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无锡云萃生物
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云萃
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文献和实验免疫荧光组织(细胞)化学技术系列四:荧光素及其标记抗体的方法
晰,与蛋白质结合方式同FITC。它可用于双标记示踪研究。3、得克萨斯红(texas red)得克萨斯红是一种褐色粉末状,易溶于有机溶剂,性质稳定,在4℃下能保存2年以上,最大吸收光谱为590-595nm,最大发射光谱为620-630mm,共有四种结构,常用的分子量为625.15。4. 其它荧光素如4-乙酰胺-4-异硫氰酸-2-硫酸芪(SITS)、7-氨基甲基香豆素(AMC)呈蓝色荧光,藻红素R(phycoerythrin-R),花青(Cyanine、Cy2、Cy3、Cy5和Cy7)等。 二、荧
),用100mmol/L pH 7.4PBS(含0.1mol/L NaCl)平衡和洗脱。2)0.5ml蛋白(2mg/ml)100mmol/L PBS(含有100mmol/L NaCl pH 7.4),加入2.6μl上述SPDP甲醇液, SPDP:蛋白A=9:5 ,22℃,40min, 加入25μl二硫苏糖醇(DTT) pH 7.4缓冲液,22℃,25min,同上过sephadex G-25,收集蛋白A峰。3)取0.77mg/ml的PE 和0.27mg/ml蛋白A 等量混合,22℃反应6h,混合物4℃保存
,加入25μmol/L二硫苏糖醇(DTT)pH7.4缓冲液,22℃,25min,同上过Sephadex G-50,收集蛋白A峰。 (3)取0.77mg/ml的PE和0.27mg/ml蛋白A等量混合,22℃反应6h,混合物4℃保存备用。 以上两种PE标记制品,可最后溶于0.01mol/l pH7.4PB(含有0.1mol/l DETA、1mol/L碘乙酰胺、1%BSA 和0.1%NaN3),0~5℃保存。 (六)蓝色荧光素标记抗体方法 Kbaffan等(1986
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