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- 英文名:
2-Chloro-5-fluoro-4-methoxypyrimidine
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无锡云萃生物
- CAS号:
37554-70-4
- 规格:
5mg/50mg/100mg/500mg
| 规格: | 5mg | 产品价格: | ¥100.0 |
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云萃
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文献和实验] 1、整个操作要带口罩及一次性手套,并尽可能在低温下操作。 2、加氯仿前的匀浆液可在-70℃保存一个月以上,RNA 沉淀在70%乙醇中可在4℃保存一周,-20℃保存一年。 (二)mRNA 提取 由于mRNA 末端含有多poly(A)+,当总RNA 流径oligo(dT)纤维素时,在高盐缓冲液作用下, mRNA 被特异的吸附在oligo(dT)纤维素柱上,在低盐浓度或蒸馏水中,mRNA 可被洗下,经过两次 oligo(dT) 纤维素柱,可得到较纯的mRNA
的小份,贮存于-70℃可保存半年。 三、 转化 1、从-70℃冰箱中取200μl感受态细胞悬液,室温下使其解冻,解冻后立即置冰上。 2、 加入pBS质粒DNA溶液(含量不超过50ng,体积不超过10μl),轻轻摇匀,冰上放置30分钟后。 3、42℃水浴中热击90秒或37℃水浴5分钟,热击后迅速置于冰上冷却3-5分钟。 4、向管中加入1ml LB液体培养基(不含Amp),混匀后37℃振荡培养1小时,使细菌恢复正常生长状态,并表达质粒编码的抗生素抗性基因(Ampr )。 5、将上述菌液摇匀
5、在连接反应中,如不对载体分子进行去5'磷酸基处理,便用过量的外源DNA片段(2-5倍),这将有助于减少载体的自身环化,增加外源DNA和载体连接的机会。 6、麦康凯选择性琼脂组成的平板,在含有适当抗生素时,携有载体DNA的转化子为淡红色菌落,而携有带插入片段的重组质粒转化子为白色菌落。该产品筛选效果同蓝白斑筛选,且价格低廉。但需及时挑取白色菌落,当培养时间延长,白色菌落会逐渐变成微红色,影响挑选。 7、X-gal是5-溴-4-氯-3-吲哚-b-D-半乳糖(5-bromo-4-chloro
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