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- 2025年07月15日
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- 详细信息
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- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid #12253
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pRSV-Rev慢病毒包装质粒
别称: Plasmid #12253
质粒属性
质粒简介
Rev cDNA expressing plasmid in which the joined second and third exons of HIV-1 rev are under the transcriptional control of RSV U3 promoter. Part of the 3rd generation packaging system. Please note that most of Trono lab lentiviral vectors can only be used with the 2nd generation packaging system.
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4180 bp ds-DNA circular SYN 01-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 6
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4180)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Thursday, September 1, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4180
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
rep_origin 1024..1612
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
protein_bind 1900..1921
/bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
/note="CAP binding site"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
promoter 1936..1966
/note="lac promoter"
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind 1974..1990
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
primer_bind 1998..2014
/note="M13 rev"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
promoter 2159..2420
/note="RSV promoter"
/note="Rous sarcoma virus enhancer/promoter"
primer_bind complement(2983..2999)
/note="M13 fwd"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
rep_origin 3331..3786
/direction=RIGHT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 4068..4172
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
CDS 4173..853
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
ORIGIN
1 tcaacatttc cgtgtcgccc ttattccctt ttttgcggca ttttgccttc ctgtttttgc
61 tcacccagaa acgctggtga aagtaaaaga tgctgaagat cagttgggtg cacgagtggg
121 ttacatcgaa ctggatctca acagcggtaa gatccttgag agttttcgcc ccgaagaacg
181 ttttccaatg atgagcactt ttaaagttct gctatgtggc gcggtattat cccgtattga
241 cgccgggcaa gagcaactcg gtcgccgcat acactattct cagaatgact tggttgagta
301 ctcaccagtc acagaaaagc atcttacgga tggcatgaca gtaagagaat tatgcagtgc
361 tgccataacc atgagtgata acactgcggc caacttactt ctgacaacga tcggaggacc
421 gaaggagcta accgcttttt tgcacaacat gggggatcat gtaactcgcc ttgatcgttg
481 ggaaccggag ctgaatgaag ccataccaaa cgacgagcgt gacaccacga tgcctgtagc
541 aatggcaaca acgttgcgca aactattaac tggcgaacta cttactctag cttcccggca
601 acaattaata gactggatgg aggcggataa agttgcagga ccacttctgc gctcggccct
661 tccggctggc tggtttattg ctgataaatc tggagccggt gagcgtgggt ctcgcggtat
721 cattgcagca ctggggccag atggtaagcc ctcccgtatc gtagttatct acacgacggg
781 gagtcaggca actatggatg aacgaaatag acagatcgct gagataggtg cctcactgat
841 taagcattgg taactgtcag accaagttta ctcatatata ctttagattg atttaaaact
901 tcatttttaa tttaaaagga tctaggtgaa gatccttttt gataatctca tgaccaaaat
961 cccttaacgt gagttttcgt tccactgagc gtcagacccc gtagaaaaga tcaaaggatc
1021 ttcttgagat cctttttttc tgcgcgtaat ctgctgcttg caaacaaaaa aaccaccgct
1081 accagcggtg gtttgtttgc cggatcaaga gctaccaact ctttttccga aggtaactgg
1141 cttcagcaga gcgcagatac caaatactgt tcttctagtg tagccgtagt taggccacca
1201 cttcaagaac tctgtagcac cgcctacata cctcgctctg ctaatcctgt taccagtggc
1261 tgctgccagt ggcgataagt cgtgtcttac cgggttggac tcaagacgat agttaccgga
1321 taaggcgcag cggtcgggct gaacgggggg ttcgtgcaca cagcccagct tggagcgaac
1381 gacctacacc gaactgagat acctacagcg tgagctatga gaaagcgcca cgcttcccga
1441 agggagaaag gcggacaggt atccggtaag cggcagggtc ggaacaggag agcgcacgag
1501 ggagcttcca gggggaaacg cctggtatct ttatagtcct gtcgggtttc gccacctctg
1561 acttgagcgt cgatttttgt gatgctcgtc aggggggcgg agcctatgga aaaacgccag
1621 caacgcggcc tttttacggt tcctggcctt ttgctggcct tttgctcaca tgttctttcc
1681 tgcgttatcc cctgattctg tggataaccg tattaccgcc tttgagtgag ctgataccgc
1741 tcgccgcagc cgaacgaccg agcgcagcga gtcagtgagc gaggaagcgg aagagcgccc
1801 aatacgcaaa ccgcctctcc ccgcgcgttg gccgattcat taatgcagct ggcacgacag
1861 gtttcccgac tggaaagcgg gcagtgagcg caacgcaatt aatgtgagtt agctcactca
1921 ttaggcaccc caggctttac actttatgct tccggctcgt atgttgtgtg gaattgtgag
1981 cggataacaa tttcacacag gaaacagcta tgacatgatt acgaattcga tgtacgggcc
2041 agatatacgc gtatctgagg ggactagggt gtgtttaggc gaaaagcggg gcttcggttg
2101 tacgcggtta ggagtcccct caggatatag tagtttcgct tttgcatagg gagggggaaa
2161 tgtagtctta tgcaatactc ttgtagtctt gcaacatggt aacgatgagt tagcaacatg
2221 ccttacaagg agagaaaaag caccgtgcat gccgattggt ggaagtaagg tggtacgatc
2281 gtgccttatt aggaaggcaa cagacgggtc tgacatggat tggacgaacc actgaattcc
2341 gcattgcaga gatattgtat ttaagtgcct agctcgatac aataaacgcc atttgaccat
2401 tcaccacatt ggtgtgcacc tccaagctcg agctcgttta gtgaaccgtc agatcgcctg
2461 gagacgccat ccacgctgtt ttgacctcca tagaagacac cgggaccgat ccagcctccc
2521 ctcgaagcta gtcgattagg catctcctat ggcaggaaga agcggagaca gcgacgaaga
2581 cctcctcaag gcagtcagac tcatcaagtt tctctatcaa agcaacccac ctcccaatcc
2641 cgaggggacc cgacaggccc gaaggaatag aagaagaagg tggagagaga gacagagaca
2701 gatccattcg attagtgaac ggatccttag cacttatctg ggacgatctg cggagcctgt
2761 gcctcttcag ctaccaccgc ttgagagact tactcttgat tgtaacgagg attgtggaac
2821 ttctgggacg cagggggtgg gaagccctca aatattggtg gaatctccta caatattgga
2881 gtcaggagct aaagaatagt gctgttagct tgctcaatgc cacagctata gcagtagctg
2941 aggggacaga tagggttata gaagtagtac aagaagcttg gcactggccg tcgttttaca
3001 acgtcgtgat ctgagcctgg gagatctctg gctaactagg gaacccactg cttaagcctc
3061 aataaagctt gccttgagtg cttcaagtag tgtgtgcccg tctgttgtgt gactctggta
3121 actagagatc aggaaaaccc tggcgttacc caacttaatc gccttgcagc acatccccct
3181 ttcgccagct ggcgtaatag cgaagaggcc cgcaccgatc gcccttccca acagttgcgc
3241 agcctgaatg gcgaatggcg cctgatgcgg tattttctcc ttacgcatct gtgcggtatt
3301 tcacaccgca tacgtcaaag caaccatagt acgcgccctg tagcggcgca ttaagcgcgg
3361 cgggtgtggt ggttacgcgc agcgtgaccg ctacacttgc cagcgcccta gcgcccgctc
3421 ctttcgcttt cttcccttcc tttctcgcca cgttcgccgg ctttccccgt caagctctaa
3481 atcgggggct ccctttaggg ttccgattta gtgctttacg gcacctcgac cccaaaaaac
3541 ttgatttggg tgatggttca cgtagtgggc catcgccctg atagacggtt tttcgccctt
3601 tgacgttgga gtccacgttc tttaatagtg gactcttgtt ccaaactgga acaacactca
3661 accctatctc gggctattct tttgatttat aagggatttt gccgatttcg gcctattggt
3721 taaaaaatga gctgatttaa caaaaattta acgcgaattt taacaaaata ttaacgttta
3781 caattttatg gtgcactctc agtacaatct gctctgatgc cgcatagtta agccagcccc
3841 gacacccgcc aacacccgct gacgcgccct gacgggcttg tctgctcccg gcatccgctt
3901 acagacaagc tgtgaccgtc tccgggagct gcatgtgtca gaggttttca ccgtcatcac
3961 cgaaacgcgc gagacgaaag ggcctcgtga tacgcctatt tttataggtt aatgtcatga
4021 taataatggt ttcttagacg tcaggtggca cttttcgggg aaatgtgcgc ggaaccccta
4081 tttgtttatt tttctaaata cattcaaata tgtatccgct catgagacaa taaccctgat
4141 aaatgcttca ataatattga aaaaggaaga gtatgagtat
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pRSV-Rev慢病毒包装质粒
别称: Plasmid #12253
| 启动子: | RSV |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 质粒分类: | 病毒系列，慢病毒包装载体 |
| 质粒大小: | 4180bp |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | Stbl3 |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
| 3'测序引物: | 根据序列设计引物 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞,慢病毒 |
|---|---|
| 载体用途： | |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | |
| 原核抗性： | Amp |
| 真核抗性： | |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
Rev cDNA expressing plasmid in which the joined second and third exons of HIV-1 rev are under the transcriptional control of RSV U3 promoter. Part of the 3rd generation packaging system. Please note that most of Trono lab lentiviral vectors can only be used with the 2nd generation packaging system.
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4180 bp ds-DNA circular SYN 01-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 6
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4180)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Thursday, September 1, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4180
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
rep_origin 1024..1612
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
protein_bind 1900..1921
/bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
/note="CAP binding site"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
promoter 1936..1966
/note="lac promoter"
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind 1974..1990
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
primer_bind 1998..2014
/note="M13 rev"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
promoter 2159..2420
/note="RSV promoter"
/note="Rous sarcoma virus enhancer/promoter"
primer_bind complement(2983..2999)
/note="M13 fwd"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
rep_origin 3331..3786
/direction=RIGHT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 4068..4172
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
CDS 4173..853
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
ORIGIN
1 tcaacatttc cgtgtcgccc ttattccctt ttttgcggca ttttgccttc ctgtttttgc
61 tcacccagaa acgctggtga aagtaaaaga tgctgaagat cagttgggtg cacgagtggg
121 ttacatcgaa ctggatctca acagcggtaa gatccttgag agttttcgcc ccgaagaacg
181 ttttccaatg atgagcactt ttaaagttct gctatgtggc gcggtattat cccgtattga
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541 aatggcaaca acgttgcgca aactattaac tggcgaacta cttactctag cttcccggca
601 acaattaata gactggatgg aggcggataa agttgcagga ccacttctgc gctcggccct
661 tccggctggc tggtttattg ctgataaatc tggagccggt gagcgtgggt ctcgcggtat
721 cattgcagca ctggggccag atggtaagcc ctcccgtatc gtagttatct acacgacggg
781 gagtcaggca actatggatg aacgaaatag acagatcgct gagataggtg cctcactgat
841 taagcattgg taactgtcag accaagttta ctcatatata ctttagattg atttaaaact
901 tcatttttaa tttaaaagga tctaggtgaa gatccttttt gataatctca tgaccaaaat
961 cccttaacgt gagttttcgt tccactgagc gtcagacccc gtagaaaaga tcaaaggatc
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1321 taaggcgcag cggtcgggct gaacgggggg ttcgtgcaca cagcccagct tggagcgaac
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1921 ttaggcaccc caggctttac actttatgct tccggctcgt atgttgtgtg gaattgtgag
1981 cggataacaa tttcacacag gaaacagcta tgacatgatt acgaattcga tgtacgggcc
2041 agatatacgc gtatctgagg ggactagggt gtgtttaggc gaaaagcggg gcttcggttg
2101 tacgcggtta ggagtcccct caggatatag tagtttcgct tttgcatagg gagggggaaa
2161 tgtagtctta tgcaatactc ttgtagtctt gcaacatggt aacgatgagt tagcaacatg
2221 ccttacaagg agagaaaaag caccgtgcat gccgattggt ggaagtaagg tggtacgatc
2281 gtgccttatt aggaaggcaa cagacgggtc tgacatggat tggacgaacc actgaattcc
2341 gcattgcaga gatattgtat ttaagtgcct agctcgatac aataaacgcc atttgaccat
2401 tcaccacatt ggtgtgcacc tccaagctcg agctcgttta gtgaaccgtc agatcgcctg
2461 gagacgccat ccacgctgtt ttgacctcca tagaagacac cgggaccgat ccagcctccc
2521 ctcgaagcta gtcgattagg catctcctat ggcaggaaga agcggagaca gcgacgaaga
2581 cctcctcaag gcagtcagac tcatcaagtt tctctatcaa agcaacccac ctcccaatcc
2641 cgaggggacc cgacaggccc gaaggaatag aagaagaagg tggagagaga gacagagaca
2701 gatccattcg attagtgaac ggatccttag cacttatctg ggacgatctg cggagcctgt
2761 gcctcttcag ctaccaccgc ttgagagact tactcttgat tgtaacgagg attgtggaac
2821 ttctgggacg cagggggtgg gaagccctca aatattggtg gaatctccta caatattgga
2881 gtcaggagct aaagaatagt gctgttagct tgctcaatgc cacagctata gcagtagctg
2941 aggggacaga tagggttata gaagtagtac aagaagcttg gcactggccg tcgttttaca
3001 acgtcgtgat ctgagcctgg gagatctctg gctaactagg gaacccactg cttaagcctc
3061 aataaagctt gccttgagtg cttcaagtag tgtgtgcccg tctgttgtgt gactctggta
3121 actagagatc aggaaaaccc tggcgttacc caacttaatc gccttgcagc acatccccct
3181 ttcgccagct ggcgtaatag cgaagaggcc cgcaccgatc gcccttccca acagttgcgc
3241 agcctgaatg gcgaatggcg cctgatgcgg tattttctcc ttacgcatct gtgcggtatt
3301 tcacaccgca tacgtcaaag caaccatagt acgcgccctg tagcggcgca ttaagcgcgg
3361 cgggtgtggt ggttacgcgc agcgtgaccg ctacacttgc cagcgcccta gcgcccgctc
3421 ctttcgcttt cttcccttcc tttctcgcca cgttcgccgg ctttccccgt caagctctaa
3481 atcgggggct ccctttaggg ttccgattta gtgctttacg gcacctcgac cccaaaaaac
3541 ttgatttggg tgatggttca cgtagtgggc catcgccctg atagacggtt tttcgccctt
3601 tgacgttgga gtccacgttc tttaatagtg gactcttgtt ccaaactgga acaacactca
3661 accctatctc gggctattct tttgatttat aagggatttt gccgatttcg gcctattggt
3721 taaaaaatga gctgatttaa caaaaattta acgcgaattt taacaaaata ttaacgttta
3781 caattttatg gtgcactctc agtacaatct gctctgatgc cgcatagtta agccagcccc
3841 gacacccgcc aacacccgct gacgcgccct gacgggcttg tctgctcccg gcatccgctt
3901 acagacaagc tgtgaccgtc tccgggagct gcatgtgtca gaggttttca ccgtcatcac
3961 cgaaacgcgc gagacgaaag ggcctcgtga tacgcctatt tttataggtt aatgtcatga
4021 taataatggt ttcttagacg tcaggtggca cttttcgggg aaatgtgcgc ggaaccccta
4081 tttgtttatt tttctaaata cattcaaata tgtatccgct catgagacaa taaccctgat
4141 aaatgcttca ataatattga aaaaggaaga gtatgagtat
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1952/pENTR223-TRNAU1AP(331-864)人源基因质粒 |
| P1953/pENTR223-HMGN3-G221C人源基因质粒 |
| P1954/pENTR223-OCIAD2人源基因质粒 |
| P1955/pENTR223-MPC1人源基因质粒 |
| P1956/pENTR223-S100A16人源基因质粒 |
| P1957/pENTR223-LOC79015人源基因质粒 |
| P1959/pENTR223-MRPS33人源基因质粒 |
| P1960/pENTR223-GPR65人源基因质粒 |
| P1961/pENTR223-SSR3人源基因质粒 |
| P1962/pENTR223-TMEM87A人源基因质粒 |
| P1963/pENTR223-CSRP3人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
sunyuzhu10 包装质粒是pMD2.G pMDLg/pRRE pRSV-Rev 过表达载体是pLVX-IRES-ZsGreen1 这样的四个质粒能包装出慢病毒么？ 请有经验的战友帮忙看下 暴君 可以的 644414915 pMD2.G是VSVG吗 我现在正在包病毒，别人给了我这四个质粒，别的什么都没说，我不知道该怎么包装装染 谁有具体步骤 转染
immunodeficiency virus) 、 SIV (Simian immunodeficiency virus) 。其中研究最多最为透彻的是HIV。 重组 慢病毒的产生：瞬时转染法，即将包装结构和载体结构瞬时共转染法如293T 高表达细胞系而产生重组慢病毒。此法非常成功，大多实验室采用此法。包膜质粒、包装质粒与载体质粒共转(多用磷酸钙共沉淀法)染293T细胞直接产生生产细胞。最后重组慢病毒分泌到培养基中进行培养而得到大量载体慢病毒。 三质粒来包装产生重组 慢病毒
表达，而且在整合时整个转录区域都可以整合，降低了慢病毒对启动子的激活机会。 2、慢病毒载体历史及构建 目前，使用不同种属来源的慢病毒载体： 第一代慢病毒载体系统是以Naldini及Kafri构建的三质粒系统为代表，该系统由包装质粒、包膜质粒及载体质粒3种质粒组成。载体质粒携带了5’端LTR和全部5’端非翻译区域、以及rev应答元件( RRE)及3’端LTR。 包装质粒由HIV-1莳病毒基因组做简单修改得到，其5’端LTR由异源病毒启动子／增强子元件取代。包膜质粒
pRSV-Rev慢病毒包装质粒
￥100 - 1000
