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人过氧化氢(H2O2)酶联免疫分析试剂盒

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  • ¥800 - 1200
  • YLKBIO
  • 1pg/ml-40pg/ml
  • YLK-E0091
  • 国产
  • 2025年07月10日
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    • 详细信息
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    • 供应商

      优利科(上海)生命科学有限公司

    • 库存

      100

    • 样本

      血清、血浆、组织液等液体样本

    • 标记物

      hrp辣根过氧化物酶

    • 适应物种

    • 应用

      科研

    • 检测方法

      酶联免疫法

    • 检测范围

      1pg/ml-40pg/ml

    • 规格

      96T/48T

    人过氧化氢(H2O2)酶联免疫分析试剂盒

    本试剂盒仅供研究使用。
    检测范围:                                                          96T
    1pg/ml-40pg/ml

    使用目的:
    本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中过氧化氢(H2O2)含量

    相关图片(一):

    产品细节图片1
    实验原理
    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人过氧化氢(H2O2水平。用纯化的人过氧化氢(H2O2抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入过氧化氢(H2O2),再与HRP标记的过氧化氢(H2O2抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的过氧化氢(H2O2呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人过氧化氢(H2O2浓度。
    试剂盒组成

     
    1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
    2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(80pg/ml) 0.5ml×1瓶
    3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
    4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
    5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 
    6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
    标本要求
    1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于
    -20℃ 保存,但应避免反复冻融
    2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

    相关图片(二):
    产品细节图片2

    操作步骤

     
    1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
    40pg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
    20pg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
    10pg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
    5pg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
    2.5pg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液


     
    1. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
    2. 温育:用封板膜封板后置 37℃ 温育30分钟。  
    3. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
    4. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
    5. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
    6. 温育:操作同3。
    7. 洗涤:操作同5。
    8. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀, 37℃ 避光显色10分钟.
    9. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
    10. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
    操作程序总结:
    产品细节图片3

    计算
      以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

    相关图片(三):

    产品细节图片4
    注意事项
    1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
    2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
    3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

     
    4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
    5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
    6.底物请避光保存。
    7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
    8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
    9.本试剂不同批号组分不得混用。
    保存条件及有效期
    1.试剂盒保存:;2
    -8
    2.有效期:6个月

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    图标文献和实验
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    • 大鼠过氧化氢(H2O2)酶联免疫分析

      大鼠过氧化氢(H2O2) 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用         目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中 过氧化氢 (H2O2) 的含量。 实验原理:    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠过氧化氢 (H2O2) 水平。用纯化的大鼠过氧化氢 (H2O2) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入过氧化氢 (H2O2) ,再与 HRP 标记的过氧化氢 (H2O2

    • 免疫组化主要步骤

      时间,一般为12-15min.6. 抗原修复:脱蜡后在清水中冲洗一段时间,加入3%H2O2浸泡10min,从而除去内源性的过氧化氢酶,然后倒掉H2O2,在清水中洗两次,再加入柠檬酸 缓冲液,放入微波炉中蒸煮3min(中火),一般刚到沸腾即可,冷却至室温,然后再蒸煮一次,冷却至室温,蒸煮的目的是为了使抗原的位点暴露出来。7. 血清封闭:冷却至室温后,将柠檬酸缓冲液倒掉,水洗2次,并将载玻片置于PBS中5min,洗2次,擦干组织周围的PBS液,马上加上血清,使一些非特异 性的位点封闭起来,然后放入37°C温箱中

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    图标技术资料

    资料下载:

    样品处理方法.doc 附 (下载 0 次)

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