6-碘异喹.啉,6-Iodoisoquinoline,95%

常用细胞凋亡检测方法（图）

清的DMEM培养12小时，然后予各种干预。最后予4℃预冷的75%乙醇固定后，送流式细胞仪以PI（碘化丙啶）检测。（2）谷氨酸诱导：配置含80μM-10mM终浓度的谷氨酸（经典用10mM）的DMEM不完全培养液（不含血清），处理24小时（6-24小时，可偏长一点）后，再予各种干预，最后送流式细胞仪测定细胞凋亡（有人要求在无血清培养基中先培养8-24小时后，再加含10mM谷氨酸的不完全DMEM培养液培养6-24小时。）（3）缺氧诱导：首先设置低氧环境，将培养箱内充入95%氮气代替空气，同时充入5%二氧

各类细胞培养小结

抗原免疫荧光检查：在24孔塑料培养板孔内放置无菌的盖玻片0.5cm×0.6cm，每孔中种植1ml含有105个细胞的原代或传代内皮细胞悬液。待内皮细胞生长至近融合状态时，取出盖玻片，用PBS冲洗3次，投入冷丙酮中(-18～-20℃)，细胞面向上，作用7min，用PBS冲洗3次，每次1min，而后进行间接免疫荧光检查，第一抗体为鼠抗人VWF单克隆抗体(苏州医学院血栓室提供)，1∶20倍稀释，加入50μl于盖玻片上，放入湿盒内4℃过夜。同时不加一抗做阴性对照。用PBS冲洗3次后，加入异硫氢酸标记的二抗50μl(异硫氰酸标记

（共享）免疫细胞化学常用试剂介绍

Formalin过度固定的标本，常会产生过量的醛基，遮盖抗原，影响一抗与抗原的结合。用蛋白酶溶液消化，可起到暴露抗原部分的作用。消化时间应根据不同组织而异，总之，在保持组织形态不被破坏的前提下，宜尽量延长消化时间。以上三种酶消化液中，以第一种最为常用。 　　七、其它 　　1．蔗糖溶液　　免疫细胞化学中应用的蔗精，常用浓度为5%～30%。一般光镜研究，仅用20%蔗糖处理已足矣，若制备电镜标本，在冰冻前最好经上行蔗糖（5%、10%、15%、20%及20%蔗糖-5%甘油等）处理，以确保其良好的细微