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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
零下80℃
- 保质期:
一年
- 库存:
1000
- 供应商:
智立中特(武汉)生物科技有限公司
- 规格:
甘油
[载体宿主] 酵母菌
[基因种属] 酵母
质粒名称:pLexA
出品公司:Addgene
目录编号:11342
存储实验室:Guy Caldwell
载体骨架基本信息
载体名称:pLexA
载体出品公司:see "author's map". Not the same as Clontech's pLexA.
载体抗性:氨苄青霉素
空载体大小:5700 bp
完整质粒大小:--
载体修饰:--
载体类型:酵母表达质粒
筛选标记:TRP1
高拷贝/低拷贝:高拷贝
生长条件:37 ℃
插入基因信息
插入基因名称:None
物种来源:--
插入大小:--
基因突变:--
GenBank编号--
启动子--
标签/融合蛋白:LexA-DNA结合域(主干上的N端)
克隆方法:限制性内切酶
5' 克隆位点:--
3' 克隆位点:--
5' 测序引物LexA sequencing primer (CGTCAGCAGAGCTTCACCATTG)
3' 测序引物--
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文献和实验去阳性克隆,保留阴性克隆。3. 酵母杂合试验(Yeast Mating)确定真阳性克隆 如下表所示,在酵母EGY48及其对应的YM4271宿主细胞中分别转入相应的质粒或文库DNA,通过杂合实验确筛选pLexA-靶DNA与pB42AD-文库确实具有相互作用的真阳性克隆。 质粒1 (in YM4271) 质粒2 (in EGY48) LacZ表型 Leu表型 pLexA pB42AD 白 不能生长 pLexA-靶DNA pB42AD 白 不能生长 pLexA pB42AD
酵母双杂交技术专题 LexA酵母双杂交系统简介 一、LexA酵母双杂交系统的设计原理 报告质粒p8op-LacZ的GAL4 UAS编码序列被完全去除,因此在缺乏LexA融合激活剂的情况下,报告基因LacZ的转录活性为零,该基因的筛选标志为URA3,可以作为有自主复制能力的质粒存在于酵母EGY48菌株中,也可以被整合到EGY48基因组 DNA上。 质粒 pLexA的筛选标志为HIS3,在双杂交系统中用于表达DNA-BD(202个氨基酸残基
(119) M13F(-47) M13R(-48) pUCm-T M13F/T7 M13R pVAX1 T7 BGH pWSK29 T7/M13F/M13F(-47) T3/M13R/M13R(-48) pXT7 T7 SP6 pYES2 T7 pYes2.R pLEXA pLEXA-F pLEXA-R pLNCX pLNCX-F pLNCX-R pRECEIVER CMV-F 此载体无反向引物 pSHUTTLE-CMV PSHUTTLE-CMV-F PSHUTTLE-CMV-R
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