(1,3-双(2,6-二异丙.基.苯基)-1H-咪唑-2(3
H)-亚基)氯化银(III),(1,3-Bis(2,6-diisopropylphenyl)-1H-imidazol-2(3H)-ylidene)silver(III) chloride,97%,873297-19-9- ￥100
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(1,3-Bis(2,6-diisopropylphenyl)-1H-imidazol-2(3H)-ylidene)silver(III) chloride
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文献和实验DMSO 100μl/孔,充分混匀以溶解底物。酸性条件使培养液中酚红指示剂变为黄色,以利于对MTT-甲 转化物的测定。6、将微量测定板置室温数分钟,保证转变的底物结晶被溶解。7、用酶标光度计以检测波长为570nm,参考波长为630nm分别测量OD值。测定应在酸化异丙醇加入后1h内完成。OD570nm－OD 630nm,再减去培养液对照的OD值。8、用IL-1标准品各稀释度IL-1含量(X)和各稀释度对应的OD值(Y)作直线回归,按上述概率单位分析法计算待测样品IL-2的活性单位(u/ml)。（三
按要求取材放入20%蔗糖中，4℃过夜，次日可行冰冻切片。 (二)切片及细胞标本的制备 1． 载玻片的处理 因为原位杂交一般在载玻片上进行，所以载玻片必须保持清洁且不能有任何核酸酶的污染。一般载玻片可先经洗衣粉浸泡过夜，用流水冲洗、酸中浸泡4～8h，再用流水冲洗，双蒸水洗2～3次。在160℃烤箱中烘烤2～4h。亦可经15磅高压灭菌20min处理，可将载玻片上的核酸酶消除。 2． 组织切片与预处理 （1）冰冻切片：新鲜组织也可在取材后，直接置入液氮中迅速骤冷，冷冻切片后，4％多聚
（proopiomelanocortin,POMC）mRNA的Oligo 探针，其理想工作浓度为342ng/ml(0.342ng/μl)。 （2）预杂交后以2×SSC漂洗，以吸水纸拭干切片周围水份，加30μl杂交液在切片上，加硅化盖玻片，在37℃过夜。如探针大于36碱基则杂交温度为42℃。次日室温2×SSC液漂洗切片1h，1×SSC漂洗切片1h（室温），0.5×SSc 37℃漂洗半小时，0.5×SSC室温漂洗半小时。 4．地高辛显示（同前）。 （二）同位素标记寡核苷酸探针的应用 1．组织处理大鼠应用
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