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文献和实验组织中的细胞周期和凋亡检测方法之一－－PI法schoman无论是肿瘤或其它正常新鲜组织均可用PI（碘化丙啶）的方法来检测，这是一种常见而且便宜的方法。主要操作步骤如下：1、组织块用0.25%胰酶消化30min－1h。2、200－400目筛网过滤细胞，获得单细胞悬液。3、75％乙醇（－20度预冷）固定细胞1h。4、加入PI（终浓度50ug／ml）和无DNA酶污染的RNA酶（终浓度50ug／ml）1ml染色30min－1h。5、流式细胞仪检测细胞周期和凋亡。注意事项： 1、组织消化后使细胞
30min。 （7）缓冲液i 15min×2室温。 （8）缓冲液III（100mmol/l Tris -HCl, 100mmol/L NaCl, 50mmol/L MgCl 2 ,pH9.5）室温2min。 5．显色 （1）显色液配制：缓冲液III：1ml中加入4.5μl四氮唑蓝（NBT），3.5μl X-磷酸盐（5-溴-4-氯-3吲哚磷酸盐（BCIP配成））。30μl/每张切片，置暗处显色30min到2h。定时抽查切片
核呈红色。 3.脂肪的染色方法：脂肪染色常用脂溶性色素，如苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、油红O等。这类染料既能溶于有机溶剂如乙醇、丙酮内，又能溶于脂肪内。由于该类染料在脂质中溶解度较大，染色时染料便从染液中转移到被染的脂质中去，使脂质呈染液的颜色。主要用于显示组织脏器的脂肪变性和类脂质的异常沉着。 苏丹Ⅲ(Ⅳ)染色方法： (1) 冰冻切片用70%乙醇漂洗，不超过30s。 (2) 切片入苏丹Ⅲ(Ⅳ)染液中3~15min或延长至1h。 (3)新50%~70
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