于3kb 的cDNA, 则需延长至3-4 小时)。 4、掺入测定eppendorf 管中加入90μl 50mM EDTA, 取10μl 进行同位素掺入放射性测定,余下的可进行电泳分析。 5、cDNA 第二链合成离心管反应液70℃处理10 分钟, 低速离心后置冰上。 6、加入2μ T4 DNA 聚合酶, 37℃温浴10 分钟
的小份,贮存于-70℃可保存半年。 三、 转化 1、从-70℃冰箱中取200μl感受态细胞悬液,室温下使其解冻,解冻后立即置冰上。 2、 加入pBS质粒DNA溶液(含量不超过50ng,体积不超过10μl),轻轻摇匀,冰上放置30分钟后。 3、42℃水浴中热击90秒或37℃水浴5分钟,热击后迅速置于冰上冷却3-5分钟。 4、向管中加入1ml LB液体培养基(不含Amp),混匀后37℃振荡培养1小时,使细菌恢复正常生长状态,并表达质粒编码的抗生素抗性基因(Ampr )。 5、将上述菌液摇匀
,如需进行第二链同位素掺入放射性活性测定,可取出10μl至另一eppendorf管,加入2-5μCi[α-32 P] dCTP。 3、14℃温浴2小时(如需合成长于3kb的cDNA, 则需延长至3-4小时)。 4、 掺入测定eppendorf管中加入90μl 50mM EDTA, 取10μl进行同位素掺入放射性测定,余下的可进行电泳分析。 5、 cDNA第二链合成离心管反应液70℃处理10分钟, 低速离心后置冰上。 6、 加入2μ T4 DNA聚合酶, 37℃温浴10分钟
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