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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
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- 英文名:
1-Ethyl-1H-pyrazole-4-carbaldehyde
- 库存:
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- 供应商:
无锡云萃生物
- CAS号:
304903-10-4
- 规格:
5mg/50mg/100mg/500mg
| 规格: | 5mg | 产品价格: | ¥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 100mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 500mg | 产品价格: | ¥100.0 |
云萃
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文献和实验DNA的单个拷贝基因经PCR扩增后在外周血单核细胞内显示成功。就算此法对HIV-1感染患者外周血单核细胞检测的阳性率明显高于用单纯原位杂交技术的检出率,说明其敏感度大于单纯的原位杂交免疫细胞化学技术。其主要实验步骤为将离心沉淀的细胞滴入覆有聚四氟乙烯(teflon coated)的设有三个凹孔的特制玻片(CellLine Associ-ates,Newfield, NJ ,Cat No 10~ 12,12~14mm的孔)的凹孔内,加热105℃90s,然后以2%多聚甲醛-磷酸缓冲液,pH7.4,固定1h
)即可 3. 封胶:灌入2/3的分离胶后应立即封胶,胶浓度<10%时可用0.1%的SDS封,浓度>10%时用水饱和的异丁醇或异戊醇,也可以用0.1%的SDS。封胶后切记,勿动。待胶凝后将封胶液倒掉,如用醇封胶需用大量清水及ddH2O冲洗干净,然后加少量0.1%的SDS,目的是通过降低张力清除残留水滴。 4.灌好浓缩胶后1h拔除梳子,注意在拔除梳子时宜边加水边拔,以免有气泡进入梳孔使梳孔变形。拨出梳子后用ddH2O冲洗胶孔两遍以去除残胶,随后用0.1%的SDS封胶。若上样孔有变形,可用适当粗细的针
【资源】个人整理 Western Blot(步骤简略,但注意事项、经验总结、基本原理很全面)
)遮挡光线,显色20s后每10s观察一次,至条带明显或有本底出现时将膜揭起置去离子水中漂洗后放滤纸上晾干即可观察与扫描。七.增强敏感性若目的条带未出现,或很淡,可试用以下方法增强发光强度:1. 用清水漂洗膜数分钟,重加发光液进行曝光,可延长曝光时间。2. 将膜在PBST或TTBS中洗涤30min或更长,期间至少换2次液。3. 封闭40~60min4. 一抗杂交,室温1h。37℃ 1h 会更强,但可能增加非特异条带。5. PBST或TTBS洗膜20min,期间换2次液。6. 二抗杂交,37
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