小鼠脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒

 

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操作步骤：
实验开始前，请提前配置所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡，如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样：分别设空白孔、待测样品孔，空白孔加样品稀释液100μl，余孔加待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
2. 弃去液体，甩干，不用洗涤，每孔加辣根过氧化物酶标记抗小鼠IgG工作液，100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃，60分钟。
3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见孔内有明显蓝色，即可终止）。
5. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转），终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同，为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
6. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值），在加终止液后15分钟以内进行检测。

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样本要求：
1、样本不能含叠氮na（NaN3），因为叠氮na（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。
2、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验，若不能立即试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
3、小鼠脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。



实验禁忌：
1. 实验请根据试剂盒内纸质说明书为准。
2. 实验前请仔细确认试剂盒在有效期内。
3. 不同的人胸腺肽Thymosin试剂盒费用生产批号不能混用。
4. 加样时样品量误差，校对加样器。
5. 剩余elisa试剂盒建议在实验后1个月内使用完毕。

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