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云萃
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文献和实验关于论坛中所有Native PAGE/非变性电泳及蛋白回收的经典总结
跑活性电泳,不加SDS。兔抗仿蜘蛛牵丝蛋白抗体的制备及应用郭廷晴 赵昀 汪生鹏 董良 陆长德*( 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所, 上海 200031 )摘要 将仿蜘蛛牵丝基因s600克隆到GST融合蛋白表达质粒pGEX-KG中, 利用大肠杆菌表达系统表达并纯化了仿蜘蛛牵丝蛋白S600, 以之作为抗原制备了兔抗血清。 S600的氨基酸组分分析与理论值相吻合。 蛋白质免疫印迹发现该抗血清能与天然蜘蛛丝反应, 表明设计的仿蜘蛛丝与天然蜘蛛丝有相似的免疫
1.0g p-氨基苯甲酸 0.05g pH 6.9-7.3 69、Czapek'Dox 琼脂培养基 (ATCC 134) Czapek'Dox Broth 35.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 1000ml 70、MG/L 蛋白胨 5.0g 甘露醇 5.0g 谷氨酸钠 1.15g 生物素 0.0001g K2HPO4 0.25g NaCl 0.1g MgSO4.7H2O 0.1g 酵母膏 2.5g 琼脂 20.0g 蒸馏水 1000ml 氯霉素(终浓度) 50μg/ml pH 7.0 71
aa-dUTP c D N A 纯化 :微 型 洗 脱 柱 ( Qiagen, Crawley, U K ) ,75% ( V / V )乙醇。 ( 3 ) 氨基婦丙基标记的第一链c D N A : Alexa染料號J 自酰亚胺酯(AlexaFluordye555/647,Molecular Probes) 备 用 ( 见注 7 ) ,1 mol/L p H 9 . 0 N a H C 0 3 标记缓冲液,微型洗脱柱 ( Qiagen, Crawley, U K
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