(S)-4,12-Bis(4-甲.氧.基.苯基)-[2.2]

聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物同工酶

剂，在痕量氧存在下，核黄素经光解形成无色基，无色基被氧再氧化成自由基，从而引起聚合作用。过量的氧会阻止链长的增加，应避免过量氧的存在。 光聚合形成的凝胶孔径较大，而且随着时间的延长而逐渐变小，不太稳定，所以用它制备大孔径的浓缩胶较为合适。采用化学聚合形成的凝胶孔径较小，而且重复性好，常用来制备分离胶。 聚丙烯酰胺的基本结构，为丙烯酰胺单位构成的长链，链与链之间通过甲叉桥联结在一起。链的纵横交错，形成三维网状结构，使凝胶具有分子筛性质。网状结构还能限制蛋白质等样品的扩散运动，使凝胶具有良好的抗对流作用

垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质

空隙)，两边用夹子夹住。将1%琼脂糖融化，冷至50℃左右，用吸管吸取热的1%琼脂沿电泳槽的两边条内侧加入电泳槽的底槽中，封住缝隙，冷后琼脂凝固，待用。2.凝胶的制备(1)分离胶的制备称取Acr3.2g，Bis16mg，过硫酸铵16mg 一起置于灯泡瓶中，然后加入试剂A2ml，水14ml，摇匀，使其溶解，然后用真空泵抽气10min，以防止分离胶中的氧气妨碍胶的聚合，随后再加TEMED2滴(滴管内径小于2mm)，混匀。用吸管吸取分离胶，沿壁加入垂直平板电泳槽中，直至胶液的高度达电泳槽高度的2/3左右，上面

聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）分离血清蛋白质（核黄素-TEMED聚合系统）（图）

。 （2）光聚合：光聚合通常用核黄素为催化剂。不一定加TEMED即能聚合，但加入则可加速聚合。 光聚合通常需要有痕量氧存在，核黄素经光解形成无色基。后者被氧再氧化形成自由基，从而引发聚合作用。但过量的氧会阻止链长的增加，应该避免过量的氧存在。 光聚合通常用日光灯或普通钨丝灯泡作光源，直接日光或室内强散射光也可以。 用核黄素进行光聚合的优点是：①核黄素的用量很低（1毫克/100毫升）；②通过光照可以预定聚合时间，但光聚合的凝胶孔径较大，而且随时间延长而逐渐变小，不太稳定，所以用它制备大孔凝胶较适合。化学