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无锡云萃生物
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25711-30-2
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5mg/50mg/100mg/500mg
| 规格: | 5mg | 产品价格: | ¥100.0 |
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云萃
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文献和实验制滴菌素A对小鼠克隆胚胎的染色体重建、DNA复制及转录活性的影响
μL转录液的电促细胞融合仪的两电极中间;采用250V/cm,80 μs,2次的参数,对胚胎进行透化,(每次透化间隔为2min)。胚胎透化后2min移入CZB中培养1h然后再移入上述转录液中。最后胚胎用4%多聚甲醛中固定,用间接免疫荧光观察转录物种掺入的BrUTP的含量。在阴性对照组的EP液、转录液、KSOM液中加入5 μg/mL 鹅膏菌素(RNA聚合酶 II和III的抑制剂)。 6. 免疫荧光显微镜检查 本次试验中使用的抗体是兔抗组蛋白H3 丝氨酸10磷酸
显微镜免疫细胞化学技术(以下简称免疫电镜技术技术)区别于免疫细胞化学和常规电镜技术主要在以下几方面: 一、组织固定与取材 在这方面的要求是即要保存良好的细胞超微结构,又要注意保持组织的抗原性。因此,选用固定剂不宜过强。常用的免疫电镜固定剂有多聚甲醛―戊二醛混合液和过碘酸-赖氨酸―多聚甲醛液(Periodate―Lysine �Paraformaldehyde简称PLP液)。也有采用Bouin氏液、Zamboni氏液或4%多聚甲醛液(其配制法见附录)。国外不少文献推荐应用
到经多聚赖氨酸处理的玻片上,56℃温箱中烘干,PBS 洗3 次,4% 多聚甲醛室温固定20min,PBS 洗2 次,0.1% Triton-X100 孵育10min,PBS 洗2 次;1%BSA封闭,室温孵育1h,PBS 洗2 次;分别加入适量以封闭液稀释的第一抗体CD133、Nestin,4℃孵育过夜;PBS 洗3 次,加入FITC(两种抗体只能加FITC,因为转染后的干细胞表达红色荧光蛋白)耦联的二抗,室温避光孵育2h ;PBS 洗3 次,以50%、70%、95% 和100% 四个浓度梯度的乙醇
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