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云萃
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文献和实验了一半。刚开始的我不敢向导师提出任何要求，就这样按着老师给的方案(方案是两年前师姐用色氨酸和苏氨酸合成二肽的实验。)开始了，实验方案如下： (1)合成N-Boc-L-Tryptophan色氨酸的合成 在150ml单口瓶中加入2.04g的L-色氨酸，80ml的10%的三乙胺甲醇混合溶液，搅拌溶解。随后加入叔丁氧碳酸酐4.35g，控制温度在55℃以下反应30min。反应完后，有机相减压蒸馏，蒸出大部分的三乙胺甲醇混合溶液。剩余的溶液在冰水浴下用10ml的盐酸酸化至pH=2,再用
反应。几乎所有可用于偶联反应的活泼酯都可用于合成环肽，主要有对硝基酚酯、N-羟基琥珀酰亚胺酯、五氟苯酯和2，4，5-三氯苯酚酯。线性多肽的C端羧基与对硝基酚、N-羟基琥珀酰亚胺、五氟苯酚或2，4，5-三氯苯酚，在DCC或其他缩合剂存在下，于低温反应，很容易得到相应的活泼酯。这种N端通常带有BOC或Z保护的活泼酯在酸性条件下脱去保护基，形成活泼酯的氢卤酸盐，在弱碱性稀溶液中，如在吡啶，DMF或二氧六环一类介电常数较大的溶剂中，保持pH8～9，加热（60～100℃）或室温搅拌数小时至数日，最终可得到环肽
类似物：4-、5- 和 6- 氟色氨酸（ fW )，Sigma ( St. Louis，MO)。 ( 4 ) 质粒：用于蛋白质高表达。用于基因的聚合酶链反应（PCR ) 扩增或另外来源的编码 GFPuv 基因和质粒来源的 Kn 激酶基因。 ( 5 ) Vent 和 Tag DNA 聚合酶，限制性内切核酸酶，DNA 酶，T4 激酶和 T4 DNA 连接酶。 ( 6 ) 寡核苷酸引物和 dNTP. （Invitrogen)。 ( 7 ) 细菌蛋白抽提物试剂（B-PER ) 和 B-PER II
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