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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
2年
- 英文名:
pGWB406
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
干粉/液体
名称:pGWB406植物表达质粒
别称: pGWB406
| 启动子: | 35s |
|---|---|
| 复制子: | pVS1 |
| 原核抗性: | Chl |
| 筛选标记: | G418 |
| 克隆菌株: | DB3.1 |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主: | 植物 |
|---|---|
| 载体用途: | 蛋白表达 |
| 基因种属: | 空载体 |
| 基因类型: | ORF,GateWay |
| 原核抗性: | Chl |
| 筛选标记: | Neo/G418 |
| 荧光蛋白: | 绿色 |
质粒简介
pGWB406植物表达质粒
质粒图谱
质粒序列
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
| P2897/pENTR223-ZMYND10人源基因质粒 |
| P2898/pENTR223-HDAC3(1同义突变)人源基因质粒 |
| P2899/pENTR223-KRT18-T502C人源基因质粒 |
| P2900/pENTR223-DCAF15(493-1803bp)人源基因质粒 |
| P2901/pENTR223-ASTN2-C1262T人源基因质粒 |
| P2902/pENTR223-SLC30A4人源基因质粒 |
| P2903/pENTR223-CLASP2人源基因质粒 |
| P2904/pENTR223-KLHDC3人源基因质粒 |
| P2905/pENTR223-KRR1-T617C人源基因质粒 |
| P2906/pENTR223-SEPT6-T1217C人源基因质粒 |
| P2907/pENTR223-COPS2人源基因质粒 |
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