2,5-二甲氧基吡啶,2,5-Dimethoxypyridi

手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因

DNA 修复方式，这会造成 DNA 的删除和插入。对于基因敲入，加入一个可同源重组的 DNA 片段, 细胞会将这个一段 DNA 片段插入进基因组 。二、两次切割介导的基因敲除与先前的敲除策略并不一样，我们改进的这个操作系统可以将基因的删除做到可控的特定长度。我们正在基因组的一个特定的区域两边各引入一个向导性 RNA。这两个向导性 RNA 指引 Cas9 酶在这两个位点进行切割。然后切割后末端通过 NHEJ 连接上。通过这个策略，我们可以将一个基因的独立外显子或者整个基因敲除掉。如图 2 所示。图

GUS报告基因的定性和定量检测

4配制方法：将17.907 g Na2HPO4溶于水，定容至100 ml。0.5 M NaH2PO4的配制方法：将7.800 g NaH2PO4溶于水，定容至100 ml。2. 染色步骤（1）染色：加入适量配制好的GUS 染液于24孔板的孔中，将待测样品浸到GUS染液中，将24孔板置于37℃保温箱中放置6 h。（2）漂洗：先后用50%，70%，100%的乙醇漂洗样品，每次浸泡5分钟。（3）脱色：加入100%乙醇浸泡直至完全脱色。（4）记录：在体视显微镜下拍照记录。二、GUS报导基因的定量检测GUS

生物标本常用分离液的配制

。 配方二 水和氯醛溶液 称取 5 克水和氯醛，用蒸馏水溶解，再稀释到 100 毫升，就得到 5% 水合氯醛溶液。 从洗净的动物胃、肠和口腔内壁上取下上皮组织一小块，投入以上溶液中，浸泡 24 ～ 48 小时。 3 、神经细胞分离液 配方一 可以用上皮细胞分离液配方一福尔马林 — 氯化钠溶液来分离神经细胞（见 2 ）。 配方二 硼酸生理盐水溶液 在生理盐水溶液内加入一些硼酸，搅拌