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885278-36-4；5，6-二氟-1H-吲唑-3-甲腈 , -；5,6-Difluoro-1H-indazole-3-carbonitrile
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云萃
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文献和实验了来自结肠直肠癌（CRC）患者和健康人血清外泌体中的 miRNA 表达有明显的差异。 作者先通过外泌体 miRNA 测序（4 个 CRC 患者和 2 个健康人）观察外泌体的 miRNA 差异表达，选取了 29 个下调 miRNAs 和 9 个上调 miRNAs 作为候选标志物。 再使用 RT-qPCR（165 个 CRC 患者和 153 个健康人）进一步验证，最后发现与健康人相比，早期 CRC 患者外泌体 miR-99b-5p 和 miR-150-5p 的表达水平显著降低，术后外泌体 miR-99b-5
的发生有关。 拿到这样的结果，已经是一个很好的开始了。 图片来源：文献截图 2、从 mRNA 到 miRNA 寻找靶向关系 从 mRNA 到 miRNA 也是这个研究引入外泌体的重要步骤。作者预测了可能与 FOXO1 靶向的 miRNA，根据软件预测结合文献研究，最终选择了 miR-135b。 发现 miR-135b 在胃癌组织中显著上调，表达与 FOXO1 的 mRNA 水平呈现负相关，说明他们之前可能存在靶向调控关系。 当然，作者在文章中没有一开始去验证这个关系，在后续通过双荧光素酶实验
祖细胞类器官培养基进行培养。 16B、每 2-3天 按照步骤 12B-15B 进行传代。 培养芽尖祖细胞类器官 17B、在芽尖祖细胞培养约 2 周后，会形成一个几乎均质的芽尖祖细胞群体。向各孔中加入 0.5ml 人芽尖祖细胞类器官培养基，确保完全覆盖 Matrigel 液滴。每 3-5 天换液一次。 18B、如果类器官出现腔中积攒了细胞碎片，或下沉到 Matrigel 的底部，则用移液管轻轻刮培养孔底部，以解离含有类器官的 Matrigel。 19B、用移液器将 Matrigel 液滴和周围
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