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pMN20植物超表达质粒

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  • ¥100 - 1000
  • Xybio
  • 上海
  • P1658
  • 2025年07月16日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      -20

    • 保质期

      2年

    • 英文名

      Plasmid#11573

    • 库存

      100

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 规格

      干粉/液体

    基本信息
    名称:pMN20植物超表达质粒
    别称: Plasmid#11573
    原核抗性: Str
    筛选标记: G418
    克隆菌株: DH5a
    培养条件: 37度


    质粒属性
    载体宿主: 植物
    载体用途: 蛋白表达
    基因种属:  
    基因类型: ORF
    原核抗性: Str
    筛选标记: Neo/G418
    荧光蛋白:
    质粒简介
          pMN20是一个植物超表达质粒,有CaMV 35S enhancers.

    质粒图谱
    产品细节图片1

    质粒序列
    LOCUS       Exported               11073 bp ds-DNA     circular SYN 03-DEC-2017
    DEFINITION  synthetic circular DNA
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..11073
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /mol_type="other DNA"
         misc_feature    complement(696..2051)
                         /label=4×35Se
         misc_feature    2388..2412
                         /label=RB T-DNA repeat
                         /note="right border repeat from nopaline C58 T-DNA"
         CDS             3712..4341
                         /codon_start=1
                         /product="stability protein from the Pseudomonas plasmid 
                         pVS1 (Heeb et al., 2000)"
                         /label=pVS1 StaA
                         /translation="MKVIAVLNQKGGSGKTTIATHLARALQLAGADVLLVDSDPQGSAR
                         DWAAVREDQPLTVVGIDRPTIDRDVKAIGRRDFVVIDGAPQAADLAVSAIKAADFVLIP
                         VQPSPYDIWATADLVELVKQRIEVTDGRLQAAFVVSRAIKGTRIGGEVAEALAGYELPI
                         LESRITQRVSYPGTAAAGTTVLESEPEGDAAREVQALAAEIKSKLI"
         CDS             4775..5842
                         /codon_start=1
                         /product="replication protein from the Pseudomonas plasmid 
                         pVS1 (Heeb et al., 2000)"
                         /label=pVS1 RepA
                         /translation="GRKPSGPVQIGAALGDDLVEKLKAAQAAQRQRIEAEARPGESWQA
                         AADRIRKESRQPPAAGAPSIRKPPKGDEQPDFFVPMLYDVGTRDSRSIMDVAVFRLSKR
                         DRRAGEVIRYELPDGHVEVSAGPAGMASVWDYDLVLMAVSHLTESMNRYREGKGDKPGR
                         VFRPHVADVLKFCRRADGGKQKDDLVETCIRLNTTHVAMQRTKKAKNGRLVTVSEGEAL
                         ISRYKIVKSETGRPEYIEIELADWMYREITEGKNPDVLTVHPDYFLIDPGIGRFLYRLA
                         RRAAGKAEARWLFKTIYERSGSAGEFKKFCFTVRKLIGSNDLPEYDLKEEAGQAGPILV
                         MRYRNLIEGEASAGS"
         rep_origin      5908..6102
                         /label=pVS1 oriV
                         /note="origin of replication for the Pseudomonas plasmid 
                         pVS1 (Heeb et al., 2000)"
         misc_feature    6446..6586
                         /label=bom
                         /note="basis of mobility region from pBR322"
         rep_origin      complement(6772..7360)
                         /direction=LEFT
                         /label=ori
                         /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                         replication"
         CDS             complement(7604..8395)
                         /codon_start=1
                         /gene="aadA"
                         /product="aminoglycoside adenylyltransferase (Murphy, 
                         1985)"
                         /label=Spe
                         /note="confers resistance to spectinomycin and 
                         streptomycin"
                         /translation="MGEAVIAEVSTQLSEVVGVIERHLEPTLLAVHLYGSAVDGGLKPH
                         SDIDLLVTVTVRLDETTRRALINDLLETSASPGESEILRAVEVTIVVHDDIIPWRYPAK
                         RELQFGEWQRNDILAGIFEPATIDIDLAILLTKAREHSVALVGPAAEELFDPVPEQDLF
                         EALNETLTLWNSPPDWAGDERNVVLTLSRIWYSAVTGKIAPKDVAADWAMERLPAQYQP
                         VILEARQAYLGQEEDRLASRADQLEEFVHYVKGEITKVVGK"
         misc_feature    8923..8947
                         /label=LB T-DNA repeat
                         /note="left border repeat from nopaline C58 T-DNA"
         polyA_signal    9045..9219
                         /label=CaMV poly(A) signal
                         /note="cauliflower mosaic virus polyadenylation signal"
         CDS             complement(9273..10070)
                         /codon_start=1
                         /gene="aph(3')-II (or nptII)"
                         /product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
                         /label=Neo
                         /note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418 
                         (Geneticin(R))"
                         /translation="MGIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGR
                         PVLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLL
                         SSHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPAT-CPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEH
                         QGLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDI
                         ALATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
         promoter        complement(10130..10808)
                         /label=CaMV 35S promoter (enhanced)
                         /note="cauliflower mosaic virus 35S promoter with a 
                         duplicated enhancer region"
    ORIGIN
            1 ggtcgactct agaggatccc cgggtaccga gctcgagatc tagatatcga taagcttatc
           61 gataccgtcg acctcgaggg gccaacagag cctggcgttc cccttttgca ttgagaccga
          121 tgttcgttcc ggaaccttgc acgccccaga gcttctcacc gttcacgaca atttccttct
          181 cgttgaggtc ggtcgcgcca tgtcggatga aataaaaact tttgatacca gcgggggcct
          241 tcgcagagcc gaggtaggtc tgagaaattg gcattttcac gtgtggaaga tatgaatttt
          301 tttgagaaac tagataagat taatgaatat cggtgttttg gttttttctt gtggccgtct
          361 ttgtttatat tgagattttt caaatcagtg cgcaagacgt gacgtaagta tccgagtcag
          421 tttttatttt tctactaatt tggtcgttta tttcggcgtg taggacatgg caaccgggcc
          481 tgaatttcgc gggtattctg tttctattcc aactttttct tgatccgcag ccattaacga
          541 cttttgaata gatacgctga cacgccaagc ctcgctattc aaaagtgtac caaacaacgc
          601 tttacagcaa gaacggaatg cgcgtgacgc tcgcggtgac gccatttcgc cttttcagaa
          661 atggataaat agccttctca aacactgata gtttcggatc tagatatcac atcaatccac
          721 ttgctttgaa gacgtggttg gaacgtcttc tttttccacg atgttcctcg tgggtggggg
          781 tccatctttg ggaccactgt cggtagaggc atcttgaacg atagcctttc ctttatcgca
          841 atgatggcat ttgtagaagc catcttcctt ttctactgtc ctttcgatga agtgacagat
          901 agctgggcaa tggaatccga ggaggtttcc cgatattacc ctttgttgaa aagtctcaat
          961 agccctctgg tcttctgaga ctgtatcttt gatattcttg gagtagacga gagtgtcgtg
         1021 ctccaccatg ttggggatct agatatcaca tcaatccact tgctttgaag acgtggttgg
         1081 aacgtcttct ttttccacga tgttcctcgt gggtgggggt ccatctttgg gaccactgtc
         1141 ggtagaggca tcttgaacga tagcctttcc tttatcgcaa tgatggcatt tgtagaagcc
         1201 atcttccttt tctactgtcc tttcgatgaa gtgacagata gctgggcaat ggaatccgag
         1261 gaggtttccc gatattaccc tttgttgaaa agtctcaata gccctctggt cttctgagac
         1321 tgtatctttg atattcttgg agtagacgag agtgtcgtgc tccaccatgt tggggatcta
         1381 gatatcacat caatccactt gctttgaaga cgtggttgga acgtcttctt tttccacgat
         1441 gttcctcgtg ggtgggggtc catctttggg accactgtcg gtagaggcat cttgaacgat
         1501 agcctttcct ttatcgcaat gatggcattt gtagaagcca tcttcctttt ctactgtcct
         1561 ttcgatgaag tgacagatag ctgggcaatg gaatccgagg aggtttcccg atattaccct
         1621 ttgttgaaaa gtctcaatag ccctctggtc ttctgagact gtatctttga tattcttgga
         1681 gtagacgaga gtgtcgtgct ccaccatgtt ggggatctag atatcacatc aatccacttg
         1741 ctttgaagac gtggttggaa cgtcttcttt ttccacgatg ttcctcgtgg gtgggggtcc
         1801 atctttggga ccactgtcgg tagaggcatc ttgaacgata gcctttcctt tatcgcaatg
         1861 atggcatttg tagaagccat cttccttttc tactgtcctt tcgatgaagt gacagatagc
         1921 tgggcaatgg aatccgagga ggtttcccga tattaccctt tgttgaaaag tctcaatagc
         1981 cctctggtct tctgagactg tatctttgat attcttggag tagacgagag tgtcgtgctc
         2041 caccatgttg gggatccact agttctagag cggccgccac cgcggtggag ctcgaattcg
         2101 taatcatggt catagctgtt tcctgtgtga aattgttatc cgctcacaat tccacacaac
         2161 atacgagccg gaagcataaa gtgtaaagcc tggggtgcct aatgagtgag ctaactcaca
         2221 ttaattgcgt tgcgctcact gcccgctttc cagtcgggaa acctgtcgtg ccagctgcat
         2281 taatgaatcg gccaacgcgc ggggagaggc ggtttgcgta ttggctagag cagcttgagc
         2341 ttggatcaga ttgtcgtttc ccgccttcag tttaaactat cagtgtttga caggatatat
         2401 tggcgggtaa acctaagaga aaagagcgtt tattagaata acggatattt aaaagggcgt
         2461 gaaaaggttt atccgttcgt ccatttgtat gtgcatgcca accacagggt tcccctcggg
         2521 atcaaagtac tttgatccaa cccctccgct gctatagtgc agtcggcttc tgacgttcag
         2581 tgcagccgtc ttctgaaaac gacatgtcgc acaagtccta agttacgcga caggctgccg
         2641 ccctgccctt ttcctggcgt tttcttgtcg cgtgttttag tcgcataaag tagaatactt
         2701 gcgactagaa ccggagacat tacgccatga acaagagcgc cgccgctggc ctgctgggct
         2761 atgcccgcgt cagcaccgac gaccaggact tgaccaacca acgggccgaa ctgcacgcgg
         2821 ccggctgcac caagctgttt tccgagaaga tcaccggcac caggcgcgac cgcccggagc
         2881 tggccaggat gcttgaccac ctacgccctg gcgacgttgt gacagtgacc aggctagacc
         2941 gcctggcccg cagcacccgc gacctactgg acattgccga gcgcatccag gaggccggcg
         3001 cgggcctgcg tagcctggca gagccgtggg ccgacaccac cacgccggcc ggccgcatgg
         3061 tgttgaccgt gttcgccggc attgccgagt tcgagcgttc cctaatcatc gaccgcaccc
         3121 ggagcgggcg cgaggccgcc aaggcccgag gcgtgaagtt tggcccccgc cctaccctca
         3181 ccccggcaca gatcgcgcac gcccgcgagc tgatcgacca ggaaggccgc accgtgaaag
         3241 aggcggctgc actgcttggc gtgcatcgct cgaccctgta ccgcgcactt gagcgcagcg
         3301 aggaagtgac gcccaccgag gccaggcggc gcggtgcctt ccgtgaggac gcattgaccg
         3361 aggccgacgc cctggcggcc gccgagaatg aacgccaaga ggaacaagca tgaaaccgca
         3421 ccaggacggc caggacgaac cgtttttcat taccgaagag atcgaggcgg agatgatcgc
         3481 ggccgggtac gtgttcgagc cgcccgcgca cgtctcaacc gtgcggctgc atgaaatcct
         3541 ggccggtttg tctgatgcca agctggcggc ctggccggcc agcttggccg ctgaagaaac
         3601 cgagcgccgc cgtctaaaaa ggtgatgtgt atttgagtaa aacagcttgc gtcatgcggt
         3661 cgctgcgtat atgatgcgat gagtaaataa acaaatacgc aaggggaacg catgaaggtt
         3721 atcgctgtac ttaaccagaa aggcgggtca ggcaagacga ccatcgcaac ccatctagcc
         3781 cgcgccctgc aactcgccgg ggccgatgtt ctgttagtcg attccgatcc ccagggcagt
         3841 gcccgcgatt gggcggccgt gcgggaagat caaccgctaa ccgttgtcgg catcgaccgc
         3901 ccgacgattg accgcgacgt gaaggccatc ggccggcgcg acttcgtagt gatcgacgga
         3961 gcgccccagg cggcggactt ggctgtgtcc gcgatcaagg cagccgactt cgtgctgatt
         4021 ccggtgcagc caagccctta cgacatatgg gccaccgccg acctggtgga gctggttaag
         4081 cagcgcattg aggtcacgga tggaaggcta caagcggcct ttgtcgtgtc gcgggcgatc
         4141 aaaggcacgc gcatcggcgg tgaggttgcc gaggcgctgg ccgggtacga gctgcccatt
         4201 cttgagtccc gtatcacgca gcgcgtgagc tacccaggca ctgccgccgc cggcacaacc
         4261 gttcttgaat cagaacccga gggcgacgct gcccgcgagg tccaggcgct ggccgctgaa
         4321 attaaatcaa aactcatttg agttaatgag gtaaagagaa aatgagcaaa agcacaaaca
         4381 cgctaagtgc cggccgtccg agcgcacgca gcagcaaggc tgcaacgttg gccagcctgg
         4441 cagacacgcc agccatgaag cgggtcaact ttcagttgcc ggcggaggat cacaccaagc
         4501 tgaagatgta cgcggtacgc caaggcaaga ccattaccga gctgctatct gaatacatcg
         4561 cgcagctacc agagtaaatg agcaaatgaa taaatgagta gatgaatttt agcggctaaa
         4621 ggaggcggca tggaaaatca agaacaacca ggcaccgacg ccgtggaatg ccccatgtgt
         4681 ggaggaacgg gcggttggcc aggcgtaagc ggctgggttg tctgccggcc ctgcaatggc
         4741 actggaaccc ccaagcccga ggaatcggcg tgacggtcgc aaaccatccg gcccggtaca
         4801 aatcggcgcg gcgctgggtg atgacctggt ggagaagttg aaggccgcgc aggccgccca
         4861 gcggcaacgc atcgaggcag aagcacgccc cggtgaatcg tggcaagcgg ccgctgatcg
         4921 aatccgcaaa gaatcccggc aaccgccggc agccggtgcg ccgtcgatta ggaagccgcc
         4981 caagggcgac gagcaaccag attttttcgt tccgatgctc tatgacgtgg gcacccgcga
         5041 tagtcgcagc atcatggacg tggccgtttt ccgtctgtcg aagcgtgacc gacgagctgg
         5101 cgaggtgatc cgctacgagc ttccagacgg gcacgtagag gtttccgcag ggccggccgg
         5161 catggccagt gtgtgggatt acgacctggt actgatggcg gtttcccatc taaccgaatc
         5221 catgaaccga taccgggaag ggaagggaga caagcccggc cgcgtgttcc gtccacacgt
         5281 tgcggacgta ctcaagttct gccggcgagc cgatggcgga aagcagaaag acgacctggt
         5341 agaaacctgc attcggttaa acaccacgca cgttgccatg cagcgtacga agaaggccaa
         5401 gaacggccgc ctggtgacgg tatccgaggg tgaagccttg attagccgct acaagatcgt
         5461 aaagagcgaa accgggcggc cggagtacat cgagatcgag ctagctgatt ggatgtaccg
         5521 cgagatcaca gaaggcaaga acccggacgt gctgacggtt caccccgatt actttttgat
         5581 cgatcccggc atcggccgtt ttctctaccg cctggcacgc cgcgccgcag gcaaggcaga
         5641 agccagatgg ttgttcaaga cgatctacga acgcagtggc agcgccggag agttcaagaa
         5701 gttctgtttc accgtgcgca agctgatcgg gtcaaatgac ctgccggagt acgatttgaa
         5761 ggaggaggcg gggcaggctg gcccgatcct agtcatgcgc taccgcaacc tgatcgaggg
         5821 cgaagcatcc gccggttcct aatgtacgga gcagatgcta gggcaaattg ccctagcagg
         5881 ggaaaaaggt cgaaaaggtc tctttcctgt ggatagcacg tacattggga acccaaagcc
         5941 gtacattggg aaccggaacc cgtacattgg gaacccaaag ccgtacattg ggaaccggtc
         6001 acacatgtaa gtgactgata taaaagagaa aaaaggcgat ttttccgcct aaaactcttt
         6061 aaaacttatt aaaactctta aaacccgcct ggcctgtgca taactgtctg gccagcgcac
         6121 agccgaagag ctgcaaaaag cgcctaccct tcggtcgctg cgctccctac gccccgccgc
         6181 ttcgcgtcgg cctatcgcgg ccgctggccg ctcaaaaatg gctggcctac ggccaggcaa
         6241 tctaccaggg cgcggacaag ccgcgccgtc gccactcgac cgccggcgcc cacatcaagg
         6301 caccctgcct cgcgcgtttc ggtgatgacg gtgaaaacct ctgacacatg cagctcccgg
         6361 agacggtcac agcttgtctg taagcggatg ccgggagcag acaagcccgt cagggcgcgt
         6421 cagcgggtgt tggcgggtgt cggggcgcag ccatgaccca gtcacgtagc gatagcggag
         6481 tgtatactgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc accatatgcg
         6541 gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgct cttccgcttc
         6601 ctcgctcact gactcgctgc gctcggtcgt tcggctgcgg cgagcggtat cagctcactc
         6661 aaaggcggta atacggttat ccacagaatc aggggataac gcaggaaaga acatgtgagc
         6721 aaaaggccag caaaaggcca ggaaccgtaa aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag
         6781 gctccgcccc cctgacgagc atcacaaaaa tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc
         6841 gacaggacta taaagatacc aggcgtttcc ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt
         6901 tccgaccctg ccgcttaccg gatacctgtc cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct
         6961 ttctcatagc tcacgctgta ggtatctcag ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg
         7021 ctgtgtgcac gaaccccccg ttcagcccga ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct
         7081 tgagtccaac ccggtaagac acgacttatc gccactggca gcagccactg gtaacaggat
         7141 tagcagagcg aggtatgtag gcggtgctac agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg
         7201 ctacactaga aggacagtat ttggtatctg cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa
         7261 aagagttggt agctcttgat ccggcaaaca aaccaccgct ggtagcggtg gtttttttgt
         7321 ttgcaagcag cagattacgc gcagaaaaaa aggatctcaa gaagatcctt tgatcttttc
         7381 tacggggtct gacgctcagt ggaacgaaaa ctcacgttaa gggattttgg tcatgcatga
         7441 tatatctccc aatttgtgta gggcttatta tgcacgctta aaaataataa aagcagactt
         7501 gacctgatag tttggctgtg agcaattatg tgcttagtgc atctaatcgc ttgagttaac
         7561 gccggcgaag cggcgtcggc ttgaacgaat ttctagctag acattatttg ccgactacct
         7621 tggtgatctc gcctttcacg tagtggacaa attcttccaa ctgatctgcg cgcgaggcca
         7681 agcgatcttc ttcttgtcca agataagcct gtctagcttc aagtatgacg ggctgatact
         7741 gggccggcag gcgctccatt gcccagtcgg cagcgacatc cttcggcgcg attttgccgg
         7801 ttactgcgct gtaccaaatg cgggacaacg taagcactac atttcgctca tcgccagccc
         7861 agtcgggcgg cgagttccat agcgttaagg tttcatttag cgcctcaaat agatcctgtt
         7921 caggaaccgg atcaaagagt tcctccgccg ctggacctac caaggcaacg ctatgttctc
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        11041 aacgacggcc agtgccaagc ttgcatgcct gca
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    质粒菌株产品操作说明书
    一、扩增流程
             收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
             1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
                  1100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
                  加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37培养45min
                  6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
                  将平板正向培养1h,再倒置37培养14h。如果要求是30度则培养20h
    (菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
                  挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
            2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
                  四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
            3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
            4、菌落平板(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  直接挑取单菌落至液体培养基中。
            5、液体质粒(冰袋运输,存于-20,保质期90天)
                  单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
            6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。

    二、转化图片
    产品细节图片2
    产品细节图片3
    P0713/pET-29b大肠表达质粒
    P0031/pET-30a大肠表达质粒
    P0449/pET30a-EcoRV大肠表达质粒
    P2187/pET-30b大肠表达质粒
    P1868/pET-30c大肠表达质粒
    P0032/pET-31b大肠表达质粒
    P0033/pET-32a大肠表达质粒
    P0034/pET-32b大肠表达质粒
    P0326/pET-32c大肠表达质粒
    P0035/pET-35b大肠表达质粒
     

     

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