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无锡云萃生物
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| 规格: | 5mg | 产品价格: | ¥100.0 |
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云萃
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文献和实验相关专题 本实验采取碱裂解法的方法来提取质粒 ,之后经琼脂糖凝胶电泳来检测DNA。 质粒DNA 的提取与鉴定 (一)碱裂解法提取质粒 [实验原理] 碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键会被断裂,但两条互补
原理聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(Acrylamide简称Acr)和交联剂甲叉双丙烯酰胺(N,Nˊ-MethyleneBisacrylamide,简称Bis),在催化剂核黄素或过硫酸铵和四甲基乙二胺的催化下,聚和而成的具有三维网状结构的胶。正常情况下蛋白的迁移率取决于它所带净电荷以及分子的大小和形状等因素。而在丙烯酰胺凝胶中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(SDS),则蛋白的迁移率主要取决于蛋白大小,与所带电荷与形状无关。因此可以利用SDS-PAGE对蛋白质分子量与纯度进行鉴定。 试剂
碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们.在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭合环状质粒DNA的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起.当加入pH4.8的乙酸钾高盐缓冲液恢复pH至中性时,共价闭合环状的质粒DNA的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,而线性的染色
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