2-甲硫基嘧啶-5-甲醛,2-(Methylthio)pyr

浅析染色质免疫沉淀（ChIP）技术在 DNA 与蛋白质相互作用研究中的重要性

-19]； xChIP：用来研究DNA及低结合力蛋白，采用甲醛或紫外线进行 DNA 和蛋白交联，超声波片段化染色质，然后进行片段富集及后续分析，适用于多数非组蛋白的蛋白，例如 [9, 15, 20]。 X-ChIP 试验的一般过程 以上两种方法在分离 DNA-蛋白质复合物之后，对 DNA 进行 PCR 扩增，验证目标序列的存在。除验证实验外，ChIP DNA也可以进行测序分析，这种方法被称为 ChIP-seq [22] ；也可做芯片分析，这种方法被称为 ChIP on CHIP 或 ChIP

浅析染色质免疫沉淀（ChIP）技术在DNA与蛋白质相互作用研究中的重要性

nChIP：用来研究DNA及高结合力蛋白，采用微球菌核酸酶（micrococcal nuclease）消化染色质，然后进行片段富集及后续分析，适用于组蛋白及其异构体，例如 [17-19] ； 2.    xChIP：用来研究DNA及低结合力蛋白，采用甲醛或紫外线进行DNA和蛋白交联，超声波片段化染色质，然后进行片段富集及后续分析，适用于多数非组蛋白的蛋白，例如 [9, 15, 20] 。 X-ChIP试验的一般过程

原创:下游纯化简易讲义

；在蛋白酶缺陷的宿主中表达重组蛋白 由于不同的色谱方法的原理不同，其对样品的要求也不相同，所以必须在进行色谱之前，根据特定色谱方法的要求对样品进行进一步的处理。如下表所示： 表3 不同色谱方法对于样品的要求 样品参数  离子交换色谱  疏水作用色谱  凝胶过滤色谱 样品体积  无限制  无限制  一般柱体积的1-5% 样品量  最大理论载量的10-20%  最大理论载量的10-20%  仅受到样品粘度限制 样品粘度  约 pH值／盐浓度  同平衡缓冲液（低盐）  同平衡缓冲液（高盐）