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云萃
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文献和实验,可以一次性地定量分析多种氨基酸对映体.所用衍生剂为邻苯二甲醛(OPA) 和N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC) [2 ,3 ] . NAC是一种手性硫醇,其它手性硫醇如N-乙酰-D-青霉胺(NAP) 、N-异丁酰-L-半胱氨酸( IBLC) 、N-异丁酰-D-半胱氨酸(IBDC) [4 ] 也可与OPA 一起做为衍生剂. 1 实验部分 1. 1 试剂与仪器 DL-丝氨酸(上海丽珠东风生物技术有限公司) ;L-丝氨酸、β丙氨酸、DL-丙氨酸、L-丙氨酸、DL-苯丙 氨酸、L-
物可选择其他溶媒，首-选二甲基亚矾(DMSO)，但使用时浓度不应大于0.5%。 对照： 每一项试验中，在有无代谢活化系统条件下均应设阳性和阴性(溶媒)对照组。 阳性对照：当使用代谢活化系统时,阳性对照物必须是要求代谢活化、并能引起突变的物质，可以使用3-甲基胆蒽(3-methylcholanthrene)、N-亚硝基二甲-胺(N-nitroso-dimethylamine)、7,12-二甲基苯并[a]蒽(7, 12-dimethylbenz[a]anthracene)等。在没有代谢活化系统
氨酸硫醇。修饰的半胱氨酸残基的N-端肽键可在碱性条件下用三(2-羧乙酸)盐酸膦切下，以形成一个氨基酸端肽以及一系列2-亚氨基噻唑-4-羧肽，然后用MALDI-TOF MS进行测定。在还原状态下，重复以上实验即可确定半胱氨酸残基总数。Watson等用与此相似的检测半胱氨酸和胱氨酸的方法，pmol级的起始物质与NTCB和三羧乙酸膦反应，再用MALDI-TOF MS分析。Denslow等报道了束缚在PVDF膜上的蛋白的切割过程，用NTCB氰基化半胱氨酸残基后切割，再用MALDI-TOF MS测定所得片段
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