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- 2025年09月02日
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智立中特(武汉)生物科技有限公司
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甘油
[载体宿主] 大肠杆菌
pET41b载体基本信息
出品公司:EMD Biosciences (Novagen)
别名:pET41b, pET 41b
质粒类型:大肠杆菌蛋白表达
表达水平:高
克隆方法:多克隆位点，限制性内切酶
载体大小:5932 bp
5' 测序引物:T7或pGEX-5‘
5' 测序引物序列: T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'; pGEX-5': 5'-GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG-3'
载体标签:N-GST, N-His, N-Thrombin
载体抗性:KanamycinV
表达宿主菌:BL21(DE3) 、 Rosetta2(DE3)、C43(DE3)
备注:
Encodes GST fusion tag; Nterm thrombin cleavage site; Nterm enterokinase cleavage site; PshAI blunt cloning site; a,b,c vary by MCS
产品目录号:70557-3
稳定性:瞬时表达 Transient
组成型:组成型 Constitutive
病毒/非病毒:非病毒
pET41b载体质粒图谱和多克隆位点信息
Feature Name Start End
T7_terminator 120 1
T7_Terminal_primer 69 87
EK 278 264
S15 353 309
6xHIS 413 396
GST (variant) 1094 444
T7_transl_en_RBS 1119 1103
lacO 1164 1137
T7_promoter 1182 1164
tet (300 - 563) 1218 1481
pBRrevBam_primer 1289 1270
lacI 1564 2655
ROP 3227 3418
pGEX_3_primer 3434 3412
pBR322_origin 4452 3833
KanR2 4558 5373
ORF Start End
ORF frame 3 1094 147
ORF frame 3 1095 1823
ORF frame 1 1696 2655
ORF frame 1 4558 5373
Enzyme Name Cut
XhoI 174
NotI 182
EagI 182
HindIII 189
SalI 195
SacI 206
PstI 214
AscI 216
StuI 226
EcoRI 235
BamHI 241
EcoRV 251
NcoI 254
AgeI 291
KpnI 298
BglII 301
SacII 392
SpeI 423
MscI 886
NdeI 1093
XbaI 1131
ApaI 2134
HpaI 2429
NruI 4646
SmaI 4863
XmaI 4861
pET41b载体简介
The pET-41 series is designed for cloning and high-level expression of peptide sequences fused with the 220 aa GST•Tag protein. Unique sites are shown on the circle map. Note that the sequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on the circle map. The cloning/expression region of the coding strand transcribed by T7 RNA polymerase is shown below. The f1 origin is oriented so that infection with helper phage will produce virions containing single stranded DNA that corresponds to the coding strand. Therefore, single stranded sequencing should be performed using the T7 terminator primer (cat. no. 69337-3).Vector encoded sequence can be completely removed when cloning into the PshAI site (as shown below) and then cleaving the GST fusion protein with Enterokinase.
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文献和实验PET39b PET40b PET41a PET42a PET42b PET43.1b PET44a PET48b PET50b PET52b
（ DE3 ）表达的活性蛋白比其它宿主菌高 10 倍以上。 Origami 宿主菌与氨苄抗性质粒相容，可用于 pET-32 载体，硫氧还蛋白标签能够进一步增强在胞浆内形成二硫键。 TrxB 和 gor 突变可分别用卡那霉素和四环素选择，因此该菌株建议用于带氨苄抗性标记 bla 的 pET 质粒。 Origami B 宿主菌来源于 BL21 lacZY 突变株，还带有与原始 Origami 菌株相同的 TrxB / gor 突变。 Origami B 菌株集 BL21 、 Tuner
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