- ￥667
- mlBio/酶联生物
- mlE3450
- 国内
- 2025年07月22日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
土壤纤维素酶Solid-cellulase，S-CL活性测定试剂盒
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件：
避光 , 低温保存
- 规格：
50管/24样
分光光度法
注 意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
S-CL主要来源于土壤微生物，S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。
测定原理：
采用蒽酮比色法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、甲苯、硫酸（不允许快递）和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一：甲苯10mL×1瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：液体6mL×1瓶，4℃保存；
试剂三：液体40mL×1瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存； 临用前加入5mL蒸馏水和45mL浓硫酸充分溶解待用。
样品处理：
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过30~50目筛。
加样表和测定步骤：
| 对照管 | 测定管 | |
| 风干土样（g） | 0.1 | 0.1 |
| 试剂一 (μL) | 100 | 100 |
| 振荡混匀15min | ||
| 试剂二（μL ） | 180 | |
| 试剂三（μL ） | 740 | 740 |
| 蒸馏水（μL ） | 360 | 180 |
8000g 25℃离心10min，取上清，得糖化液
| 糖化液 (μL) | 350 | 350 |
| 试剂四 (μL) | 650 | 650 |
土壤纤维素酶Solid-cellulase，S-CL活性测定试剂盒
S-CL活力计算：
标准条件下测定的回归方程为y = 5.018x - 0.0462；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。
单位的定义：每天每g土样中产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-CL活力（mg/d/g）＝(ΔA+0.0462) ÷5.018×V反总÷W÷T =19.1×(ΔA+0.0462)
T：反应时间，3h=1/8d； V反总：反应体系总体积：1.2mL；W：样本质量，0.1g。
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文献和实验是降解连结细胞的中胶层，使细胞从组织中分开，以及细胞与细胞分开。 常用的酶制剂有：纤维素酶有Cellulase Onozuka R-10，Cellulase Onozuka RS，Cellulase。果胶酶有Pectolyase Y23，Macerozyme，Pectinase等。半纤维素酶有Rhozyme Hp-150，大多数植物分离原生质体时，纤维素酶浓度在1%-3%，果胶酶在0.1%-1%，但也有很多例外。（3）渗透压：原生质体操作需要在一定渗透压存在下进行，常用的配制分离原生质体酶液的溶液
macrocephalus) 牙齿及骨骼中抽提DNA时采用了一种以二氧化硅为吸附介质的方法，从抹香鲸标本骨骼组织中钻取的少量粉末中获得了足够用于分析的DNA产物，此方法扩大了对稀有哺乳动物DNA研究的取材范围。 Caldarelli-stefano等[3〕在从福尔马林固定、石蜡包埋的人体组织标本中提取DNA时利用小磁珠作为结合核，也获得了理想的纯化 DNA。很多试剂公司也依此设计生产了许多颗粒提取试剂盒，Pint。等[4]就探讨了采用 Gibc。公司的GlassMAX系统，对福尔马林固定的组织进行DNA提取的具体
的DNA时，怎样更好的抑制内源核酸酶的活性？参考见解：在提取内源核酸酶含量丰富的材料的DNA时,可增加裂解液中螯合剂的含量,细胞裂解后的后续操作应尽量轻柔。用试剂盒对农田土壤的的微生物群落DNA进行提取，虽然总DNA提出来了，可是用细菌的通用引物进行PCR的时候却怎么也扩不出来，请有没有什么好的办法可以解决这个问题？参考见解：环境特别是土壤的样品成分复杂，尤其是有腐殖酸具有和DNA类似的性质，因此用一般的国内试剂盒无法提纯。应当选用自制的提取方法，在裂解液中加入要加入PVP。洗涤后硅胶膜上仍有杂色残留
