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YOBIBIO Trans R
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YOBIBIO
500
产品介绍:YobibioTrans R-100 RNA Transfection Reagent是一种独有的RNAi特异性阳离子脂质体转染试剂,本品推荐用于将siRNA、microRNA(miRNA)、mimic、inhibitor 等小片断RNA 转染入动物细胞(包括各种细胞系、原代细胞、悬浮细胞、昆虫细胞等)。本品可以常温运输,本品在多种细胞系的验证中均表现了很好的RNA 转染效率,并有很低的细胞毒性。特点:
规格包装: (备注:以下为常用规格,更多规格可根据客户需求定制) 储存事项:冰袋或者湿冰运输,短时间内可室温运输,但需避免光源热源,长时间储存于 4℃,切勿冻存,有效期 24 个月。重要提示:产品用于:仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。由于实验受多种因素影响具有不确定性,本说明书操作说明仅供参考,最终解释权归本公司所有。警告!产品对人体危害性未知,请遵循操作说明。穿戴适当的防护眼镜、衣服和手套!如果不小心接触,应立即用大量的水冲洗,如引起身体不适应前往医院治疗。注意事项•整个实验过程避免细胞污染由于不同细胞耐受性不同,由于不同细胞耐受性不同,我们建议您在做批量实验前,可根据实际质粒和细胞的转染效率,分不同梯度量先做预实验,摸索最佳 siRNA 和 YosiTrans R-100 的混合比例。优化后可根据自身细胞情况具体用量。•采用本品进行转染,RNA 用质量(ug)进行计量,对21nt 双链的siRNA 来说,1OD=3.0nmol=40ug。•siRNA 等较短RNA 请参照表1 中siRNA 用量,mRNA、shRNA 等较长RNA请参照表1 中mRNA 用量。•如转染后需要用Trizol 提取RNA,建议转染后6 小时换液。操作步骤 (不同的细胞已及转不同面积的孔板操作起来略有不同,以 24 孔板 siRNA 转染为例)1.提前一天细胞种植 贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24 孔板中,以转染时细胞汇合度在30%左右为宜,转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3 进行转染实验。2.转染过程⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA,加入无血清稀释液,充分混匀,制成RNA稀释液,终体积为25μl。注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM 或1640。⑵取1ul 的R100,然后加入24ul 无血清稀释液体,充分混匀,制成R100 稀释液,终体积为25μl。室温静置5 分钟。⑶将R100 稀释液和RNA 稀释液充分混合(可用振荡器振荡或用加样器吹吸10 次以上)混合,室温静置15 分钟。转染复合物制备完成。⑷将50μl 转染复合物滴加到有0.45ml 全培养基(可含10%血清和抗生素)的细胞上,混合均匀。⑸转染后6 小时观察细胞状态,如状态良好可不必更换培养基,继续培养24-96小时得到结果。 注意:1.siRNA 转染后,继续培养24-72 小时在mRNA 水平得到结果,继续培养24-96 小时在蛋白水平得到结果。mRNA 转染后,根据需要在24 小时后得到结果。2.由于血清和培养条件等差异,转染后镜下培养基中可能出现少量黑点状沉淀,为转染试剂和血清中蛋白结合产物,不影响转染结果和细胞状态,可通过换液除去。
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