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文献和实验V294.PART II,Chapter 4 细胞迁移实验之Dunn趋化迁移培养皿法及时序显微镜分析法
placemultiples of 5 × 105 cells in each vial. 7. To recover frozen cells rapidly thaw a cryovial, add 4 mL of warm growthmedium dropwise and centrifuge for 5 min at 1000g. 8. Seed the cells on 6-cm bacterial culture plates (Falcon; see Note 1) in 5 mL
血平板,37℃培养5d后取菌落作生化与血清学鉴定(自制兔抗Hp抗体),然后取单个菌落移种于另一血平板,继续培养3d,经鉴定后将其大量增殖培养,3d后将菌苔刮下,置生理盐水中制成菌液,加福尔马林固定(0.1%~0.3%),4℃过夜,3000r/nin离心30min,沉淀3次,将最后1次沉淀悬于少量PBS液内,用比浊管没出细菌浓度,制成含菌3×109ml,置冰箱冰冻,反复冻融3次,经显微镜检查无菌体存在后,制成可溶性抗原,采用Lowry氏法蛋白定量,-20℃保存备用。⑥临床血清标本:采自胃镜检查患者,随机采取
细胞的胰蛋白酶注入50ml锥形离心管中,加入小牛血清2ml终止酶反应。再以30ml PBS冲洗管腔,流出液一并入离心管,1000r/min离心10min,弃上清,加入含有10%小牛血清的DMEM [或IMDM(Dibco)?]培养液,充分混合制成细胞悬液。取0.1ml细胞悬液在血细胞计数板计数。最后调细胞数,以1×105/ml接种至24孔培养板中,每孔1ml。置于5%CO2,37℃静止培养24h更换培养液,以除去未贴壁的细胞。以后每隔2d换液1次,以维持细胞的营养和内环境的稳定。 胰蛋白酶溶液(100
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