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- 2025年07月15日
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武汉华尔纳生物科技有限公司
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本试剂仅供研究使用 标本：血清或血浆及相关液体
人乙肝核心抗原（HBcAg）elisa试剂盒试验原理：
人乙肝核心抗原（HBcAg）elisa试剂盒是采用夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）方法
人乙肝核心抗原（HBcAg）elisa试剂盒内容及其配制
| 试剂盒成份（2-8℃保存） | 96孔配置 | 48孔配置 |
| 96/48人份酶标板 | 1块板（96T） | 半块板（48T） |
| 塑料膜板盖 | 1块 | 半块 |
| 标准品：240ng/L | 1瓶（0.6ml） | 1瓶（0.3ml） |
| 空白对照 | 1瓶（1.0ml） | 1瓶（0.5ml） |
| 标准品稀释缓冲液 | 1瓶（6ml） | 1瓶（3.0ml） |
| 生物素标记的抗BA抗体 | 1瓶（6ml） | 1瓶（3.0ml） |
| 亲和链酶素-HRP | 1瓶（6ml） | 1瓶（3.0ml） |
| 洗涤缓冲液 | 1瓶（20ml） | 1瓶（20ml） |
| 底物A | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） |
| 底物B | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） |
| 终止液 | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） |
| 标本稀释液 | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） |
人乙肝核心抗原（HBcAg）elisa试剂盒自备材料
1． 蒸馏水。
2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3． 振荡器及磁力搅拌器等。
人乙肝核心抗原（HBcAg）elisa试剂盒安全性
1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
人乙肝核心抗原（HBcAg）elisa试剂盒操作注意事项
1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀释过后的标准品应丢弃，不可保存。
2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3． 不用的其它试剂，应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用，保质前使用。
4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液，使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7． 底物A易挥发，避免长时间打开盖子，底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒，实验完成后应立即读取OD值。
8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
人乙肝核心抗原（HBcAg）elisa试剂盒样品收集、处理及保存方法
1、 血 清－－－－-操作过程中避免任何细胞刺激，使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血 浆－－－－EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测，1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液－－1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆－－－将组织加入适量生理盐水捣碎，1000×g离心10分钟，取上清液。
5、 保 存－－－－如果样品不立即使用，应将其分成小部分-80 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血，如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤，不要在37℃或更高的温度加热解冻，应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人乙肝核心抗原（HBcAg）elisa试剂盒试剂的准备
1． 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存，稀释前将标准品振荡混匀，稀释比例按说明书要求进行。
2． 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。
人乙肝核心抗原（HBcAg）elisa试剂盒操作步骤
1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，每个标准品和空白孔建议做复孔，每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体，盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次，如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5． 每孔加入50ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次，如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。
人乙肝核心抗原（HBcAg）elisa试剂盒性能
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。
2.批内与批间应分别小于9%和11%
人乙肝核心抗原（HBcAg）elisa试剂盒保存条件及有效期：
1. 试剂盒保存：2-8℃
2. 有效期：6个月
3. 产品运输：专用冷藏包，优先顺丰快运，确保产品安全送达。
问： 人乙肝核心抗原（HBcAg）elisa试剂盒48T/96T分别可以检测多少个样本？
答：96T检测85个样本，剩余 的11个孔为高低浓度标准孔加1个空白对照孔。
48T检测37个样本，剩余 的11个孔为高低浓度标准孔加1个空白对照孔。
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文献和实验乙肝两对半又称乙肝五项 ，为国内常用的乙肝病毒(HBV)感染的检测血清标志物。乙肝病毒免疫学标记有表面抗原(HBsAg)、表面抗体(抗-HBs或HBsAb)、e抗原(HBeA g)和e抗体(抗-HBe或HBeAb)、核心抗原(HBcAg)和核心抗体(抗-HBc或HBcAb)”。可检测患者是否感染乙肝及感染的具体情况。随着现代临床免疫学的发展，酶联免疫吸附试验(ELISA) 因其操作简单、灵敏度高、特异性高等特点而广泛应用于乙肝五项的检测。但由于乙肝标志物检测生产试剂厂家较多
（prezone），抗原过量称为后带（postzone）。在用免疫学方法测定抗原时，应使反应系统中有足够的抗体量，否则测得的量会小于实际含量，甚至出现假阴性。 3. 特异性 抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系，所以抗原抗体反应具有高度的特异性。例如乙肝病毒中的表面抗原（ HBsAg）、e抗原（HBeAg）和核心抗原（HBcAg），随来源于同一病毒，但仅与其相应的抗体结合，而不与另外两种抗体反应。抗原抗体反应的这种
乙肝两对半是目前国内医院最常用的乙肝病毒 (HBV)感染检测血清标志物。乙型肝炎病毒免疫学标记一共3对，即表面抗原(HBsAg)和表面抗体(抗HBs或HBsAb)、e抗原(HBeAg)和e抗体(抗HBe或HBeAb)、核心抗原(HBcAg)和核心抗体(抗HBc或HBcAb)。 乙肝两对半又称乙肝五项，其检查意义在于：检查是否感染乙肝及感染的具体情况，区分大三阳、小三阳。 两对半检查是用来判断是否感染乙肝或粗略估计病毒复制水平的初步检查，两对半对于病情
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