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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
65
- 英文名:
土壤木质素过氧化物酶Soil lignin peroxidase,S-Lip试剂盒
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件:
避光 , 低温保存
- 规格:
50管/24样
分光光度法
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,属于木质素降解酶系,在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。
测定原理:
木质素过氧化物酶氧化藜芦醇生成藜芦醛,在310nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿、震荡仪、甲苯。
试剂组成和配制:
试剂一:液体25mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体25mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体20mL×1瓶,4℃保存。
样品处理:
新鲜土样风干,过30-50目筛。
测定操(在2mL EP管中依次加入下列试剂):
对照管 测定管
土样(g) 0.1 0.1
甲苯(μL) 50 50
25℃静置15min
试剂一(μL) 750
蒸馏水(μL) 750
试剂二(μL) 450 450
试剂三(μL) 300 300
30℃震荡反应3h,冰浴5min,12000g,4℃离心10min,取上清800μL,于1mL石英比色皿,测定310nm处吸光值,分别记为A对照和A测定,△A=A测定- A对照
土壤木质素过氧化物酶Soil lignin peroxidase,S-Lip试剂盒
酶活计算公式
酶活性定义:每克土壤每天氧化1nmol藜芦醇所需的酶量为一个酶活力单位。
S-LiP活性(nmol/d/g 土样)= ×V反总÷W÷T= 1290×△A÷W
ε:藜芦醛摩尔消光系数:9300L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,1.5mL; W:样本质量,g;T:反应时间,3h
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文献和实验在陆地生态系统中,在土壤中生活有数量庞大的微生物种群,包括原核微生物如细菌、蓝细菌、放线菌及超显微结构微生物, 以及真核生物如真菌、藻类( 蓝藻除外) 、地衣等。它们与植物和动物有着明确的分工,主要扮演“分解者”的角色,几乎参与土壤中一切生物和生物化学反应,担负着地球C、N、P、S 等物质循环的“调节器”[1 ]、土壤养分植物有效性的“转化器”和污染环境的“净化器”等多方面生态功能[2 ]。土壤微生物是气候和土壤环境条件变化的敏感指标,土壤微生物群落结构和多样性及其变化在一定程度上反映
着有较多杂质污染。就算DNA样品表面上看起来比较干净,里头一样可能含有低浓度的腐植酸和富哩酸,甚至多糖污染。使用一款像PowerSoil、PowerWater、PowerBiofilm这样采用抑制因子去除技术的试剂盒,可以确保最终提取的DNA是真正的干净。 在透过A260读数估计DNA得率同时,较低的260/230比值则表示DNA样品有机物污染。比值高于1.5就完美了,若低于1.0,那污染物将会明显抑制下游酶反应的进行。 4. 对还是错:如果我的土壤样品DNA得率不高,那我需要
物的量。用作标记物的酶有辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)和碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase)。酶标试剂制备容易、稳定、价廉。酶免疫分析的灵敏度接近放射免疫技术,而可借助于简单的仪器作定量测定,是目前农药监测中应用最广泛的免疫分析技术。 EIA法包括酶联免疫吸附分析法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA)、酶免疫试验法(Enzyme-monitored Immunotest











