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- 上海
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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pCAMBIA2200
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pCAMBIA2200植物表达质粒
别称: pCAMBIA2200
质粒属性
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 8895 bp ds-DNA circular SYN 14-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 6
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 8895)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Wednesday, September 14, 2016 from SnapGene Viewer 3.2.1
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..8895
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
misc_feature 82..106
/note="RB T-DNA repeat"
/note="right border repeat from nopaline C58 T-DNA"
CDS complement(166..399)
/codon_start=1
/gene="lacZ fragment"
/product="LacZ-alpha fragment of beta-galactosidase"
/note="lacZ-alpha"
/translation="MTMITNSSSVPGDPLESTCRHASLALAVVLQRRDWENPGVTQLNR
LAAHPPFASWRNSEEARTDRPSQQLRSLNGEC"
primer_bind 309..325
/note="M13 fwd"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
misc_feature 329..385
/note="MCS"
/note="pUC18/19 multiple cloning site"
primer_bind complement(395..411)
/note="M13 rev"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
protein_bind 419..435
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(443..473)
/note="lac promoter"
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind 488..509
/bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
/note="CAP binding site"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
promoter 700..1377
/note="CaMV 35S promoter (enhanced)"
/note="cauliflower mosaic virus 35S promoter with a
duplicated enhancer region"
CDS 1440..2237
/codon_start=1
/gene="aph(3')-II (or nptII)"
/product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
/note="NeoR/KanR"
/note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418
(Geneticin(R))"
/translation="MGIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGR
PVLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLL
SSHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPAT-CPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEH
QGLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDI
ALATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
polyA_signal 2294..2468
/note="CaMV poly(A) signal"
/note="cauliflower mosaic virus polyadenylation signal"
misc_feature 2546..2570
/note="LB T-DNA repeat"
/note="left border repeat from nopaline C58 T-DNA"
CDS 3098..3757
/codon_start=1
/gene="cat"
/product="chloramphenicol acetyltransferase"
/note="CmR"
/note="confers resistance to chloramphenicol"
/translation="MEKKITGYTTVDISQWHRKEHFEAFQSVAQCTYNQTVQLDITAFL
KTVKKNKHKFYPAFIHILARLMNAHPEFRMAMKDGELVIWDSVHPCYTVFHEQTETFSS
LWSEYHDDFRQFLHIYSQDVACYGENLAYFPKGFIENMFFVSANPWVSFTSFDLNVANM
DNFFAPVFTMGKYYTQGDKVLMPLAIQVHHAVCDGFHVGRMLNELQQYCDEWQGGA"
rep_origin 4028..4616
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
misc_feature 4802..4942
/note="bom"
/note="basis of mobility region from pBR322"
rep_origin 5286..5480
/note="pVS1 oriV"
/note="origin of replication for the Pseudomonas plasmid
pVS1 (Heeb et al., 2000)"
CDS complement(5546..6619)
/codon_start=1
/product="replication protein from the Pseudomonas plasmid
pVS1 (Heeb et al., 2000)"
/note="pVS1 RepA"
/translation="MSGRKPSGPVQIGAALGDDLVEKLKAAQAAQRQRIEAEARPGESW
QAAADRIRKESRQPPAAGAPSIRKPPKGDEQPDFFVPMLYDVGTRDSRSIMDVAVFRLS
KRDRRAGEVIRYELPDGHVEVSAGPAGMASVWDYDLVLMAVSHLTESMNRYREGKGDKP
GRVFRPHVADVLKFCRRADGGKQKDDLVETCIRLNTTHVAMQRTKKAKNGRLVTVSEGE
ALISRYKIVKSETGRPEYIEIELADWMYREITEGKNPDVLTVHPDYFLIDPGIGRFLYR
LARRAAGKAEARWLFKTIYERSGSAGEFKKFCFTVRKLIGSNDLPEYDLKEEAGQAGPI
LVMRYRNLIEGEASAGS"
CDS complement(7048..7677)
/codon_start=1
/product="stability protein from the Pseudomonas plasmid
pVS1 (Heeb et al., 2000)"
/note="pVS1 StaA"
/translation="MKVIAVLNQKGGSGKTTIATHLARALQLAGADVLLVDSDPQGSAR
DWAAVREDQPLTVVGIDRPTIDRDVKAIGRRDFVVIDGAPQAADLAVSAIKAADFVLIP
VQPSPYDIWATADLVELVKQRIEVTDGRLQAAFVVSRAIKGTRIGGEVAEALAGYELPI
LESRITQRVSYPGTAAAGTTVLESEPEGDAAREVQALAAEIKSKLI"
ORIGIN
1 cacatacaaa tggacgaacg gataaacctt ttcacgccct tttaaatatc cgttattcta
61 ataaacgctc ttttctctta ggtttacccg ccaatatatc ctgtcaaaca ctgatagttt
121 aaactgaagg cgggaaacga caatctgatc caagctcaag ctgctctagc attcgccatt
181 caggctgcgc aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat tacgccagct
241 ggcgaaaggg ggatgtgctg caaggcgatt aagttgggta acgccagggt tttcccagtc
301 acgacgttgt aaaacgacgg ccagtgccaa gcttgcatgc ctgcaggtcg actctagagg
361 atccccgggt accgagctcg aattcgtaat catggtcata gctgtttcct gtgtgaaatt
421 gttatccgct cacaattcca cacaacatac gagccggaag cataaagtgt aaagcctggg
481 gtgcctaatg agtgagctaa ctcacattaa ttgcgttgcg ctcactgccc gctttccagt
541 cgggaaacct gtcgtgccag ctgcattaat gaatcggcca acgcgcgggg agaggcggtt
601 tgcgtattgg ctagagcagc ttgccaacat ggtggagcac gacactctcg tctactccaa
661 gaatatcaaa gatacagtct cagaagacca aagggctatt gagacttttc aacaaagggt
721 aatatcggga aacctcctcg gattccattg cccagctatc tgtcacttca tcaaaaggac
781 agtagaaaag gaaggtggca cctacaaatg ccatcattgc gataaaggaa aggctatcgt
841 tcaagatgcc tctgccgaca gtggtcccaa agatggaccc ccacccacga ggagcatcgt
901 ggaaaaagaa gacgttccaa ccacgtcttc aaagcaagtg gattgatgtg ataacatggt
961 ggagcacgac actctcgtct actccaagaa tatcaaagat acagtctcag aagaccaaag
1021 ggctattgag acttttcaac aaagggtaat atcgggaaac ctcctcggat tccattgccc
1081 agctatctgt cacttcatca aaaggacagt agaaaaggaa ggtggcacct acaaatgcca
1141 tcattgcgat aaaggaaagg ctatcgttca agatgcctct gccgacagtg gtcccaaaga
1201 tggaccccca cccacgagga gcatcgtgga aaaagaagac gttccaacca cgtcttcaaa
1261 gcaagtggat tgatgtgata tctccactga cgtaagggat gacgcacaat cccactatcc
1321 ttcgcaagac cttcctctat ataaggaagt tcatttcatt tggagaggac acgctgaaat
1381 caccagtctc tctctacaaa tctatctctc tcgagctttc gcagatctgt cgatcgacca
1441 tggggattga acaagatgga ttgcacgcag gttctccggc cgcttgggtg gagaggctat
1501 tcggctatga ctgggcacaa cagacaatcg gctgctctga tgccgccgtg ttccggctgt
1561 cagcgcaggg gcgcccggtt ctttttgtca agaccgacct gtccggtgcc ctgaatgaac
1621 tccaggacga ggcagcgcgg ctatcgtggc tggccacgac gggcgttcct tgcgcagctg
1681 tgctcgacgt tgtcactgaa gcgggaaggg actggctgct attgggcgaa gtgccggggc
1741 aggatctcct gtcatctcac cttgctcctg ccgagaaagt atccatcatg gctgatgcaa
1801 tgcggcggct gcatacgctt gatccggcta cctgcccatt cgaccaccaa gcgaaacatc
1861 gcatcgagcg agcacgtact cggatggaag ccggtcttgt cgatcaggat gatctggacg
1921 aagagcatca ggggctcgcg ccagccgaac tgttcgccag gctcaaggcg cgcatgcccg
1981 acggcgagga tctcgtcgtg acacatggcg atgcctgctt gccgaatatc atggtggaaa
2041 atggccgctt ttctggattc atcgactgtg gccggctggg tgtggcggac cgctatcagg
2101 acatagcgtt ggctacccgt gatattgctg aagagcttgg cggcgaatgg gctgaccgct
2161 tcctcgtgct ttacggtatc gccgctcccg attcgcagcg catcgccttc tatcgccttc
2221 ttgacgagtt cttctgagcg ggactctggg gttcggatcg atcctctagc tagagtcgat
2281 cgacaagctc gagtttctcc ataataatgt gtgagtagtt cccagataag ggaattaggg
2341 ttcctatagg gtttcgctca tgtgttgagc atataagaaa cccttagtat gtatttgtat
2401 ttgtaaaata cttctatcaa taaaatttct aattcctaaa accaaaatcc agtactaaaa
2461 tccagatccc ccgaattaat tcggcgttaa ttcagtacat taaaaacgtc cgcaatgtgt
2521 tattaagttg tctaagcgtc aatttgttta caccacaata tatcctgcca ccagccagcc
2581 aacagctccc cgaccggcag ctcggcacaa aatcaccact cgatacaggc agcccatcag
2641 tccgggacgg cgtcagcggg agagccgttg taaggcggca gactttgctc atgttaccga
2701 tgctattcgg aagaacggca actaagctgc cgggtttgaa acacggatga tctcgcggag
2761 ggtagcatgt tgattgtaac gatgacagag cgttgctgcc tgtgatcaat tcgggcacga
2821 acccagtgga cataagcctc gttcggttcg taagctgtaa tgcaagtagc gtaactgccg
2881 tcacgcaact ggtccagaac cttgaccgaa cgcagcggtg gtaacggcgc agtggcggtt
2941 ttcatggctt cttgttatga catgtttttt tggggtacag tctatgcctc gggcatccaa
3001 gcagcaagcg cgttacgccg tgggtcgatg tttgatgtta tggagcagca acgatgttac
3061 gcagcagggc agtcgcccta aaacaaagtt aaacatcatg gagaaaaaaa tcactggata
3121 taccaccgtt gatatatccc aatggcatcg taaagaacat tttgaggcat ttcagtcagt
3181 tgctcaatgt acctataacc agaccgttca gctggatatt acggcctttt taaagaccgt
3241 aaagaaaaat aagcacaagt tttatccggc ctttattcac attcttgccc gcctgatgaa
3301 tgctcatccg gagttccgta tggcaatgaa agacggtgag ctggtgatat gggatagtgt
3361 tcacccttgt tacaccgttt tccatgagca aactgaaacg ttttcatcgc tctggagtga
3421 ataccacgac gatttccggc agtttctaca catatattcg caagatgtgg cgtgttacgg
3481 tgaaaacctg gcctatttcc ctaaagggtt tattgagaat atgtttttcg tctcagccaa
3541 tccctgggtg agtttcacca gttttgattt aaacgtggcc aatatggaca acttcttcgc
3601 ccccgttttc acaatgggca aatattatac gcaaggcgac aaggtgctga tgccgctggc
3661 gattcaggtt catcatgccg tttgtgatgg cttccatgtc ggcagaatgc ttaatgaatt
3721 acaacagtac tgcgatgagt ggcagggcgg ggcgtaattt ttttaaggca gttattggtg
3781 cgatcctcta gctagaaatt cgttcaagcc gacgccgctt cgccggcgtt aactcaagcg
3841 attagatgca ctaagcacat aattgctcac agccaaacta tcaggtcaag tctgctttta
3901 ttatttttaa gcgtgcataa taagccctac acaaattggg agatatatca tgcatgacca
3961 aaatccctta acgtgagttt tcgttccact gagcgtcaga ccccgtagaa aagatcaaag
4021 gatcttcttg agatcctttt tttctgcgcg taatctgctg cttgcaaaca aaaaaaccac
4081 cgctaccagc ggtggtttgt ttgccggatc aagagctacc aactcttttt ccgaaggtaa
4141 ctggcttcag cagagcgcag ataccaaata ctgtccttct agtgtagccg tagttaggcc
4201 accacttcaa gaactctgta gcaccgccta catacctcgc tctgctaatc ctgttaccag
4261 tggctgctgc cagtggcgat aagtcgtgtc ttaccgggtt ggactcaaga cgatagttac
4321 cggataaggc gcagcggtcg ggctgaacgg ggggttcgtg cacacagccc agcttggagc
4381 gaacgaccta caccgaactg agatacctac agcgtgagct atgagaaagc gccacgcttc
4441 ccgaagggag aaaggcggac aggtatccgg taagcggcag ggtcggaaca ggagagcgca
4501 cgagggagct tccaggggga aacgcctggt atctttatag tcctgtcggg tttcgccacc
4561 tctgacttga gcgtcgattt ttgtgatgct cgtcaggggg gcggagccta tggaaaaacg
4621 ccagcaacgc ggccttttta cggttcctgg ccttttgctg gccttttgct cacatgttct
4681 ttcctgcgtt atcccctgat tctgtggata accgtattac cgcctttgag tgagctgata
4741 ccgctcgccg cagccgaacg accgagcgca gcgagtcagt gagcgaggaa gcggaagagc
4801 gcctgatgcg gtattttctc cttacgcatc tgtgcggtat ttcacaccgc atatggtgca
4861 ctctcagtac aatctgctct gatgccgcat agttaagcca gtatacactc cgctatcgct
4921 acgtgactgg gtcatggctg cgccccgaca cccgccaaca cccgctgacg cgccctgacg
4981 ggcttgtctg ctcccggcat ccgcttacag acaagctgtg accgtctccg ggagctgcat
5041 gtgtcagagg ttttcaccgt catcaccgaa acgcgcgagg cagggtgcct tgatgtgggc
5101 gccggcggtc gagtggcgac ggcgcggctt gtccgcgccc tggtagattg cctggccgta
5161 ggccagccat ttttgagcgg ccagcggccg cgataggccg acgcgaagcg gcggggcgta
5221 gggagcgcag cgaccgaagg gtaggcgctt tttgcagctc ttcggctgtg cgctggccag
5281 acagttatgc acaggccagg cgggttttaa gagttttaat aagttttaaa gagttttagg
5341 cggaaaaatc gccttttttc tcttttatat cagtcactta catgtgtgac cggttcccaa
5401 tgtacggctt tgggttccca atgtacgggt tccggttccc aatgtacggc tttgggttcc
5461 caatgtacgt gctatccaca ggaaagagac cttttcgacc tttttcccct gctagggcaa
5521 tttgccctag catctgctcc gtacattagg aaccggcgga tgcttcgccc tcgatcaggt
5581 tgcggtagcg catgactagg atcgggccag cctgccccgc ctcctccttc aaatcgtact
5641 ccggcaggtc atttgacccg atcagcttgc gcacggtgaa acagaacttc ttgaactctc
5701 cggcgctgcc actgcgttcg tagatcgtct tgaacaacca tctggcttct gccttgcctg
5761 cggcgcggcg tgccaggcgg tagagaaaac ggccgatgcc gggatcgatc aaaaagtaat
5821 cggggtgaac cgtcagcacg tccgggttct tgccttctgt gatctcgcgg tacatccaat
5881 cagctagctc gatctcgatg tactccggcc gcccggtttc gctctttacg atcttgtagc
5941 ggctaatcaa ggcttcaccc tcggataccg tcaccaggcg gccgttcttg gccttcttcg
6001 tacgctgcat ggcaacgtgc gtggtgttta accgaatgca ggtttctacc aggtcgtctt
6061 tctgctttcc gccatcggct cgccggcaga acttgagtac gtccgcaacg tgtggacgga
6121 acacgcggcc gggcttgtct cccttccctt cccggtatcg gttcatggat tcggttagat
6181 gggaaaccgc catcagtacc aggtcgtaat cccacacact ggccatgccg gccggccctg
6241 cggaaacctc tacgtgcccg tctggaagct cgtagcggat cacctcgcca gctcgtcggt
6301 cacgcttcga cagacggaaa acggccacgt ccatgatgct gcgactatcg cgggtgccca
6361 cgtcatagag catcggaacg aaaaaatctg gttgctcgtc gcccttgggc ggcttcctaa
6421 tcgacggcgc accggctgcc ggcggttgcc gggattcttt gcggattcga tcagcggccg
6481 cttgccacga ttcaccgggg cgtgcttctg cctcgatgcg ttgccgctgg gcggcctgcg
6541 cggccttcaa cttctccacc aggtcatcac ccagcgccgc gccgatttgt accgggccgg
6601 atggtttgcg accgctcacg ccgattcctc gggcttgggg gttccagtgc cattgcaggg
6661 ccggcagaca acccagccgc ttacgcctgg ccaaccgccc gttcctccac acatggggca
6721 ttccacggcg tcggtgcctg gttgttcttg attttccatg ccgcctcctt tagccgctaa
6781 aattcatcta ctcatttatt catttgctca tttactctgg tagctgcgcg atgtattcag
6841 atagcagctc ggtaatggtc ttgccttggc gtaccgcgta catcttcagc ttggtgtgat
6901 cctccgccgg caactgaaag ttgacccgct tcatggctgg cgtgtctgcc aggctggcca
6961 acgttgcagc cttgctgctg cgtgcgctcg gacggccggc acttagcgtg tttgtgcttt
7021 tgctcatttt ctctttacct cattaactca aatgagtttt gatttaattt cagcggccag
7081 cgcctggacc tcgcgggcag cgtcgccctc gggttctgat tcaagaacgg ttgtgccggc
7141 ggcggcagtg cctgggtagc tcacgcgctg cgtgatacgg gactcaagaa tgggcagctc
7201 gtacccggcc agcgcctcgg caacctcacc gccgatgcgc gtgcctttga tcgcccgcga
7261 cacgacaaag gccgcttgta gccttccatc cgtgacctca atgcgctgct taaccagctc
7321 caccaggtcg gcggtggccc atatgtcgta agggcttggc tgcaccggaa tcagcacgaa
7381 gtcggctgcc ttgatcgcgg acacagccaa gtccgccgcc tggggcgctc cgtcgatcac
7441 tacgaagtcg cgccggccga tggccttcac gtcgcggtca atcgtcgggc ggtcgatgcc
7501 gacaacggtt agcggttgat cttcccgcac ggccgcccaa tcgcgggcac tgccctgggg
7561 atcggaatcg actaacagaa catcggcccc ggcgagttgc agggcgcggg ctagatgggt
7621 tgcgatggtc gtcttgcctg acccgccttt ctggttaagt acagcgataa ccttcatgcg
7681 ttccccttgc gtatttgttt atttactcat cgcatcatat acgcagcgac cgcatgacgc
7741 aagctgtttt actcaaatac acatcacctt tttagacggc ggcgctcggt ttcttcagcg
7801 gccaagctgg ccggccaggc cgccagcttg gcatcagaca aaccggccag gatttcatgc
7861 agccgcacgg ttgagacgtg cgcgggcggc tcgaacacgt acccggccgc gatcatctcc
7921 gcctcgatct cttcggtaat gaaaaacggt tcgtcctggc cgtcctggtg cggtttcatg
7981 cttgttcctc ttggcgttca ttctcggcgg ccgccagggc gtcggcctcg gtcaatgcgt
8041 cctcacggaa ggcaccgcgc cgcctggcct cggtgggcgt cacttcctcg ctgcgctcaa
8101 gtgcgcggta cagggtcgag cgatgcacgc caagcagtgc agccgcctct ttcacggtgc
8161 ggccttcctg gtcgatcagc tcgcgggcgt gcgcgatctg tgccggggtg agggtagggc
8221 gggggccaaa cttcacgcct cgggccttgg cggcctcgcg cccgctccgg gtgcggtcga
8281 tgattaggga acgctcgaac tcggcaatgc cggcgaacac ggtcaacacc atgcggccgg
8341 ccggcgtggt ggtgtcggcc cacggctctg ccaggctacg caggcccgcg ccggcctcct
8401 ggatgcgctc ggcaatgtcc agtaggtcgc gggtgctgcg ggccaggcgg tctagcctgg
8461 tcactgtcac aacgtcgcca gggcgtaggt ggtcaagcat cctggccagc tccgggcggt
8521 cgcgcctggt gccggtgatc ttctcggaaa acagcttggt gcagccggcc gcgtgcagtt
8581 cggcccgttg gttggtcaag tcctggtcgt cggtgctgac gcgggcatag cccagcaggc
8641 cagcggcggc gctcttgttc atggcgtaat gtctccggtt ctagtcgcaa gtattctact
8701 ttatgcgact aaaacacgcg acaagaaaac gccaggaaaa gggcagggcg gcagcctgtc
8761 gcgtaactta ggacttgtgc gacatgtcgt tttcagaaga cggctgcact gaacgtcaga
8821 agccgactgc actatagcag cggaggggtt ggatcaaagt actttgatcc cgaggggaac
8881 cctgtggttg gcatg
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pCAMBIA2200植物表达质粒
别称: pCAMBIA2200
| 启动子: | Lac,CaMV 35S |
|---|---|
| 复制子: | pVS1 |
| 质粒分类: | 植物系列，蛋白过表达载体 |
| 质粒大小: | 8895bp |
| 原核抗性: | Chl |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 植物细胞 |
| 5'测序引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
| 3'测序引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
质粒属性
| 载体宿主： | 植物 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Chl |
| 筛选标记： | |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 8895 bp ds-DNA circular SYN 14-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 6
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 8895)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Wednesday, September 14, 2016 from SnapGene Viewer 3.2.1
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..8895
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
misc_feature 82..106
/note="RB T-DNA repeat"
/note="right border repeat from nopaline C58 T-DNA"
CDS complement(166..399)
/codon_start=1
/gene="lacZ fragment"
/product="LacZ-alpha fragment of beta-galactosidase"
/note="lacZ-alpha"
/translation="MTMITNSSSVPGDPLESTCRHASLALAVVLQRRDWENPGVTQLNR
LAAHPPFASWRNSEEARTDRPSQQLRSLNGEC"
primer_bind 309..325
/note="M13 fwd"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
misc_feature 329..385
/note="MCS"
/note="pUC18/19 multiple cloning site"
primer_bind complement(395..411)
/note="M13 rev"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
protein_bind 419..435
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(443..473)
/note="lac promoter"
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind 488..509
/bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
/note="CAP binding site"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
promoter 700..1377
/note="CaMV 35S promoter (enhanced)"
/note="cauliflower mosaic virus 35S promoter with a
duplicated enhancer region"
CDS 1440..2237
/codon_start=1
/gene="aph(3')-II (or nptII)"
/product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
/note="NeoR/KanR"
/note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418
(Geneticin(R))"
/translation="MGIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGR
PVLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLL
SSHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPAT-CPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEH
QGLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDI
ALATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
polyA_signal 2294..2468
/note="CaMV poly(A) signal"
/note="cauliflower mosaic virus polyadenylation signal"
misc_feature 2546..2570
/note="LB T-DNA repeat"
/note="left border repeat from nopaline C58 T-DNA"
CDS 3098..3757
/codon_start=1
/gene="cat"
/product="chloramphenicol acetyltransferase"
/note="CmR"
/note="confers resistance to chloramphenicol"
/translation="MEKKITGYTTVDISQWHRKEHFEAFQSVAQCTYNQTVQLDITAFL
KTVKKNKHKFYPAFIHILARLMNAHPEFRMAMKDGELVIWDSVHPCYTVFHEQTETFSS
LWSEYHDDFRQFLHIYSQDVACYGENLAYFPKGFIENMFFVSANPWVSFTSFDLNVANM
DNFFAPVFTMGKYYTQGDKVLMPLAIQVHHAVCDGFHVGRMLNELQQYCDEWQGGA"
rep_origin 4028..4616
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
misc_feature 4802..4942
/note="bom"
/note="basis of mobility region from pBR322"
rep_origin 5286..5480
/note="pVS1 oriV"
/note="origin of replication for the Pseudomonas plasmid
pVS1 (Heeb et al., 2000)"
CDS complement(5546..6619)
/codon_start=1
/product="replication protein from the Pseudomonas plasmid
pVS1 (Heeb et al., 2000)"
/note="pVS1 RepA"
/translation="MSGRKPSGPVQIGAALGDDLVEKLKAAQAAQRQRIEAEARPGESW
QAAADRIRKESRQPPAAGAPSIRKPPKGDEQPDFFVPMLYDVGTRDSRSIMDVAVFRLS
KRDRRAGEVIRYELPDGHVEVSAGPAGMASVWDYDLVLMAVSHLTESMNRYREGKGDKP
GRVFRPHVADVLKFCRRADGGKQKDDLVETCIRLNTTHVAMQRTKKAKNGRLVTVSEGE
ALISRYKIVKSETGRPEYIEIELADWMYREITEGKNPDVLTVHPDYFLIDPGIGRFLYR
LARRAAGKAEARWLFKTIYERSGSAGEFKKFCFTVRKLIGSNDLPEYDLKEEAGQAGPI
LVMRYRNLIEGEASAGS"
CDS complement(7048..7677)
/codon_start=1
/product="stability protein from the Pseudomonas plasmid
pVS1 (Heeb et al., 2000)"
/note="pVS1 StaA"
/translation="MKVIAVLNQKGGSGKTTIATHLARALQLAGADVLLVDSDPQGSAR
DWAAVREDQPLTVVGIDRPTIDRDVKAIGRRDFVVIDGAPQAADLAVSAIKAADFVLIP
VQPSPYDIWATADLVELVKQRIEVTDGRLQAAFVVSRAIKGTRIGGEVAEALAGYELPI
LESRITQRVSYPGTAAAGTTVLESEPEGDAAREVQALAAEIKSKLI"
ORIGIN
1 cacatacaaa tggacgaacg gataaacctt ttcacgccct tttaaatatc cgttattcta
61 ataaacgctc ttttctctta ggtttacccg ccaatatatc ctgtcaaaca ctgatagttt
121 aaactgaagg cgggaaacga caatctgatc caagctcaag ctgctctagc attcgccatt
181 caggctgcgc aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat tacgccagct
241 ggcgaaaggg ggatgtgctg caaggcgatt aagttgggta acgccagggt tttcccagtc
301 acgacgttgt aaaacgacgg ccagtgccaa gcttgcatgc ctgcaggtcg actctagagg
361 atccccgggt accgagctcg aattcgtaat catggtcata gctgtttcct gtgtgaaatt
421 gttatccgct cacaattcca cacaacatac gagccggaag cataaagtgt aaagcctggg
481 gtgcctaatg agtgagctaa ctcacattaa ttgcgttgcg ctcactgccc gctttccagt
541 cgggaaacct gtcgtgccag ctgcattaat gaatcggcca acgcgcgggg agaggcggtt
601 tgcgtattgg ctagagcagc ttgccaacat ggtggagcac gacactctcg tctactccaa
661 gaatatcaaa gatacagtct cagaagacca aagggctatt gagacttttc aacaaagggt
721 aatatcggga aacctcctcg gattccattg cccagctatc tgtcacttca tcaaaaggac
781 agtagaaaag gaaggtggca cctacaaatg ccatcattgc gataaaggaa aggctatcgt
841 tcaagatgcc tctgccgaca gtggtcccaa agatggaccc ccacccacga ggagcatcgt
901 ggaaaaagaa gacgttccaa ccacgtcttc aaagcaagtg gattgatgtg ataacatggt
961 ggagcacgac actctcgtct actccaagaa tatcaaagat acagtctcag aagaccaaag
1021 ggctattgag acttttcaac aaagggtaat atcgggaaac ctcctcggat tccattgccc
1081 agctatctgt cacttcatca aaaggacagt agaaaaggaa ggtggcacct acaaatgcca
1141 tcattgcgat aaaggaaagg ctatcgttca agatgcctct gccgacagtg gtcccaaaga
1201 tggaccccca cccacgagga gcatcgtgga aaaagaagac gttccaacca cgtcttcaaa
1261 gcaagtggat tgatgtgata tctccactga cgtaagggat gacgcacaat cccactatcc
1321 ttcgcaagac cttcctctat ataaggaagt tcatttcatt tggagaggac acgctgaaat
1381 caccagtctc tctctacaaa tctatctctc tcgagctttc gcagatctgt cgatcgacca
1441 tggggattga acaagatgga ttgcacgcag gttctccggc cgcttgggtg gagaggctat
1501 tcggctatga ctgggcacaa cagacaatcg gctgctctga tgccgccgtg ttccggctgt
1561 cagcgcaggg gcgcccggtt ctttttgtca agaccgacct gtccggtgcc ctgaatgaac
1621 tccaggacga ggcagcgcgg ctatcgtggc tggccacgac gggcgttcct tgcgcagctg
1681 tgctcgacgt tgtcactgaa gcgggaaggg actggctgct attgggcgaa gtgccggggc
1741 aggatctcct gtcatctcac cttgctcctg ccgagaaagt atccatcatg gctgatgcaa
1801 tgcggcggct gcatacgctt gatccggcta cctgcccatt cgaccaccaa gcgaaacatc
1861 gcatcgagcg agcacgtact cggatggaag ccggtcttgt cgatcaggat gatctggacg
1921 aagagcatca ggggctcgcg ccagccgaac tgttcgccag gctcaaggcg cgcatgcccg
1981 acggcgagga tctcgtcgtg acacatggcg atgcctgctt gccgaatatc atggtggaaa
2041 atggccgctt ttctggattc atcgactgtg gccggctggg tgtggcggac cgctatcagg
2101 acatagcgtt ggctacccgt gatattgctg aagagcttgg cggcgaatgg gctgaccgct
2161 tcctcgtgct ttacggtatc gccgctcccg attcgcagcg catcgccttc tatcgccttc
2221 ttgacgagtt cttctgagcg ggactctggg gttcggatcg atcctctagc tagagtcgat
2281 cgacaagctc gagtttctcc ataataatgt gtgagtagtt cccagataag ggaattaggg
2341 ttcctatagg gtttcgctca tgtgttgagc atataagaaa cccttagtat gtatttgtat
2401 ttgtaaaata cttctatcaa taaaatttct aattcctaaa accaaaatcc agtactaaaa
2461 tccagatccc ccgaattaat tcggcgttaa ttcagtacat taaaaacgtc cgcaatgtgt
2521 tattaagttg tctaagcgtc aatttgttta caccacaata tatcctgcca ccagccagcc
2581 aacagctccc cgaccggcag ctcggcacaa aatcaccact cgatacaggc agcccatcag
2641 tccgggacgg cgtcagcggg agagccgttg taaggcggca gactttgctc atgttaccga
2701 tgctattcgg aagaacggca actaagctgc cgggtttgaa acacggatga tctcgcggag
2761 ggtagcatgt tgattgtaac gatgacagag cgttgctgcc tgtgatcaat tcgggcacga
2821 acccagtgga cataagcctc gttcggttcg taagctgtaa tgcaagtagc gtaactgccg
2881 tcacgcaact ggtccagaac cttgaccgaa cgcagcggtg gtaacggcgc agtggcggtt
2941 ttcatggctt cttgttatga catgtttttt tggggtacag tctatgcctc gggcatccaa
3001 gcagcaagcg cgttacgccg tgggtcgatg tttgatgtta tggagcagca acgatgttac
3061 gcagcagggc agtcgcccta aaacaaagtt aaacatcatg gagaaaaaaa tcactggata
3121 taccaccgtt gatatatccc aatggcatcg taaagaacat tttgaggcat ttcagtcagt
3181 tgctcaatgt acctataacc agaccgttca gctggatatt acggcctttt taaagaccgt
3241 aaagaaaaat aagcacaagt tttatccggc ctttattcac attcttgccc gcctgatgaa
3301 tgctcatccg gagttccgta tggcaatgaa agacggtgag ctggtgatat gggatagtgt
3361 tcacccttgt tacaccgttt tccatgagca aactgaaacg ttttcatcgc tctggagtga
3421 ataccacgac gatttccggc agtttctaca catatattcg caagatgtgg cgtgttacgg
3481 tgaaaacctg gcctatttcc ctaaagggtt tattgagaat atgtttttcg tctcagccaa
3541 tccctgggtg agtttcacca gttttgattt aaacgtggcc aatatggaca acttcttcgc
3601 ccccgttttc acaatgggca aatattatac gcaaggcgac aaggtgctga tgccgctggc
3661 gattcaggtt catcatgccg tttgtgatgg cttccatgtc ggcagaatgc ttaatgaatt
3721 acaacagtac tgcgatgagt ggcagggcgg ggcgtaattt ttttaaggca gttattggtg
3781 cgatcctcta gctagaaatt cgttcaagcc gacgccgctt cgccggcgtt aactcaagcg
3841 attagatgca ctaagcacat aattgctcac agccaaacta tcaggtcaag tctgctttta
3901 ttatttttaa gcgtgcataa taagccctac acaaattggg agatatatca tgcatgacca
3961 aaatccctta acgtgagttt tcgttccact gagcgtcaga ccccgtagaa aagatcaaag
4021 gatcttcttg agatcctttt tttctgcgcg taatctgctg cttgcaaaca aaaaaaccac
4081 cgctaccagc ggtggtttgt ttgccggatc aagagctacc aactcttttt ccgaaggtaa
4141 ctggcttcag cagagcgcag ataccaaata ctgtccttct agtgtagccg tagttaggcc
4201 accacttcaa gaactctgta gcaccgccta catacctcgc tctgctaatc ctgttaccag
4261 tggctgctgc cagtggcgat aagtcgtgtc ttaccgggtt ggactcaaga cgatagttac
4321 cggataaggc gcagcggtcg ggctgaacgg ggggttcgtg cacacagccc agcttggagc
4381 gaacgaccta caccgaactg agatacctac agcgtgagct atgagaaagc gccacgcttc
4441 ccgaagggag aaaggcggac aggtatccgg taagcggcag ggtcggaaca ggagagcgca
4501 cgagggagct tccaggggga aacgcctggt atctttatag tcctgtcggg tttcgccacc
4561 tctgacttga gcgtcgattt ttgtgatgct cgtcaggggg gcggagccta tggaaaaacg
4621 ccagcaacgc ggccttttta cggttcctgg ccttttgctg gccttttgct cacatgttct
4681 ttcctgcgtt atcccctgat tctgtggata accgtattac cgcctttgag tgagctgata
4741 ccgctcgccg cagccgaacg accgagcgca gcgagtcagt gagcgaggaa gcggaagagc
4801 gcctgatgcg gtattttctc cttacgcatc tgtgcggtat ttcacaccgc atatggtgca
4861 ctctcagtac aatctgctct gatgccgcat agttaagcca gtatacactc cgctatcgct
4921 acgtgactgg gtcatggctg cgccccgaca cccgccaaca cccgctgacg cgccctgacg
4981 ggcttgtctg ctcccggcat ccgcttacag acaagctgtg accgtctccg ggagctgcat
5041 gtgtcagagg ttttcaccgt catcaccgaa acgcgcgagg cagggtgcct tgatgtgggc
5101 gccggcggtc gagtggcgac ggcgcggctt gtccgcgccc tggtagattg cctggccgta
5161 ggccagccat ttttgagcgg ccagcggccg cgataggccg acgcgaagcg gcggggcgta
5221 gggagcgcag cgaccgaagg gtaggcgctt tttgcagctc ttcggctgtg cgctggccag
5281 acagttatgc acaggccagg cgggttttaa gagttttaat aagttttaaa gagttttagg
5341 cggaaaaatc gccttttttc tcttttatat cagtcactta catgtgtgac cggttcccaa
5401 tgtacggctt tgggttccca atgtacgggt tccggttccc aatgtacggc tttgggttcc
5461 caatgtacgt gctatccaca ggaaagagac cttttcgacc tttttcccct gctagggcaa
5521 tttgccctag catctgctcc gtacattagg aaccggcgga tgcttcgccc tcgatcaggt
5581 tgcggtagcg catgactagg atcgggccag cctgccccgc ctcctccttc aaatcgtact
5641 ccggcaggtc atttgacccg atcagcttgc gcacggtgaa acagaacttc ttgaactctc
5701 cggcgctgcc actgcgttcg tagatcgtct tgaacaacca tctggcttct gccttgcctg
5761 cggcgcggcg tgccaggcgg tagagaaaac ggccgatgcc gggatcgatc aaaaagtaat
5821 cggggtgaac cgtcagcacg tccgggttct tgccttctgt gatctcgcgg tacatccaat
5881 cagctagctc gatctcgatg tactccggcc gcccggtttc gctctttacg atcttgtagc
5941 ggctaatcaa ggcttcaccc tcggataccg tcaccaggcg gccgttcttg gccttcttcg
6001 tacgctgcat ggcaacgtgc gtggtgttta accgaatgca ggtttctacc aggtcgtctt
6061 tctgctttcc gccatcggct cgccggcaga acttgagtac gtccgcaacg tgtggacgga
6121 acacgcggcc gggcttgtct cccttccctt cccggtatcg gttcatggat tcggttagat
6181 gggaaaccgc catcagtacc aggtcgtaat cccacacact ggccatgccg gccggccctg
6241 cggaaacctc tacgtgcccg tctggaagct cgtagcggat cacctcgcca gctcgtcggt
6301 cacgcttcga cagacggaaa acggccacgt ccatgatgct gcgactatcg cgggtgccca
6361 cgtcatagag catcggaacg aaaaaatctg gttgctcgtc gcccttgggc ggcttcctaa
6421 tcgacggcgc accggctgcc ggcggttgcc gggattcttt gcggattcga tcagcggccg
6481 cttgccacga ttcaccgggg cgtgcttctg cctcgatgcg ttgccgctgg gcggcctgcg
6541 cggccttcaa cttctccacc aggtcatcac ccagcgccgc gccgatttgt accgggccgg
6601 atggtttgcg accgctcacg ccgattcctc gggcttgggg gttccagtgc cattgcaggg
6661 ccggcagaca acccagccgc ttacgcctgg ccaaccgccc gttcctccac acatggggca
6721 ttccacggcg tcggtgcctg gttgttcttg attttccatg ccgcctcctt tagccgctaa
6781 aattcatcta ctcatttatt catttgctca tttactctgg tagctgcgcg atgtattcag
6841 atagcagctc ggtaatggtc ttgccttggc gtaccgcgta catcttcagc ttggtgtgat
6901 cctccgccgg caactgaaag ttgacccgct tcatggctgg cgtgtctgcc aggctggcca
6961 acgttgcagc cttgctgctg cgtgcgctcg gacggccggc acttagcgtg tttgtgcttt
7021 tgctcatttt ctctttacct cattaactca aatgagtttt gatttaattt cagcggccag
7081 cgcctggacc tcgcgggcag cgtcgccctc gggttctgat tcaagaacgg ttgtgccggc
7141 ggcggcagtg cctgggtagc tcacgcgctg cgtgatacgg gactcaagaa tgggcagctc
7201 gtacccggcc agcgcctcgg caacctcacc gccgatgcgc gtgcctttga tcgcccgcga
7261 cacgacaaag gccgcttgta gccttccatc cgtgacctca atgcgctgct taaccagctc
7321 caccaggtcg gcggtggccc atatgtcgta agggcttggc tgcaccggaa tcagcacgaa
7381 gtcggctgcc ttgatcgcgg acacagccaa gtccgccgcc tggggcgctc cgtcgatcac
7441 tacgaagtcg cgccggccga tggccttcac gtcgcggtca atcgtcgggc ggtcgatgcc
7501 gacaacggtt agcggttgat cttcccgcac ggccgcccaa tcgcgggcac tgccctgggg
7561 atcggaatcg actaacagaa catcggcccc ggcgagttgc agggcgcggg ctagatgggt
7621 tgcgatggtc gtcttgcctg acccgccttt ctggttaagt acagcgataa ccttcatgcg
7681 ttccccttgc gtatttgttt atttactcat cgcatcatat acgcagcgac cgcatgacgc
7741 aagctgtttt actcaaatac acatcacctt tttagacggc ggcgctcggt ttcttcagcg
7801 gccaagctgg ccggccaggc cgccagcttg gcatcagaca aaccggccag gatttcatgc
7861 agccgcacgg ttgagacgtg cgcgggcggc tcgaacacgt acccggccgc gatcatctcc
7921 gcctcgatct cttcggtaat gaaaaacggt tcgtcctggc cgtcctggtg cggtttcatg
7981 cttgttcctc ttggcgttca ttctcggcgg ccgccagggc gtcggcctcg gtcaatgcgt
8041 cctcacggaa ggcaccgcgc cgcctggcct cggtgggcgt cacttcctcg ctgcgctcaa
8101 gtgcgcggta cagggtcgag cgatgcacgc caagcagtgc agccgcctct ttcacggtgc
8161 ggccttcctg gtcgatcagc tcgcgggcgt gcgcgatctg tgccggggtg agggtagggc
8221 gggggccaaa cttcacgcct cgggccttgg cggcctcgcg cccgctccgg gtgcggtcga
8281 tgattaggga acgctcgaac tcggcaatgc cggcgaacac ggtcaacacc atgcggccgg
8341 ccggcgtggt ggtgtcggcc cacggctctg ccaggctacg caggcccgcg ccggcctcct
8401 ggatgcgctc ggcaatgtcc agtaggtcgc gggtgctgcg ggccaggcgg tctagcctgg
8461 tcactgtcac aacgtcgcca gggcgtaggt ggtcaagcat cctggccagc tccgggcggt
8521 cgcgcctggt gccggtgatc ttctcggaaa acagcttggt gcagccggcc gcgtgcagtt
8581 cggcccgttg gttggtcaag tcctggtcgt cggtgctgac gcgggcatag cccagcaggc
8641 cagcggcggc gctcttgttc atggcgtaat gtctccggtt ctagtcgcaa gtattctact
8701 ttatgcgact aaaacacgcg acaagaaaac gccaggaaaa gggcagggcg gcagcctgtc
8761 gcgtaactta ggacttgtgc gacatgtcgt tttcagaaga cggctgcact gaacgtcaga
8821 agccgactgc actatagcag cggaggggtt ggatcaaagt actttgatcc cgaggggaac
8881 cctgtggttg gcatg
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2712/pENTR223-GALNT12（928-1746bp）人源基因质粒 |
| P2713/pENTR223-ASGR2人源基因质粒 |
| P2714/pENTR223-ADAM22人源基因质粒 |
| P2715/pENTR223-FLCN人源基因质粒 |
| P2716/pENTR223-IL5RA-A646G人源基因质粒 |
| P2717/pENTR223-BST2人源基因质粒 |
| P2718/pENTR223-TRIM5人源基因质粒 |
| P2719/pENTR223-LRG1-C397T人源基因质粒 |
| P2720/pENTR223-HPF1-G521A人源基因质粒 |
| P2721/pENTR223-SPDEF-599G-C997人源基因质粒 |
| P2722/pENTR223-RPF2（2点突变）人源基因质粒 |
| P2723/pENTR223-STX18-T985C人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
ws 各位站友，本人因克隆某个植物抗病基因而完成了其BAC文库，目前正在做图位克隆的工作。 但文库的完成耗费了大量人力、物力和财力，因此想请教下该库还有什么其它用途。或与其 它技术结合，可开展什么工作。 谢谢了。。。。 zhujoker BAC (Bacterial Artificial Chromosome, 细菌人工染色体)文库是进行全基因组测序、构建物理图谱、染色体步
蓝果树科。乔木，高 15～ 20米。叶互生，纸质，宽卵形，长 9～ 15厘米，先端渐尖，基部心形，边缘有粗锯齿，下面密生淡黄色粗毛。花杂性，由多数雄花和一朵两性花组成顶生的头状花序，花序下有两片白色大苞片，花盛开之时，似一群白鸽栖落树上，故有中国鸽子树之称。核果长卵形，长 3～ 4厘米，紫绿色。分布于湖北、湖南、贵州、四川、云南、陕西等省区。生海拔 1800～ 2200米的山地林中。我国特有珍稀植物，现列为国家一级稀有保护植物。由于花的苞片美丽奇特，尤如白鸽展翅，是世界著名
：（ 1）他描述了近 2200种澳洲植物，包括 1700个新种和 140个新属，并于 1810年发表了有关当地植物区系的著作，加上他的其他方面一系列出色的工作，使大英博物馆成了当时植物分类学的国际中心；（ 2） 1827年他首次观察到“布朗运动”（悬浮在液体或气体中的微粒所作的永不停止的无规则运动），这是原生质的特征之一；（ 3） 1831年他发现并命名了细胞核，并认为这是植物细胞的普遍结构，为后来细胞学说的建立奠定了基础。
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