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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
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- 英文名:
Methyl 3,4,5-tris(benzyloxy)benzoate
- 库存:
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- 供应商:
无锡云萃生物
- CAS号:
70424-94-1
- 规格:
5mg/50mg/100mg/500mg
| 规格: | 5mg | 产品价格: | ¥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 100mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 500mg | 产品价格: | ¥100.0 |
云萃
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文献和实验固相核酸杂交多是在膜上进行,因此,以下主要介绍固相膜的核酸分子杂交方法: 1.DNA的变性 DNA变性解链是杂交成功的关键。Southern印迹杂交时DNA在凝胶中变性,变性方法是将凝胶浸在数倍体积的1.5mol/l NaCl和0.5mol/l NaOH中1h然后用数倍体积的1mol/l Tris �HCl(Ph8.0)和1.5mol/l NaCl溶液中和1h。DNA受酸、碱、热等处理均能发生变性,但强酸会使核酸降解。一般认为碱变性较好,可避免DNA降解。热变性在要低DNA浓度
主要程序(1) 抗原+生物素化抗体→抗原-生物素化抗体复合物;(2) 加亲合素→抗原-生物素化抗体-亲合素复合物;(3) 加生物素化DNA→抗原-生物素化抗体-亲合素-生物素化DNA;(4) PCR扩增生物素化DNA部分。实验步骤(1)制备生物素化DNA将噬粒 BLuescript skt,用生物素标记的M13引物进行PCR扩增制备出含T3和T7引物序列的280bp DNa段,即为生物素化DNA。(2)免疫PCR模式1. 试剂包被缓冲液:20mmol/L Tris-HCI(pH9.5),含
。 PCR反应条件的选择 PCR反应条件为温度、时间和循环次数。 温度与时间的设置: 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40 ~60℃,引物退火并结合到靶序列上,然后快速升温至70~75℃,在Taq DNA 聚合酶的作用下,使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因(长度为100~300bp时)可采用二温度点法, 除变性温度外、退火与延伸温度可合二为一,一般采用94℃变性,65℃左右退火
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