对二乙氨.基.苯乙酮,1-(4-(Diethylamino)

巢式PCR与序列分析方法在确定HBV传播途径中的应用

测定6对父儿的HBV S基因第451-660位核苷酸。2对父儿的C基因第2022-2321位核苷酸（从HBV的EcoR1酶切位点计算）。6对父儿S区此段序列核苷酸同源性98%-100%。第3、4、5、6例胎儿的此段序列与父亲完全一致，其中第4对父亲血清、精子与胎儿血清HBV基因此段序列完全一致，两个位置均与原型株有差异，第499、508位原型株为C,此对父儿为A、G,此变异未引起表型变化。第1例胎儿个别碱基与父亲不同，491、494、505、544、546、581、586、592位碱基父亲为T、T、C

在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的策略

[20]和组成发卡结构的保护性元件，阻止核酸外切酶对mRNA的降解，从而延长mRNA的半衰期[21]。 除了上述对基因表达的效率有直接影响的元件以外，载体还含有抗生素抗性基因，以方便质粒的筛选和传代。氨苄青霉素是最常用的抗性标记。但在生产人用治疗性蛋白时，最好选择其他抗性标记(如Tet)以避免可能发生的过敏反应[22]。质粒的拷贝数由复制起点决定。 在特殊情况下，选用失控复制子能够获得大量的质粒拷贝数和较高产量的质粒编码蛋白[23，24]。但在另外一些情况下，选用超过pBR

常用试剂配制方法

1.乙醇制氢氧化钾试液　　可取用乙醇制氢氧化钾液（0.5mol/L）。 2.乙醇制氨试液　　取无水乙醇，加浓氨试液使100ml中含NH3 9～11g，即得。　　本液应置橡皮塞瓶中保存。　 3.乙醇制溴化汞试液　　取溴化汞2.5g，加乙醇50ml，微热使溶解，即得。　　本液应置玻璃塞瓶内，在暗处保存。 4.二乙基二硫代氨基甲酸银试液　　取二乙基二硫代氨基甲酸银0.25g，加氯仿适量与三乙胺1.8ml，加氯仿至100ml，搅拌使溶解，放置过夜，用脱脂棉滤过，即得。　　本液应置棕色玻璃