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文献和实验实验材料 •BSA(1 mg/ml),0.05 g的BSA(Sigma-Aldrich Ltd.)溶于50ml ddH2O中,每Eppendorf管约加入1ml溶液,并在-20℃下冷冻。 •预染色marker (Bio-Rad) •ProMarker(Wealtec) •两套玻璃板与校正卡,厚玻璃板与U形玻璃板,0.75 mm厚胶条和一个0.75 mm 10齿梳(Wealtec) •浓度为12%的SDS-PAGE分离胶(0.75 mm);2.31 ml ddH
在无血清细胞培养条件下将人 iPS 细胞体外分化为结肠类器官
玻片中,用P-200移液管去除残留的1X PBS (D8537)。避免通过未剪去尖端的P-200移液管吸入类器官。 用0.5 mL Blocking Buffer(5%马血清+ 0.5% Triton X-100,溶于1X PBS中)在4℃留置一夜或室温下留置2-4小时,渗透固定类器官。注:推荐使用与二抗宿主同物种的血清。 用P-200移液管从含类器官的载玻片上移除Blocking Buffer。避免P-200移液管头吸入类器官。 在Blocking Buffer中制备一抗(300-500 µL
反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外,不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。 三、实验材料、主要仪器和试剂 1.实验材料 绿豆芽下胚轴(也可用其它材料如面粉) 2.仪器 (1)722 型(或721 型)分光光度计 (2)4 000r/min 的离心机 (3)分析天平 (4)容量瓶(50mL) (5)量筒 (6)移液管(0.5mL、1mL、5mL) 3.试剂(纯度均为分析纯)
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