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N
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无锡云萃生物
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66332-96-5
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| 规格： | 5mg | 产品价格： | ￥100.0 |
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云萃
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文献和实验这段做MTT走了不少弯路，后来看了园子里有许许多多的建议和指导，再做时结果好了很多，心里很是感激，于是把众多的帖子进行了总结，希望对后来者有所帮助！同时感谢各位前辈的良帖！！MTT大汇总实验前应明确的问题1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满
一、实验原理 细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。 其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法
培养，至细胞单层铺满孔底（96 孔平底板）, 加入浓度梯度的药物, 原则上，细胞贴壁后即可加药，或两小时，或半天时间，但我们常在前一天下午铺板，次日上午加药. 一般 5-7 个梯度, 每孔 100ul, 设 3-5 个复孔. 建议设 6 个，否则难以反应真实情况。下图可做为 96 孔板的的参考步局。对于加药，有人直接将药物按不同体积加入到 96 孔板中，以形成浓度梯度。但本人认为应尽量在 EP 管中将不同浓度的药物配好，然后将 96 孔板中的培养上清去掉（可以用排枪吸走）再加入 100ul 含不同
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