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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
1年
- 英文名:
Endonuclease NotI
- 库存:
999
- 供应商:
百生跃
- 规格:
1000U/2000U
| 规格: | 1000U | 产品价格: | ¥280 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 2000U | 产品价格: | ¥540 |
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文献和实验常见限制性内切酶识别序列(酶切位点)(BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI、XhoI等) 在分子克隆实验中,限制性内切酶是必不可少的工具酶。 无论是构建克隆载体还是表达载体,要根据载体选择合适的内切酶(当然,使用T载就不必考虑了)。先将引物设计好,然后添加酶切识别序列到引物5' 端。常用的内切酶比如BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI
了一种新技术COMPARE-MS,该法将MBD柱层析法与MS-RE联用,互补了各自单用的弊处,能够快速、敏感的检测DNA甲基化情况,可用于临床标本检测,作为早期诊断和肿瘤分级的依据[56]。其过程是:用非待测区的内切酶和甲基化敏感的限制性内切酶同时消化DNA片段,随后通过MBD柱捕获,保留了含有甲基化区的片段,最后通过实时PCR扩增定量分析(见图9)。 图9:联合甲基化敏感性限制性内切酶的MBD(COMPARE-MS)示意图。用甲基化以外的位点的内切酶(A酶)与甲基化敏感的内切酶(B酶)联用
基因组限制性酶切扫描法 (restriction landmark genome scanning , RLGS) 该方法是将基因组DNA放射性标记,首次电泳后原位消化,二维电泳成约2 000个离散片段。这些片段几乎包含了整个基因组序列,并且片段大小适合克隆和序列分析。RLGS能在凝胶中定量分析数千个CpG岛的结构和甲基化变化,而无需已知基因序列。 1)RLGS的基本步骤 (1)首先将基因组DNA用甲基化敏感的NotI消化(酶切点GCGGCCGC),因其89%
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