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无锡云萃生物
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文献和实验相关专题 中文名： 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷( IPTG) 英文名称： Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside 用途： 异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一种作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用。IPTG 常用于需要诱导 β-半乳糖苷酶活性的克隆实验。它常与 X-Gal 或 Bluo-Gal 结合使用，用于重组 细菌
状态.此时,I序列在PI启动序列操纵下表达的Lac阻遏蛋白与O序列结合,阻碍RNA聚合酶与P序列结合,抑制转录起动. 当有乳糖存在时,lac操纵子(元)即可被诱导.在这个操纵子(元)体系中,真正的诱导剂并非乳糖本身.乳糖进入细胞,经b-半乳糖苷酶催化,转变为半乳糖.后者作为一种诱导剂分子结合阻遏蛋白,使蛋白构象变化,导致阻遏蛋白与O序列解离、发生转录.异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一种作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用. 材料： 1、诱导
初步识别可能带有重组质粒的菌落。通过小量制备质粒DNA进行限制酶切分析，即可确定这些质粒的结构。【试剂】1．X-gal（20mg/m l）：将20mg X-gal溶于l ml二甲基甲酰胺中，-20℃避光保存。2．IPTG（200mg/ml）：将1g IPTG溶于4 ml去离子双蒸水中，定容至5 ml，用0.22μm过滤器除菌，-20℃保存备用。【操作步骤】1．制备含相应抗生素的琼脂平板。2．于平板表面加 X-gal 40μl 和IPTG 4μl，并用无菌玻璃涂布器将试剂均匀涂布于整个平板表面。37
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