4,4’-二氨基-2,2’-二甲基联.苯,2,2'-Dime

应用末端截切、进化、再延长技术提高酶稳定性的方法

，pH 7.0。 ( 16 ) 4 ml Ni-氨基三乙酸（NTA) 柱子：4 ml Ni-NTA 高流速介质（Qiagen)。 ( 17 ) 咪唑缓冲液：50 mmol/L 磷酸钠、0.25 mol/L 咪唑、50 mmol/L NaCl，pH 7.0。 ( 18 ) 磷酸缓冲液：50 mmol/L 磷酸钠、150 mmol/L NaCl，pH 7.2。 ( 19 ) EDTA。 ( 20 ) 1 ml 苯氯仿 HR 5/5 柱子（Amersham

原位杂交组织化学与免疫细胞化学结合法

天。 　　（27）D196 显影液，20 ℃显影5～10min。 　　（28）自来水冲洗数秒。 　　（29）F5 坚膜定影液10min。 　　（30）自来水冲洗15min。 　　（31）切片温箱烤干，脱水，透明，封片。 　　结果：蛋白或多肽免疫反应阳性细胞为棕色胞质，而其相应mRNA为黑色银颗粒聚集。 　　二、非同位素原位杂交组化与免疫组化联合法 　　非同位素标记物很多例如：生物素（biotin），地高辛（Digoxigenin），汞

免疫细胞化学常用试剂

ECD和戊二醛加入混合液，振摇后计时，用pH计检测，约2~3min时，pH降至6.6，再以1N的NaOH在4min内调pH至7.0，此时，将该混合固定液加入盛有细胞（经PBS漂洗过）的器皿中，在23℃固定7min后，以PBS洗去固定液，即可进一步处理。ECD即乙基-二甲基氨基丙基碳亚胺盐酸盐[1-ethyl-3（3-dimethyl-aminoprpyl）-carboi-imide hydrochloride]，简称乙基-CDI，常用于多肽类激素的固定，对酶等蛋白质的固定也有良好效果。ECD单独应用