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土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶Solid-N-acetyl

-β-D-glucosidase, S-NAG试剂盒
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  • mlE3482
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  • 2025年09月10日
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      土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶Solid-N-acetyl-β-D-glucosidase, S-NAG试剂盒

    • 保质期

      12个月

    • 供应商

      上海酶联生物科技有限公司

    • 保存条件

      避光 , 低温保存

    • 规格

      50管/24样

    土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶Solid-N-acetyl-β-D-glucosidase, S-NAG试剂盒
    分光光度法 
    注    意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

    测定意义:                           
    S-NAG是溶酶体中的一种酸性水解酶,由土壤微生物分泌。S-NAG活性变化与机体某些病理状态密切相关。

    测定原理:
    S-NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝ji苯酚,后者在400nm有大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算NAG活性。

    自备用品:
    可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

    土壤N乙酰βD葡萄糖苷酶试剂盒

    试剂组成和配制:
    试剂一:甲苯5mL×1瓶,4℃保存;(自备)
    试剂二:粉剂×2瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入6mL蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存;
    试剂三:液体25mL×1瓶,4℃保存; 
    试剂四:液体50mL×1瓶,4℃保存; 

    样品处理:
    新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

    测定步骤:
    试剂名称 测定管 对照管
    风干土样(g 0.05 0.05
    试剂一(μL 25 25
      室温振荡混匀15min 90℃振荡混匀15min
    试剂二(μL 400  
    蒸馏水(μL   400  
    试剂三(μL 500 500  
    混匀, 37振荡反应1h立即90℃水浴5min(盖紧,防止水分散失)流水冷却10000g 25℃离心10min,取上清液
    上清液μL 500 500
    试剂四μL 1000 1000
    充分混匀,室温静置2min后,400nm处蒸馏水调零,测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。

    土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶Solid-N-acetyl-β-D-glucosidase, S-NAG试剂盒
    S-NAG活力计算:

    标准条件下测定的回归方程为y = 0.00645x -0.0054;x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。
    单位的定义:每天每g土样中产生1 μmol对-硝ji苯酚定义为一个酶活力单位。
    S-NAG活力(μmol/d/g 土样)= (ΔA+0.0054) ÷0.00645×V反总÷W÷T =68.84×(ΔA+0.0054)
    T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积:9.25×10-4 L;W:样本质量,0.05g。

    土壤N乙酰βD葡萄糖苷酶试剂盒
     

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