pH缓冲液标准DIN 19266值（pH 6.865）,N

蛋白分离的不连续缓冲系统的比较

： a)氯（-），由胶缓冲液提供，充当快速移动的先导离子。b)MES或MOPS（-），（取决于电泳缓冲液的选择）充当后随离子。MES: 2-(N-morpholino)ethane sulfonic acidMOPS: 3-(N-morpholino)propane sulfonic acidc)Bis-Tris碱（+）充当出现在胶中的共同离子，Tris（+）由电泳缓冲液提供。合并低pH值的胶缓冲液（pH6.4）和电泳缓冲液（pH7.3-7.7）导致了电泳时显著降低的工作pH值。图2 NuPAGE®

核酸电泳工作流程——5 大主要步骤

X 的原液)。上样缓冲液包括如下组分: 密度成分，如甘油或蔗糖，增加样品粘度，确保样品沉入孔中。 盐，如 Tris-HCl，为样品创造良好的离子强度和 pH 值环境。高盐浓度的上样缓冲液会产生更大片或扭曲的条带以及污点。 金属螯合剂，如 EDTA，可阻止样品中的核酸酶降解核酸。 染料 为监测样品的上样、电泳进展和 pH 值变化提供了颜色指示。部分上样缓冲液可能包含多个染料，以便有效跟踪样品中不同大小分子的迁移。 通常，上样染料都是带负电荷的小分子，因此迁移方向与核酸相同。其中有的显示pH值颜色，上样

缓冲液配制指南

过硫酸胺 0.1 g ，加超纯水1.0 mL 溶解后，4 ℃ 保存，保存时间为 1 周。（-20 ℃长期保存） 30% 丙烯酰胺 溶于总体积为 50 mL 的水中，定容至 100 mL。室温保存于棕色瓶。 10× PBS（2L） NaOH 调 pH 值至 7.4，定容至 2 L。保存于室温。 还原型 5×SDS 上样缓冲液 混匀后，分装于 1.5 mL 离心管中，4 ℃ 可保存数周，-20 ℃ 可长期保存。 电泳液缓冲液 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 室温保存，1 次溶液可重复