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无锡云萃生物
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文献和实验相关专题 一、原理：氨基酸混合液经纸上层析，由于不同的氨基酸有不同的分配系数，移动速率不同，从而达到分离。经显色后，与标准氨基酸图谱比较或与氨基酸的标准Rf值比较，可辨别各种氨基酸。 二、材料与试剂 1、酸向展开剂：正丁醇：88%甲酸：水=15：3：2，量取正丁醇150ml，88%甲酸30ml，蒸馏水20ml，置入分液漏斗中充分振荡。此液需新配制。 2、12%氨水：量取60ml浓氨水，加入70ml蒸馏水稀释。 3、碱向展开
斑的方法是用Xgal蓝色噬菌斑试验。有些噬菌体载体的中间片段带有编码β半乳糖苷酸的基因。当这种噬菌体感染lac宿主细胞并在含有Xgal（5溴4氯3吲哚βD半乳糖苷）的培养基上生长时，半乳糖苷酸与Xgal反应的产物为不溶性的靛蓝染料。因此，含有中间片段的重新恢复的噬菌体形成蓝色噬菌斑；而同外源DNA连接的重组噬菌体形成的噬菌斑是无色透明的。 （二）单链噬菌体载体 最常用的单链噬菌体载体是M13和它的改建噬菌体。M13是丝状噬菌体，有长约6500个核苷酸的闭环DNA基因组。M13附着在大肠杆菌的F
Taq DNA聚合酶是从一种水生栖热菌(Thermusaquaticus)yT1株分离提取的.yT是 一种嗜热真菌，能在70～75℃生长.该菌是1969年从美国黄石国家森林公园火山温泉 中分离的.(一)酶活性与热稳定性该酶基因全长2496个碱基，编码832个氨基酸，酶蛋白分子为 94KDa.其比活性为200000单位/mg.75～80℃时每个酶分子每秒钟可延伸约150个核苷 酸，70℃延伸率大于60个核苷酸/秒，55℃时为24个核苷酸/秒.温度过高(90℃以上) 或过低(22℃)都可影响Taq
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