6-氯-1-异吲哚啉酮,6-Chloroisoindolin

（交流）细胞因子的检测

成单层的L929细胞用0.25％胰酶消化2～3min。除去消化液后,用10% FCS的RPMI-1640将L929细胞配成1×105/ml,加入96孔细胞培养板中,每孔100μl。2、取100μl不同稀释度的IL-1标准品和待测品,分别加入各孔中,每孔设3个复孔,置37℃,5% CO2温箱孵育56h。3、用PBS溶解MTT为5mg/ml,用0.22μm膜滤器除菌及杂质。4、上述培养体系取出后,每孔加入10μl MTT(5mg/ml),37℃继续培养4h。5、从每孔吸出100μl上清弃去,加酸化异丙醇或加

在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的策略

的表达系统会造成质粒的不稳定，细胞生长速度的下降和重组蛋白产量的降低[32，33]。Lanzer和Bujard曾对常用的lac启动子-操纵子系统进行了广泛的研究，证明操纵子放在启动子序列的不同位置会造成70倍差异的抑制。将17bp的操纵子置于-10和-35六聚体区之间所形成的抑制比将其放在-35区的上游或-10区的下游要高50-70倍[34]。 启动子的第三个特性是其简便和廉价的可诱导性。大量生产蛋白质最常用的启动子是热诱导（λPL）和化学诱导(trp)启动子。异丙基硫代-β-D-半乳糖

【原创】质粒DNA生产工艺的研究

因为质粒本身而异，相同发酵条件下不同的质粒产量会有很大差异；但多数研究者认为，控制细菌较低的比生长速率，对质粒的复制有很大的好处，因为，宿主菌过快的直接后果是质粒复制跟不上细菌的生长，导致拷贝数下降或者质粒丢失。理想的质粒收获阶段应该是在细菌生长进入生长对数后期或静止期前期，此时RNA转录，蛋白质翻译的水平处于最低，质粒的复制达到最高水平。 1989年，Reinikainen [60]研究小组得出结论，pH值介于6.2-6.8之间和30℃的培养温度有利于ColE1类型复制子质粒产量的提高，此外，添加氯