2,5-二甲氧基吡啶,2,5-Dimethoxypyridi

手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因

DNA 修复方式，这会造成 DNA 的删除和插入。对于基因敲入，加入一个可同源重组的 DNA 片段, 细胞会将这个一段 DNA 片段插入进基因组 。二、两次切割介导的基因敲除与先前的敲除策略并不一样，我们改进的这个操作系统可以将基因的删除做到可控的特定长度。我们正在基因组的一个特定的区域两边各引入一个向导性 RNA。这两个向导性 RNA 指引 Cas9 酶在这两个位点进行切割。然后切割后末端通过 NHEJ 连接上。通过这个策略，我们可以将一个基因的独立外显子或者整个基因敲除掉。如图 2 所示。图

生物标本常用分离液的配制

。 配方二 水和氯醛溶液 称取 5 克水和氯醛，用蒸馏水溶解，再稀释到 100 毫升，就得到 5% 水合氯醛溶液。 从洗净的动物胃、肠和口腔内壁上取下上皮组织一小块，投入以上溶液中，浸泡 24 ～ 48 小时。 3 、神经细胞分离液 配方一 可以用上皮细胞分离液配方一福尔马林 — 氯化钠溶液来分离神经细胞（见 2 ）。 配方二 硼酸生理盐水溶液 在生理盐水溶液内加入一些硼酸，搅拌

石蜡切片及染色过程

的石蜡熔点为52—56℃.7. 包埋: 先将熔化的石蜡倒入包埋框再用加热的镊子将组织块放入. 包埋面必须平整. 包埋后石蜡稍凝后可移入冷水或冰箱中加速凝固.8. 切片: 修块→切片→展片→捞片→烤片. 二、 HE染色1. 染色前切片处理(1) 脱福尔马林色素.(2) 脱汞盐结晶.(3) 脱黑色素. 2. 染色步骤 二 甲苯脱蜡(10’)→ 无水乙醇洗去二甲苯(1’×2次)→95%酒精(1’)→90%酒精(1’)→85%酒精(1’)→自来水洗(2’)→苏木精染色(1—5’)→