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文献和实验wangch84 各位高手，兄弟最近忙于质粒构建，意图将一段长约4000 bp的片段，通过BamH1和EcoR1两个酶切位点连接到pcDNA3.1+载体上。情况如下： 1. 通过LA Taq酶扩增，并纯化回收目的片段（引物中带有酶切位点，保护性碱基＝3，上游带有Kozak序列）；由于回收效率很高，所以在进行下一步双酶切时只加了12 μl的目的片段，H2O 20 μl，10 X K BUFFER 4 μl，两种酶各2 μl，37℃作用过夜（12-14 h
Bartlett 等人分析了 178 个酶（有结构报道）及他们的催化残基特征，并总结成文。催化残基定义:1. 直接参与催化，比如作为亲核试剂的残基.2. 对另外一个直接参与催化的残基或者水分子施加影响的残基（例如静电或者酸碱作用）。3. 稳定过渡态中间体的残基。4. 对底物或者辅因子施加影响，从而辅助催化。比如极化作用。平均每个酶有 3.5 个催化残基。残基的分布频率及所在的二级结构特征在所有催化残基中，有 65% 的残基是带电氨基酸（H, R, K, E, D），有 27% 的残基是极性氨基
简写为PTH。是由甲状旁腺分泌的激素。由 84个氨基酸构成的多肽。此激素宜接作用于骨组织，引起听谓的骨吸收，可使骨中钙向四中释放。因此，当此激素发挥作用时，血中钙浓度将上升。另外，它也能直接作用于肾脏，在加强磷、钠、钾排泄的同时可使 Ca 、 Mg 、 H 的排泄降低。调节甲状旁腺素分泌的是血钙浓度，此激素的分泌速率与血钙浓度成反比。
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