猪瘟正向间接血凝抗体检测试剂盒（包括抗原，阴阳性血清）

 羽哚生物猪瘟正向间接血凝抗体检测试剂盒（包括抗原，阴阳性血清）

猪瘟病毒间接正向血凝抗体检测试剂盒

【产品名称】

通用名称：猪瘟病毒间接正向血凝抗体检测试剂盒

【包装规格】                        

检测80-100头份血清样品

【预期用途】

本品用于检测猪瘟疫苗免疫后抗体效价。

【检验原理】

猪瘟病毒抗原经浓缩纯化后,致敏醛化鞣酸化处理的绵羊红细胞制备猪瘟正向血凝抗原,用于检测猪瘟疫苗免疫动物血清中的猪瘟病毒抗体效价

【主要组成成分及性状】

1. 猪瘟病毒血凝抗原5ml/瓶，5瓶/盒；

2. 猪瘟病毒阳性对照血清0.5ml/瓶，1管/盒；

3. 猪瘟病毒阴性对照血清0.5ml/瓶，1管/盒；

4. 稀释液50ml/瓶，2瓶/盒；

5. 封板膜10张/盒;

6. 说明书1份.

抗原摇匀呈棕红色或咖啡色，静止后，血球逐渐沉于瓶底；阴阳性对照血清为微红或淡黄色略带粘性的液体；

稀释液为淡黄色或无色透明液体，低温放置时瓶底易析出少量结晶，在室温即可溶解，不影响使用。

【储存条件及有效期】

于 2～ 8℃下保存，有效期4个月。

试剂反复多次开瓶使用后，4个月内试剂性能不发生变化。   

生产日期、有效期至：见标签。

【 运 输 条 件 】                          

2～ 8℃运输。

【实验器具】

1.96孔110°V型血凝板；

2.8道移液器；

3.微量振荡器。

【检验方法】

1. 加稀释液：在血凝板上1-7排的第1-10孔、第8排的1-3孔和第5-7孔，加稀释液50ul/孔。

2. 稀释待检血清样本：待检血清使用前，经56℃水浴灭活30分钟，取灭活后待检血清样本50ul，分别加入反应板1-6排的第1孔中，与稀释液混匀后，吸取50ul，加于第2孔中，依次作2倍系列稀释至第10孔，第10孔混匀后取出50ul弃去。

3. 稀释阳性对照：在血凝板的第7排第1孔加阳性血清50ul，2倍系列稀释至第10孔，混匀后从该孔取出50ul丢弃，此时被检血清和阳性血清的稀释倍数依次为1：2至1：1024.

4. 稀释阴性对照：在血凝板的第8排第1孔加阴性血清50ul，对倍稀释至第3孔，混匀后从该孔取出50ul丢弃。此时阴性血清的稀释倍数依次为1：2、1：4、1：8 。第5-7孔为稀释液对照，每孔仅加50ul稀释液。

5. 加入血凝抗原：血清稀释孔和稀释对照孔加血凝抗原（充分摇匀，瓶底应无血球沉淀）25ul/孔。将反应板置于微量振荡器上震荡2-3分钟或用手依次四边轻拍，直到血球分布均匀。封板膜封板，室温下静置2-3个小时判定结果，也可于次日判定结果。

【结果判定】

    以呈现“++”血凝反应的血清最高稀释度作为该血清的间接血凝抗体效价。血凝反应强度表示如下：

 羽哚生物猪瘟正向间接血凝抗体检测试剂盒（包括抗原，阴阳性血清）

凝集现象	标记
红细胞全部凝集，形成一层均匀膜，布满整个孔底	++++
红细胞在孔底形成一层薄膜，面积比前者略小	+++
红细胞在孔底形成薄膜凝集，边缘松散或呈锯齿状	++
红细胞在孔底呈稀薄、散在、少量凝集、孔底有小圆点	+
红细胞沉于孔底，但周围不光滑或中心有空斑	±
红细胞完全沉于孔底，呈光滑的圆点	-

当阳性血清抗体效价≥1：128、阴性血清抗体效价≤1：8、稀释液对照孔无自凝现象时，试验成立。接种猪瘟疫苗的猪群免疫抗体效价≥1：16为免疫合格。

 羽哚生物猪瘟正向间接血凝抗体检测试剂盒（包括抗原，阴阳性血清）

【注意事项】                                                                                       

1.严格按说明书进行操作，准确加样并保证试验的温度条件，低温条件下反应的灵敏度会降低；按要求的时间及时观察，以免影响结果的判定。建议每次检测时进行阳性及阴性对照实验，只有在对照实验成立的前提下，检测结果才有意义。

2.试剂使用完后立即拧紧瓶盖，于 2～ 8℃下避光保存，严禁冻存。

3.血凝抗原使用前应用力摇匀，使粘附于瓶盖上的红细胞摇下，否则易出现沉渣，影响使用效果；产品应在有效期内使用。

4.严重溶血或严重污染的血清样本不宜检测，以免发生非特异性反应。

5.每批试验可以只做一份阴、阳性对照和稀释液对照。

6.用过的血凝板应及时在冲洗净血球。再用蒸馏水或去离子水冲洗两次，甩干水份放37℃恒温箱内干燥备用。检测用具应煮沸消毒，37℃干燥备用。血凝板应定期浸泡在5%盐酸液中，48小时捞出后清水洗净。