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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
100
- 样本:
血清、血浆、组织液等液体样本
- 标记物:
hrp辣根过氧化物酶
- 适应物种:
人
- 应用:
科研
- 检测方法:
酶联免疫法
- 检测范围:
详询
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1200.0 |
96T
本试剂盒仅供研究使用。
使用目的:
本试剂盒定性测定人血清,血浆及相关液体样本中登革热 NS1 抗原的表达。
相关图片(一):

实验原理:
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法( ELISA)测定标本中人登革热 NS1 抗原。用纯
化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中登革热 NS1 抗原相结合,经洗涤除去未
结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经
过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转
化成最终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),与 CUTOFF 值相比较,
从而判定标本中人登革热 NS1 抗原的存在与否。
试剂盒组成:
| 1 | 30 倍浓缩洗涤液 | 20ml× 1 瓶 | 7 | 终止液 | 6ml× 1 瓶 |
| 2 | 酶标试剂 | 6ml× 1/瓶 | 8 | 阳性对照 | 0.5ml× 1 瓶 |
| 3 | 酶标包被板 | 12 孔× 8 条 | 9 | 阴性对照 | 0.5ml× 1 瓶 |
| 4 | 样品稀释液 | 6ml× 1 瓶 | 10 | 说明书 | 1 份 |
| 5 | 显色剂 A 液 | 6ml× 1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 张 |
| 6 | 显色剂 B 液 | 6ml× 1 瓶 | 12 | 密封袋 | 1 个 |
1.标本处理:血清、血浆标本可直接检测
2.标本按要求制备后尽早进行实验。如不能及时检测,可将标本在-20℃保存一个月,
但应避免反复冻融。
3.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
相关图片(二):

操作步骤:
1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1
孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照(标准品) 50µl。然后在待测
样品孔先加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部,
尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液加蒸馏水至 600ml 后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A 50µl,再加入显色剂 B 50µl,轻轻震荡混匀, 37℃避光显色
15 分钟
10. 终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零, 450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。

结果判定:
试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.15
临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定:样品 OD 值< 临界值(CUT OFF)者为登革热 NS1 抗原阴性
阳性判定:样品 OD 值≥ 临界值(CUT OFF)者为登革热 NS1 抗原阳性
相关图片(三):

注意事项
1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。
2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物请避光保存。
6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为 630nm
7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸,使用时必须
注意安全。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:; 2-8℃。
2.有效期: 6 个月
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文献和实验人登革热抗体(DF-Ab ) 酶联免疫分析(ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中登革热抗体(DF-Ab )的表达 。 实验原理: 本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法( ELISA )测定标本中 人 登革热抗体( DF-Ab ) 。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中登革热抗体( DF-Ab ) 相结合 ,经洗涤除去未结合的 抗原
的病毒抗原(C-100-3,为NS4编码的蛋白,含363个氨基酸),经纯化后包被微量塑料板孔,然后加被检血清,该病毒抗原即与被检血清中抗-C-100结合,最后加同位素或酶标记的鼠抗人lgG单克隆抗体,加底物显色判断结果。 用上述酶联免疫试验法(ELISA)检测抗-C-100有如下缺点:1. 抗-C-100出现较晚,约半数输血后丙型肝炎病人于输血后4~6个月抗―C-100首次阳转,因此,不宜作为急性丙型肝炎的常规实验室诊断;2.抗-C-100不是中和抗体,也不是lgM抗体,而是lgG
性有关。 三、微生物学诊断 放射免疫诊断(RIA)或酶联免疫试验(ELISA)检测血清中抗HCV 1989年,Kuo等建立了抗-C-100放射免疫试验方法(RIA),随后 Ortho公司又研制成功酶联免疫试验方法(ELISA)检测抗-C-100。这两种方法均用重组 酵母 表达的病毒抗原(C-100-3,为NS4编码的蛋白,含363个氨基酸),经纯化后包被微量塑料板孔,然后加被检血清,该病毒抗原即与被检血清中抗-C-100结合,最后加同位素或酶标











