- ￥100 - 1000
- Xybio
- 上海
- P1823
- 2025年07月11日
9 年钻石会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#32995;pXT7
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pXT7-Cas9爪蟾编辑质粒
别称: Plasmid#32995;pXT7
质粒属性
质粒简介
pXT7-Cas9是一个爪蟾基因编辑Cas9表达质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 7354 bp ds-DNA circular SYN 17-JAN-2018
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..7354
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 417..435
/label=SP6 promoter
/note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
3'UTR complement(541..666)
/label=Xenopus globin 3'-UTR
/note="3'-UTR of the major beta-globin gene of Xenopus
laevis"
CDS complement(702..749)
/codon_start=1
/product="bipartite nuclear localization signal from
nucleoplasmin"
/label=nucleoplasmin NLS
/translation="KRPAATKKAGQAKKKK"
CDS complement(750..4853)
/codon_start=1
/product="Cas9 (Csn1) endonuclease from the Streptococcus
pyogenes Type II CRISPR/Cas system"
/label=Cas9
/note="generates RNA-guided double strand breaks in DNA"
/translation="MDKKYSIGLDIGTNSVGWAVITDEYKVPSKKFKVLGNTDRHSIKK
NLIGALLFDSGETAEATRLKRTARRRYTRRKNRICYLQEIFSNEMAKVDDSFFHRLEES
FLVEEDKKHERHPIFGNIVDEVAYHEKYPTIYHLRKKLVDSTDKADLRLIYLALAHMIK
FRGHFLIEGDLNPDNSDVDKLFIQLVQTYNQLFEENPINASGVDAKAILSARLSKSRRL
ENLIAQLPGEKKNGLFGNLIALSLGLTPNFKSNFDLAEDAKLQLSKDTYDDDLDNLLAQ
IGDQYADLFLAAKNL-SDAILL-SDILRVNTEITKAPLSASMIKRYDEHHQDLTLLKALVR
QQLPEKYKEIFFDQSKNGYAGYIDGGASQEEFYKFIKPILEKMDGTEELLVKLNREDLL
RKQRTFDNGSIPHQIHLGELHAILRRQEDFYPFLKDNREKIEKILTFRIPYYVGPLARG
NSRFAWMTRKSEETITPWNFEEVVDKGASAQSFIERMTNFDKNLPNEKVLPKHSLLYEY
FTVYNELTKVKYVTEGMRKPAFLSGEQKKAIVDLLFKTNRKVTVKQLKEDYFKKIECFD
SVEISGVEDRFNASLGTYHDLLKIIKDKDFLDNEENEDILEDIVLTLTLFEDREMIEER
LKTYAHLFDDKVMKQLKRRRYTGWGRLSRKLINGIRDKQSGKTILDFLKSDGFANRNFM
QLIHDDSLTFKEDIQKAQVSGQGDSLHEHIANLAGSPAIKKGILQTVKVVDELVKVMGR
HKPENIVIEMARENQTTQKGQKNSRERMKRIEEGIKELGSQILKEHPVENTQLQNEKLY
LYYLQNGRDMYVDQELDINRL-SDYDVDHIVPQSFLKDDSIDNKVLTRSDKNRGKSDNVP
SEEVVKKMKNYWRQLLNAKLITQRKFDNLTKAERGGLSELDKAGFIKRQLVETRQITKH
VAQILDSRMNTKYDENDKLIREVKVITLKSKLVSDFRKDFQFYKVREINNYHHAHDAYL
NAVVGTALIKKYPKLESEFVYGDYKVYDVRKMIAKSEQEIGKATAKYFFYSNIMNFFKT
EITLANGEIRKRPLIETNGETGEIVWDKGRDFATVRKVLSMPQVNIVKKTEVQTGGFSK
ESILPKRNSDKLIARKKDWDPKKYGGFDSPTVAYSVLVVAKVEKGKSKKLKSVKELLGI
TIMERSSFEKNPIDFLEAKGYKEVKKDLIIKLPKYSLFELENGRKRMLASAGELQKGNE
LALPSKYVNFLYLASHYEKLKGSPEDNEQKQLFVEQHKHYLDEIIEQISEFSKRVILAD
ANLDKVLSAYNKHRDKPIREQAENIIHLFTLTNLGAPAAFKYFDTTIDRKRYTSTKEVL
DATLIHQSITGLYETRIDLSQLGGD"
CDS complement(4878..4898)
/codon_start=1
/product="nuclear localization signal of SV40 (simian virus
40) large T antigen"
/label=SV40 NLS
/translation="PKKKRKV"
regulatory 4901..4910
/regulatory_class="other"
/note="vertebrate consensus sequence for strong initiation
of translation (Kozak, 1987)"
5'UTR complement(4923..4965)
/label=Xenopus globin 5'-UTR
/note="translational enhancer from the 5'-UTR of the major
beta-globin gene of Xenopus laevis"
promoter complement(4978..4996)
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
rep_origin complement(5417..6005)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(6176..7036)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(7037..7141)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 tagcgtatca gagtctcgtc cgtcggtcgt atgacggtga aacctctgac acatgcagct
61 cccggagacg gtcacagctt gtctgtaagc ggatgccggg agcagacaag cccgtcaggg
121 cgcgtcagcg ggtgttggcg ggtgtcgggg ctggcttaac tatgcggcat cagagcagat
181 tgtactgaga gtgcaccata tgcggtgtga aataccgcac agatgcgtaa ggagaaaata
241 ccgcatcagg cgccattcgc cattcaggct gcgcaactgt tgggaagggc gatcggtgcg
301 ggcctcttcg ctattacgcc agctggcgaa agggggatgt gctgcaaggc gattaagttg
361 ggtaacgcca gggttttccc agtcacgacg ttgtaaaacg acggccagtg aattggattt
421 aggtgacact atagaatacg aattaattcg agctcgcccg gggatcctct agagtcgacc
481 tgcagggggg gggggggggg gttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttagaat
541 gtgaagaaac tttcttttta ttaggagcag atacgaatgg ctacattttg ggggacaaca
601 ttttgtaaag tgtaagttgg tattatgtag cttagagact ccattcgggt gttcttgagg
661 ctggtttagt ggtaaccaga tcctagtcag tcactagatt atttcttttt cttagcttga
721 ccagctttct tagtagcagc aggacgcttg tctccaccga gctgagagag gtcgattctt
781 gtttcataga gccccgtaat tgactgatga atcagtgtgg cgtccaggac ctcctttgta
841 gaggtgtacc gctttctgtc tatggtggtg tcgaagtact tgaaggctgc aggcgcgccc
901 aagttggtca gagtaaacaa gtggataatg ttttctgcct gctccctgat gggcttatcc
961 ctgtgcttat tgtaagcaga aagcacctta tcgaggttag cgtcggcgag gatcactctt
1021 ttggagaatt cgcttatttg ctcgatgatc tcatcaaggt agtgtttgtg ttgttccacg
1081 aacagctgct tctgctcatt atcttcggga gaccctttga gcttttcata gtggctggcc
1141 agatacaaga aattaacgta tttagagggc agtgccagct cgttaccttt ctgcagctcg
1201 cccgcactag cgagcattcg tttccggccg ttttcaagct caaagagaga gtacttggga
1261 agcttaatga tgaggtcttt tttgacctct ttatatcctt tcgcctcgag aaagtcgatg
1321 gggttttttt cgaagcttga tcgctccatg attgtgatgc ccagcagttc cttgacgctt
1381 ttgagttttt tagacttccc tttctccact ttggccacaa ccagtacact gtaagcgact
1441 gtaggagaat cgaatccgcc gtatttcttg gggtcccaat cttttttgcg tgcgatcagc
1501 ttgtcgctgt tccttttcgg gaggatactt tccttggaga agcctccggt ctgtacttcg
1561 gtctttttaa cgatgttcac ctgcggcatg gacaggacct tccggactgt cgcgaaatcc
1621 ctacccttgt cccacacgat ttctcctgtt tctccgtttg tttcgataag tggtcgcttc
1681 cgaatctctc cattggccag tgtaatctcg gtcttgaaaa aattcataat attgctgtaa
1741 aagaagtact tagcggtggc cttgcctatt tcctgctcag actttgcgat cattttccta
1801 acatcgtaca ctttatagtc tccgtaaaca aattcagatt caagcttggg atattttttg
1861 ataagtgcag tgcctaccac tgcattcagg taggcatcat gcgcatggtg gtaattgttg
1921 atctctctca ccttataaaa ctgaaagtcc tttctgaaat ctgagaccag cttagacttc
1981 agagtaataa ctttcacctc tcgaatcagt ttgtcatttt catcgtactt ggtgttcatg
2041 cgtgaatcga gaatttgggc cacgtgcttg gtgatctggc gtgtctcaac aagctgcctt
2101 ttgatgaagc ctgctttatc caactcagac aggccacctc gttcagcctt agtcagatta
2161 tcgaacttcc gttgtgtgat cagtttggcg ttcagcagct gccgccaata atttttcatt
2221 ttcttgacaa cttcttctga ggggacgtta tcactcttcc ctctattttt atcggatctt
2281 gtcaacactt tattatcaat agaatcatct ttgagaaaag actggggcac gatatgatcc
2341 acgtcgtagt cggagagccg attgatgtcc agttcctgat ccacgtacat gtccctgccg
2401 ttctgcaggt agtacaggta gagcttctca ttctgaagct gggtgttttc aactgggtgt
2461 tccttaagga tttgggaccc cagttctttt ataccctctt caatcctctt catcctttcc
2521 ctactgttct tctgtccctt ctgggtagtt tggttctctc gggccatctc gataacgata
2581 ttctcgggct tatgccttcc cattactttg acgagttcat ccacgacctt aacggtctgc
2641 agtattccct ttttgatagc tgggctacct gcaagattag cgatgtgctc gtgaagactg
2701 tccccctggc cagaaacttg tgctttctgg atgtcctcct taaaggtgag agagtcatca
2761 tggatcaact gcatgaagtt ccggttggca aatccatcgg acttaagaaa atccaggatt
2821 gtctttccac tctgcttgtc tcggatccca ttgatcagtt ttcttgacag ccgcccccat
2881 cctgtatatc ggcgcctctt gagctgtttc atgactttgt cgtcgaagag atgagcgtaa
2941 gttttcaagc gttcttcaat catctcccta tcttcaaaca acgtaagggt gaggacaatg
3001 tcctcaagaa tgtcctcgtt ctcctcattg tccaggaagt ccttgtcttt aatgattttc
3061 aggagatcgt gatacgttcc cagggatgcg ttgaagcgat cctccactcc gctgatttca
3121 acagagtcga aacattcaat ctttttgaaa tagtcttctt tgagctgttt cacggtaact
3181 ttccggttcg tcttgaagag gaggtccacg atagctttct tctgctctcc agacaggaat
3241 gctggctttc tcatcccttc tgtgacgtat ttgaccttgg tgagctcgtt ataaactgtg
3301 aagtactcgt acagcagaga gtgtttagga agcacctttt cgttaggcag atttttatca
3361 aagttagtca tcctttcgat gaaggactgg gcagaggccc ccttatccac gacttcctcg
3421 aagttccagg gagtgatggt ctcttctgat ttgcgagtca tccacgcgaa tctggaattt
3481 ccccgggcga gggggcctac atagtagggt atccgaaatg tgaggatttt ctcaatcttt
3541 tccctgttat ctttcaaaaa ggggtagaaa tcctcttgcc gcctgagtat agcgtgcagt
3601 tcgcccaggt gaatctggtg ggggatgctt ccattgtcga aagtgcgctg tttgcgcaac
3661 agatcttctc tgttaagctt taccagcagc tcctcggtgc cgtccatttt ttccaagatg
3721 ggcttaataa atttgtaaaa ttcctcctgg cttgctccgc cgtcaatgta tccggcgtag
3781 ccatttttag actgatcgaa gaaaatttcc ttgtacttct caggcagttg ctgtctgaca
3841 agggccttca gcaaagtcaa gtcttggtgg tgctcatcat agcgcttgat catactagcg
3901 ctcagcggag ctttggtgat ctccgtgttc actcgcagaa tatcactcag cagaatggcg
3961 tctgacaggt tctttgccgc caaaaaaagg tctgcgtact ggtcgccgat ctgggccagc
4021 agattgtcga gatcatcatc gtaggtgtct ttgctcagtt gaagcttggc atcttcggcc
4081 aggtcgaagt tagatttaaa gttgggggtc agcccgagtg acagggcgat aagattacca
4141 aacaggccgt tcttcttctc cccagggagc tgtgcgatga ggttttcgag ccgccgggat
4201 ttggacagcc tagcgctcag gattgctttg gcgtcaactc cggatgcgtt gatcgggttc
4261 tcttcgaaaa gctgattgta agtctgaacc agttggataa agagtttgtc gacatcgctg
4321 ttgtctgggt tcaggtcccc ctcgatgagg aagtgtcccc gaaatttgat catatgcgcc
4381 agcgcgagat agatcaaccg caagtcagcc ttatcagtac tgtctacaag cttcttcctc
4441 agatgatata tggttgggta cttttcatgg tacgccacct cgtccacgat attgccaaag
4501 attgggtggc gctcgtgctt tttatcctcc tccaccaaaa aggactcctc cagcctatgg
4561 aagaaagagt catccacctt agccatctca ttactaaaga tctcctgcag gtagcagatc
4621 cgattctttc tgcgggtata tctgcgccgt gctgttcttt tgagccgcgt ggcttcggcc
4681 gtctccccgg agtcgaacag gagggcgcca atgaggttct tctttatgct gtggcgatcg
4741 gtattgccca gaactttgaa ttttttgctc ggcaccttgt actcgtccgt aatgacggcc
4801 cagccgacgc tgtttgtgcc gatatcgagc ccaatggagt acttcttgtc catggctgct
4861 gggacaccgt ggataccgac cttccgcttc ttctttgggg ccatggtggc ggtaccgatc
4921 tgccaaagtt gagcgtttat tctgagcttc tgcaaaaaga acaagcaagc ttgtctccct
4981 atagtgagtc gtattagagc ttggcgtaat catggtcata gctgtttcct gtgtgaaatt
5041 gttatccgct cacaattcca cacaacatac gagccggaag cataaagtgt aaagcctggg
5101 gtgcctaatg agtgagctaa ctcacattaa ttgcgttgcg ctcactgccc gctttccagt
5161 cgggaaacct gtcgtgccag ctgcattaat gaatcggcca acgcgcgggg agaggcggtt
5221 tgcgtattgg gcgctcttcc gcttcctcgc tcactgactc gctgcgctcg gtcgttcggc
5281 tgcggcgagc ggtatcagct cactcaaagg cggtaatacg gttatccaca gaatcagggg
5341 ataacgcagg aaagaacatg tgagcaaaag gccagcaaaa ggccaggaac cgtaaaaagg
5401 ccgcgttgct ggcgtttttc cataggctcc gcccccctga cgagcatcac aaaaatcgac
5461 gctcaagtca gaggtggcga aacccgacag gactataaag ataccaggcg tttccccctg
5521 gaagctccct cgtgcgctct cctgttccga ccctgccgct taccggatac ctgtccgcct
5581 ttctcccttc gggaagcgtg gcgctttctc atagctcacg ctgtaggtat ctcagttcgg
5641 tgtaggtcgt tcgctccaag ctgggctgtg tgcacgaacc ccccgttcag cccgaccgct
5701 gcgccttatc cggtaactat cgtcttgagt ccaacccggt aagacacgac ttatcgccac
5761 tggcagcagc cactggtaac aggattagca gagcgaggta tgtaggcggt gctacagagt
5821 tcttgaagtg gtggcctaac tacggctaca ctagaagaac agtatttggt atctgcgctc
5881 tgctgaagcc agttaccttc ggaaaaagag ttggtagctc ttgatccggc aaacaaacca
5941 ccgctggtag cggtggtttt tttgtttgca agcagcagat tacgcgcaga aaaaaaggat
6001 ctcaagaaga tcctttgatc ttttctacgg ggtctgacgc tcagtggaac gaaaactcac
6061 gttaagggat tttggtcatg agattatcaa aaaggatctt cacctagatc cttttaaatt
6121 aaaaatgaag ttttaaatca atctaaagta tatatgagta aacttggtct gacagttacc
6181 aatgcttaat cagtgaggca cctatctcag cgatctgtct atttcgttca tccatagttg
6241 cctgactccc cgtcgtgtag ataactacga tacgggaggg cttaccatct ggccccagtg
6301 ctgcaatgat accgcgagac ccacgctcac cggctccaga tttatcagca ataaaccagc
6361 cagccggaag ggccgagcgc agaagtggtc ctgcaacttt atccgcctcc atccagtcta
6421 ttaattgttg ccgggaagct agagtaagta gttcgccagt taatagtttg cgcaacgttg
6481 ttgccattgc tacaggcatc gtggtgtcac gctcgtcgtt tggtatggct tcattcagct
6541 ccggttccca acgatcaagg cgagttacat gatcccccat gttgtgcaaa aaagcggtta
6601 gctccttcgg tcctccgatc gttgtcagaa gtaagttggc cgcagtgtta tcactcatgg
6661 ttatggcagc actgcataat tctcttactg tcatgccatc cgtaagatgc ttttctgtga
6721 ctggtgagta ctcaaccaag tcattctgag aatagtgtat gcggcgaccg agttgctctt
6781 gcccggcgtc aatacgggat aataccgcgc cacatagcag aactttaaaa gtgctcatca
6841 ttggaaaacg ttcttcgggg cgaaaactct caaggatctt accgctgttg agatccagtt
6901 cgatgtaacc cactcgtgca cccaactgat cttcagcatc ttttactttc accagcgttt
6961 ctgggtgagc aaaaacagga aggcaaaatg ccgcaaaaaa gggaataagg gcgacacgga
7021 aatgttgaat actcatactc ttcctttttc aatattattg aagcatttat cagggttatt
7081 gtctcatgag cggatacata tttgaatgta tttagaaaaa taaacaaata ggggttccgc
7141 gcacatttcc ccgaaaagtg ccacctgacg tctaagaaac cattattatc atgacattaa
7201 cctataaaaa taggcgtatc acgaggccct ttcgtctcgc gcgtttcggt gatgacggtg
7261 aaaacctctg acacatgcag ctcccggaga cggtcacagc ttgtctgtaa gcggatgccg
7321 ggagcagaca agcccgtcag ggcgcgtcag cggt
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pXT7-Cas9爪蟾编辑质粒
别称: Plasmid#32995;pXT7
| 启动子: | T7 |
|---|---|
| 复制子: | pBR322 |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | Stbl3 |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 广宿主 |
|---|---|
| 载体用途： | |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | |
| 原核抗性： | Amp |
| 筛选标记： | |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
pXT7-Cas9是一个爪蟾基因编辑Cas9表达质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 7354 bp ds-DNA circular SYN 17-JAN-2018
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..7354
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 417..435
/label=SP6 promoter
/note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
3'UTR complement(541..666)
/label=Xenopus globin 3'-UTR
/note="3'-UTR of the major beta-globin gene of Xenopus
laevis"
CDS complement(702..749)
/codon_start=1
/product="bipartite nuclear localization signal from
nucleoplasmin"
/label=nucleoplasmin NLS
/translation="KRPAATKKAGQAKKKK"
CDS complement(750..4853)
/codon_start=1
/product="Cas9 (Csn1) endonuclease from the Streptococcus
pyogenes Type II CRISPR/Cas system"
/label=Cas9
/note="generates RNA-guided double strand breaks in DNA"
/translation="MDKKYSIGLDIGTNSVGWAVITDEYKVPSKKFKVLGNTDRHSIKK
NLIGALLFDSGETAEATRLKRTARRRYTRRKNRICYLQEIFSNEMAKVDDSFFHRLEES
FLVEEDKKHERHPIFGNIVDEVAYHEKYPTIYHLRKKLVDSTDKADLRLIYLALAHMIK
FRGHFLIEGDLNPDNSDVDKLFIQLVQTYNQLFEENPINASGVDAKAILSARLSKSRRL
ENLIAQLPGEKKNGLFGNLIALSLGLTPNFKSNFDLAEDAKLQLSKDTYDDDLDNLLAQ
IGDQYADLFLAAKNL-SDAILL-SDILRVNTEITKAPLSASMIKRYDEHHQDLTLLKALVR
QQLPEKYKEIFFDQSKNGYAGYIDGGASQEEFYKFIKPILEKMDGTEELLVKLNREDLL
RKQRTFDNGSIPHQIHLGELHAILRRQEDFYPFLKDNREKIEKILTFRIPYYVGPLARG
NSRFAWMTRKSEETITPWNFEEVVDKGASAQSFIERMTNFDKNLPNEKVLPKHSLLYEY
FTVYNELTKVKYVTEGMRKPAFLSGEQKKAIVDLLFKTNRKVTVKQLKEDYFKKIECFD
SVEISGVEDRFNASLGTYHDLLKIIKDKDFLDNEENEDILEDIVLTLTLFEDREMIEER
LKTYAHLFDDKVMKQLKRRRYTGWGRLSRKLINGIRDKQSGKTILDFLKSDGFANRNFM
QLIHDDSLTFKEDIQKAQVSGQGDSLHEHIANLAGSPAIKKGILQTVKVVDELVKVMGR
HKPENIVIEMARENQTTQKGQKNSRERMKRIEEGIKELGSQILKEHPVENTQLQNEKLY
LYYLQNGRDMYVDQELDINRL-SDYDVDHIVPQSFLKDDSIDNKVLTRSDKNRGKSDNVP
SEEVVKKMKNYWRQLLNAKLITQRKFDNLTKAERGGLSELDKAGFIKRQLVETRQITKH
VAQILDSRMNTKYDENDKLIREVKVITLKSKLVSDFRKDFQFYKVREINNYHHAHDAYL
NAVVGTALIKKYPKLESEFVYGDYKVYDVRKMIAKSEQEIGKATAKYFFYSNIMNFFKT
EITLANGEIRKRPLIETNGETGEIVWDKGRDFATVRKVLSMPQVNIVKKTEVQTGGFSK
ESILPKRNSDKLIARKKDWDPKKYGGFDSPTVAYSVLVVAKVEKGKSKKLKSVKELLGI
TIMERSSFEKNPIDFLEAKGYKEVKKDLIIKLPKYSLFELENGRKRMLASAGELQKGNE
LALPSKYVNFLYLASHYEKLKGSPEDNEQKQLFVEQHKHYLDEIIEQISEFSKRVILAD
ANLDKVLSAYNKHRDKPIREQAENIIHLFTLTNLGAPAAFKYFDTTIDRKRYTSTKEVL
DATLIHQSITGLYETRIDLSQLGGD"
CDS complement(4878..4898)
/codon_start=1
/product="nuclear localization signal of SV40 (simian virus
40) large T antigen"
/label=SV40 NLS
/translation="PKKKRKV"
regulatory 4901..4910
/regulatory_class="other"
/note="vertebrate consensus sequence for strong initiation
of translation (Kozak, 1987)"
5'UTR complement(4923..4965)
/label=Xenopus globin 5'-UTR
/note="translational enhancer from the 5'-UTR of the major
beta-globin gene of Xenopus laevis"
promoter complement(4978..4996)
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
rep_origin complement(5417..6005)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(6176..7036)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(7037..7141)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 tagcgtatca gagtctcgtc cgtcggtcgt atgacggtga aacctctgac acatgcagct
61 cccggagacg gtcacagctt gtctgtaagc ggatgccggg agcagacaag cccgtcaggg
121 cgcgtcagcg ggtgttggcg ggtgtcgggg ctggcttaac tatgcggcat cagagcagat
181 tgtactgaga gtgcaccata tgcggtgtga aataccgcac agatgcgtaa ggagaaaata
241 ccgcatcagg cgccattcgc cattcaggct gcgcaactgt tgggaagggc gatcggtgcg
301 ggcctcttcg ctattacgcc agctggcgaa agggggatgt gctgcaaggc gattaagttg
361 ggtaacgcca gggttttccc agtcacgacg ttgtaaaacg acggccagtg aattggattt
421 aggtgacact atagaatacg aattaattcg agctcgcccg gggatcctct agagtcgacc
481 tgcagggggg gggggggggg gttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttagaat
541 gtgaagaaac tttcttttta ttaggagcag atacgaatgg ctacattttg ggggacaaca
601 ttttgtaaag tgtaagttgg tattatgtag cttagagact ccattcgggt gttcttgagg
661 ctggtttagt ggtaaccaga tcctagtcag tcactagatt atttcttttt cttagcttga
721 ccagctttct tagtagcagc aggacgcttg tctccaccga gctgagagag gtcgattctt
781 gtttcataga gccccgtaat tgactgatga atcagtgtgg cgtccaggac ctcctttgta
841 gaggtgtacc gctttctgtc tatggtggtg tcgaagtact tgaaggctgc aggcgcgccc
901 aagttggtca gagtaaacaa gtggataatg ttttctgcct gctccctgat gggcttatcc
961 ctgtgcttat tgtaagcaga aagcacctta tcgaggttag cgtcggcgag gatcactctt
1021 ttggagaatt cgcttatttg ctcgatgatc tcatcaaggt agtgtttgtg ttgttccacg
1081 aacagctgct tctgctcatt atcttcggga gaccctttga gcttttcata gtggctggcc
1141 agatacaaga aattaacgta tttagagggc agtgccagct cgttaccttt ctgcagctcg
1201 cccgcactag cgagcattcg tttccggccg ttttcaagct caaagagaga gtacttggga
1261 agcttaatga tgaggtcttt tttgacctct ttatatcctt tcgcctcgag aaagtcgatg
1321 gggttttttt cgaagcttga tcgctccatg attgtgatgc ccagcagttc cttgacgctt
1381 ttgagttttt tagacttccc tttctccact ttggccacaa ccagtacact gtaagcgact
1441 gtaggagaat cgaatccgcc gtatttcttg gggtcccaat cttttttgcg tgcgatcagc
1501 ttgtcgctgt tccttttcgg gaggatactt tccttggaga agcctccggt ctgtacttcg
1561 gtctttttaa cgatgttcac ctgcggcatg gacaggacct tccggactgt cgcgaaatcc
1621 ctacccttgt cccacacgat ttctcctgtt tctccgtttg tttcgataag tggtcgcttc
1681 cgaatctctc cattggccag tgtaatctcg gtcttgaaaa aattcataat attgctgtaa
1741 aagaagtact tagcggtggc cttgcctatt tcctgctcag actttgcgat cattttccta
1801 acatcgtaca ctttatagtc tccgtaaaca aattcagatt caagcttggg atattttttg
1861 ataagtgcag tgcctaccac tgcattcagg taggcatcat gcgcatggtg gtaattgttg
1921 atctctctca ccttataaaa ctgaaagtcc tttctgaaat ctgagaccag cttagacttc
1981 agagtaataa ctttcacctc tcgaatcagt ttgtcatttt catcgtactt ggtgttcatg
2041 cgtgaatcga gaatttgggc cacgtgcttg gtgatctggc gtgtctcaac aagctgcctt
2101 ttgatgaagc ctgctttatc caactcagac aggccacctc gttcagcctt agtcagatta
2161 tcgaacttcc gttgtgtgat cagtttggcg ttcagcagct gccgccaata atttttcatt
2221 ttcttgacaa cttcttctga ggggacgtta tcactcttcc ctctattttt atcggatctt
2281 gtcaacactt tattatcaat agaatcatct ttgagaaaag actggggcac gatatgatcc
2341 acgtcgtagt cggagagccg attgatgtcc agttcctgat ccacgtacat gtccctgccg
2401 ttctgcaggt agtacaggta gagcttctca ttctgaagct gggtgttttc aactgggtgt
2461 tccttaagga tttgggaccc cagttctttt ataccctctt caatcctctt catcctttcc
2521 ctactgttct tctgtccctt ctgggtagtt tggttctctc gggccatctc gataacgata
2581 ttctcgggct tatgccttcc cattactttg acgagttcat ccacgacctt aacggtctgc
2641 agtattccct ttttgatagc tgggctacct gcaagattag cgatgtgctc gtgaagactg
2701 tccccctggc cagaaacttg tgctttctgg atgtcctcct taaaggtgag agagtcatca
2761 tggatcaact gcatgaagtt ccggttggca aatccatcgg acttaagaaa atccaggatt
2821 gtctttccac tctgcttgtc tcggatccca ttgatcagtt ttcttgacag ccgcccccat
2881 cctgtatatc ggcgcctctt gagctgtttc atgactttgt cgtcgaagag atgagcgtaa
2941 gttttcaagc gttcttcaat catctcccta tcttcaaaca acgtaagggt gaggacaatg
3001 tcctcaagaa tgtcctcgtt ctcctcattg tccaggaagt ccttgtcttt aatgattttc
3061 aggagatcgt gatacgttcc cagggatgcg ttgaagcgat cctccactcc gctgatttca
3121 acagagtcga aacattcaat ctttttgaaa tagtcttctt tgagctgttt cacggtaact
3181 ttccggttcg tcttgaagag gaggtccacg atagctttct tctgctctcc agacaggaat
3241 gctggctttc tcatcccttc tgtgacgtat ttgaccttgg tgagctcgtt ataaactgtg
3301 aagtactcgt acagcagaga gtgtttagga agcacctttt cgttaggcag atttttatca
3361 aagttagtca tcctttcgat gaaggactgg gcagaggccc ccttatccac gacttcctcg
3421 aagttccagg gagtgatggt ctcttctgat ttgcgagtca tccacgcgaa tctggaattt
3481 ccccgggcga gggggcctac atagtagggt atccgaaatg tgaggatttt ctcaatcttt
3541 tccctgttat ctttcaaaaa ggggtagaaa tcctcttgcc gcctgagtat agcgtgcagt
3601 tcgcccaggt gaatctggtg ggggatgctt ccattgtcga aagtgcgctg tttgcgcaac
3661 agatcttctc tgttaagctt taccagcagc tcctcggtgc cgtccatttt ttccaagatg
3721 ggcttaataa atttgtaaaa ttcctcctgg cttgctccgc cgtcaatgta tccggcgtag
3781 ccatttttag actgatcgaa gaaaatttcc ttgtacttct caggcagttg ctgtctgaca
3841 agggccttca gcaaagtcaa gtcttggtgg tgctcatcat agcgcttgat catactagcg
3901 ctcagcggag ctttggtgat ctccgtgttc actcgcagaa tatcactcag cagaatggcg
3961 tctgacaggt tctttgccgc caaaaaaagg tctgcgtact ggtcgccgat ctgggccagc
4021 agattgtcga gatcatcatc gtaggtgtct ttgctcagtt gaagcttggc atcttcggcc
4081 aggtcgaagt tagatttaaa gttgggggtc agcccgagtg acagggcgat aagattacca
4141 aacaggccgt tcttcttctc cccagggagc tgtgcgatga ggttttcgag ccgccgggat
4201 ttggacagcc tagcgctcag gattgctttg gcgtcaactc cggatgcgtt gatcgggttc
4261 tcttcgaaaa gctgattgta agtctgaacc agttggataa agagtttgtc gacatcgctg
4321 ttgtctgggt tcaggtcccc ctcgatgagg aagtgtcccc gaaatttgat catatgcgcc
4381 agcgcgagat agatcaaccg caagtcagcc ttatcagtac tgtctacaag cttcttcctc
4441 agatgatata tggttgggta cttttcatgg tacgccacct cgtccacgat attgccaaag
4501 attgggtggc gctcgtgctt tttatcctcc tccaccaaaa aggactcctc cagcctatgg
4561 aagaaagagt catccacctt agccatctca ttactaaaga tctcctgcag gtagcagatc
4621 cgattctttc tgcgggtata tctgcgccgt gctgttcttt tgagccgcgt ggcttcggcc
4681 gtctccccgg agtcgaacag gagggcgcca atgaggttct tctttatgct gtggcgatcg
4741 gtattgccca gaactttgaa ttttttgctc ggcaccttgt actcgtccgt aatgacggcc
4801 cagccgacgc tgtttgtgcc gatatcgagc ccaatggagt acttcttgtc catggctgct
4861 gggacaccgt ggataccgac cttccgcttc ttctttgggg ccatggtggc ggtaccgatc
4921 tgccaaagtt gagcgtttat tctgagcttc tgcaaaaaga acaagcaagc ttgtctccct
4981 atagtgagtc gtattagagc ttggcgtaat catggtcata gctgtttcct gtgtgaaatt
5041 gttatccgct cacaattcca cacaacatac gagccggaag cataaagtgt aaagcctggg
5101 gtgcctaatg agtgagctaa ctcacattaa ttgcgttgcg ctcactgccc gctttccagt
5161 cgggaaacct gtcgtgccag ctgcattaat gaatcggcca acgcgcgggg agaggcggtt
5221 tgcgtattgg gcgctcttcc gcttcctcgc tcactgactc gctgcgctcg gtcgttcggc
5281 tgcggcgagc ggtatcagct cactcaaagg cggtaatacg gttatccaca gaatcagggg
5341 ataacgcagg aaagaacatg tgagcaaaag gccagcaaaa ggccaggaac cgtaaaaagg
5401 ccgcgttgct ggcgtttttc cataggctcc gcccccctga cgagcatcac aaaaatcgac
5461 gctcaagtca gaggtggcga aacccgacag gactataaag ataccaggcg tttccccctg
5521 gaagctccct cgtgcgctct cctgttccga ccctgccgct taccggatac ctgtccgcct
5581 ttctcccttc gggaagcgtg gcgctttctc atagctcacg ctgtaggtat ctcagttcgg
5641 tgtaggtcgt tcgctccaag ctgggctgtg tgcacgaacc ccccgttcag cccgaccgct
5701 gcgccttatc cggtaactat cgtcttgagt ccaacccggt aagacacgac ttatcgccac
5761 tggcagcagc cactggtaac aggattagca gagcgaggta tgtaggcggt gctacagagt
5821 tcttgaagtg gtggcctaac tacggctaca ctagaagaac agtatttggt atctgcgctc
5881 tgctgaagcc agttaccttc ggaaaaagag ttggtagctc ttgatccggc aaacaaacca
5941 ccgctggtag cggtggtttt tttgtttgca agcagcagat tacgcgcaga aaaaaaggat
6001 ctcaagaaga tcctttgatc ttttctacgg ggtctgacgc tcagtggaac gaaaactcac
6061 gttaagggat tttggtcatg agattatcaa aaaggatctt cacctagatc cttttaaatt
6121 aaaaatgaag ttttaaatca atctaaagta tatatgagta aacttggtct gacagttacc
6181 aatgcttaat cagtgaggca cctatctcag cgatctgtct atttcgttca tccatagttg
6241 cctgactccc cgtcgtgtag ataactacga tacgggaggg cttaccatct ggccccagtg
6301 ctgcaatgat accgcgagac ccacgctcac cggctccaga tttatcagca ataaaccagc
6361 cagccggaag ggccgagcgc agaagtggtc ctgcaacttt atccgcctcc atccagtcta
6421 ttaattgttg ccgggaagct agagtaagta gttcgccagt taatagtttg cgcaacgttg
6481 ttgccattgc tacaggcatc gtggtgtcac gctcgtcgtt tggtatggct tcattcagct
6541 ccggttccca acgatcaagg cgagttacat gatcccccat gttgtgcaaa aaagcggtta
6601 gctccttcgg tcctccgatc gttgtcagaa gtaagttggc cgcagtgtta tcactcatgg
6661 ttatggcagc actgcataat tctcttactg tcatgccatc cgtaagatgc ttttctgtga
6721 ctggtgagta ctcaaccaag tcattctgag aatagtgtat gcggcgaccg agttgctctt
6781 gcccggcgtc aatacgggat aataccgcgc cacatagcag aactttaaaa gtgctcatca
6841 ttggaaaacg ttcttcgggg cgaaaactct caaggatctt accgctgttg agatccagtt
6901 cgatgtaacc cactcgtgca cccaactgat cttcagcatc ttttactttc accagcgttt
6961 ctgggtgagc aaaaacagga aggcaaaatg ccgcaaaaaa gggaataagg gcgacacgga
7021 aatgttgaat actcatactc ttcctttttc aatattattg aagcatttat cagggttatt
7081 gtctcatgag cggatacata tttgaatgta tttagaaaaa taaacaaata ggggttccgc
7141 gcacatttcc ccgaaaagtg ccacctgacg tctaagaaac cattattatc atgacattaa
7201 cctataaaaa taggcgtatc acgaggccct ttcgtctcgc gcgtttcggt gatgacggtg
7261 aaaacctctg acacatgcag ctcccggaga cggtcacagc ttgtctgtaa gcggatgccg
7321 ggagcagaca agcccgtcag ggcgcgtcag cggt
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1607/CHOP promoter (-649+136) pmCherry-1人源启动子质粒 |
| P0807/pSPT19-Ptn-m小鼠基因质粒 |
| P1155/pBSFI-myr-akt1小鼠基因质粒 |
| P1156/pBSFI-myr-akt-T308A/S473A小鼠基因质粒 |
| P1824/pUC57s-Lox-m(356-1236bp)小鼠基因质粒 |
| P1837/pUC57s-Trp53-m小鼠基因质粒 |
| P2003/pSV40-Hspa5-m(1-818bp)小鼠基因质粒 |
| P2004/pSV40-Pofut2-m小鼠基因质粒 |
| P2005/pSV40-Irgm1-m(177-1230bp)小鼠基因质粒 |
| P2006/pSV40-Pcbp4-m-A667G小鼠基因质粒 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
诺奖得主 Science 发文：基因编辑诞生 10 年，未来将如何改变世界？
前言 簇状规则间隔短回文重复（CRISPR）基因组编辑的出现，以及计算和成像能力的进步，使得编辑细胞和生物体中的 DNA 片段或特定的碱基对成为可能。从遗传病到农业实践和产品，CRISPR 工具箱及其应用深刻地影响了生物学研究。 通过 CRISPR-Cas9，我们不仅可以诊断人类疾病，甚至可以根据个人遗传学预测个体易感性，还可以根据这些信息设计治疗策略。同样，我们既可以识别并快速改变负责植物性状的基因，又可以优化农业研究和植物育种。 2012 年 6 月，Jennifer
的表达质粒。A）PCR 扩增的方法U6：来源于人 U6 小核启动子，常用小 RNA 表达，转录本为 shRNA。将 sgRNA 放到 U6 后面，利用 U6 的启动来扩增 sgRNA。将这部分内容整合到 Cas9 expression plasmid pSpCas9（Cas9 表达质粒）中，一起共转。B）sgRNA 表达质粒的方法现在我要用这个方法来举例设计 p53 引物找到包括 sgRNA 序列的前后 1000 个碱基的序列（2000 bp）找到的序列如下：将上面复制的序列粘贴到 blast 中
靶序列并进行 DNA 的裂解。CRISPR 的实际应用CRISPR 系统作为一种精确的基因编辑技术，主要被应用在 DNA 编辑领域，可为疾病的靶向个性化治疗提供强大的技术支持。例如，可在待敲除的目的基因的上下游各设计一条向导 RNA（gpRNA1、gpRNA2），将其与含有 Cas9 蛋白编码基因的质粒一同转入细胞中。则向导 RNA 可通过碱基互补配对靶向 PAM 附近的目标序列，Cas9 蛋白会使基因上下游的 DNA 断裂。而后细胞自身存在的 DNA 损伤修复的应答机制可使 dsDNA 断裂
pXT7-Cas9爪蟾编辑质粒
￥100 - 1000
